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Welcome to episode 690. We have two tales for you this week. First, a very special book requires the talents of a very special book repairman. Then, a man finds himself on the trail of his missing son… or so he thinks.COMING UPGood Evening: This is Horror Awards Nomination: 00:01:06Thony Mintz's Grim Prognosis as read by Colin Duncan: 00:03:35S.W. Pisciotta's Their Words Like Leaves as read by Charles Conover: 00:11:30PERTINENT LINKSSupport us on Patreon! Spread the darkness.Shop Tales to Terrify MerchThis is Horror AwardsS. W. PisciottaS. W. Pisciotta on InstagramS. W. Pisciotta on BlueskyCharles Conover on FacebookCharles Conover on InstagramOriginal Score by Nebulus EntertainmentNebulus on FacebookNebulus on InstagramSPECIAL THANKS TOAmanda CarrilloLestle BaxterOrion D. HegreSupport this show http://supporter.acast.com/talestoterrify. Hosted on Acast. See acast.com/privacy for more information.

Lucas 24.13-35São Luís-MA, Brasil. 08/12/2024

Þeir Juarez og Agon héldu áfram að greina hópinn með Snorra og kláruðu miðju og sókn þar sem ýmis umræðuefni komu upp eins og við var að búast. Hér eru leikmennirnir sem til tals komu. Það var bara Bandaríkjamaðurinn Máni Austmann sem skilinn var eftir útundan enda vitum við ekkert hvenær má búast við honum til baka úr NCAA ævintýrinu. Emil Berger    1:28Danni Finns    8:05Vélin Ernir Bjarna    14:10Daði Bærings    17:25Árni Elvar  19:55Octavio   23:40Davíð Júlían   30:30Shkelzen Veseli   33:25Róbert Quental   35:10Manga   37:35Sólon   43:35Gústi   47:38Sævar Atli    52:50

Contacto de negocios: guitarrasyviejitos@gmail.com¿¡Qué tranza viejitos!? Acompáñanos en la tercera parte de la Contienda interminable para encontrar el tono sagrado. En éste vídeo les platicaremos lo que nos contó el viejito loco sobre los componentes electrónicos de la guitarra.TIMESTAMP para quienes quieren ir directo a la plática: 07:35Síguenos en nuestras viejito-redes:facebook.com/guitarrasyviejitosinstagram.com/guitarras_viejitosGracias a Amanda Flores por prestarnos su voz para el doblaje de los personajes femeninos. ¡Vayan a ver su canal! youtube.com/amandafloresdisneyanime/Si llegaste hasta aquí escribe: "NO LO MANEJAMOS!" para demostrar que eres parte del #viejitosarmy¡Gracias por vernos, viejito!

Link to bioRxiv paper: http://biorxiv.org/cgi/content/short/2020.09.21.306845v1?rss=1 Authors: Wieczorek, M., Ti, S.-C., Urnavicius, L., Molloy, K. R., Aher, A., Chait, B. T., Kapoor, T. M. Abstract: The formation of cellular microtubule networks is regulated by the {gamma}-tubulin ring complex ({gamma}-TuRC). This 2.3 MDa assembly of >31 proteins includes {gamma}-tubulin and GCP2-6, as well as MZT1 and an actin-like protein in a lumenal bridge. The challenge of reconstituting the {gamma}-TuRC has limited dissections of its assembly and function. Here, we report a complete biochemical reconstitution of the human {gamma}-TuRC ({gamma}-TuRC-GFP), a ~35S complex that nucleates microtubules in vitro. We extend our approach to generate a stable subcomplex, {gamma}-TuRCmini-GFP, which lacks MZT1 and actin. Using mutagenesis, we show that {gamma}-TuRCmini-GFP nucleates microtubules in a guanine nucleotide-dependent manner and proceeds with similar kinetics as reported for native {gamma}-TuRCs. Electron microscopy reveals that {gamma}-TuRC-GFP resembles the native {gamma}-TuRC architecture, while {gamma}-TuRCmini-GFP adopts a partial cone shape presenting only 8-10 {gamma}-tubulin subunits and lacks a well-ordered lumenal bridge. Our structure-function analysis suggests that the lumenal bridge facilitates the self-assembly of regulatory interfaces around a microtubule-nucleating core in the {gamma}-TuRC. Copy rights belong to original authors. Visit the link for more info

Funimate ve Impresso adlı uygulamaların geliştiricisi olan Pixery Labs'in kurucu ortaklarından Kemal Uğur ile keyifli bir sohbet gerçekleştirdik. Özellikle uygulama dünyasıyla ilgili kişilerin bu bölümü dinlemelerini öneririz. Funimate 50 milyona yakın indirilme sayısı sahip bir video editing uygulaması. Impresso ise cep telefonu üzerinden video yapımını kolaylaştıran bir uygulama.Bölüm içerisinde geçen linkler:Pixery Labs: https://www.pixerylabs.com/Funimate iOS: https://apps.apple.com/us/app/funimate-be-music-video-star/id844570015Funimate Android: https://play.google.com/store/apps/details?id=com.avcrbt.funimate&hl=en_USImpresso: https://apps.apple.com/us/app/impresso-video-slide-maker/id1330592794TikTok: https://www.tiktok.com/en/Stranger Things Fan Edit: https://www.instagram.com/stranger.things.edits/?hl=trBillie Eilish: https://www.instagram.com/billieeilish/?hl=trKariyer Sayfası: https://www.pixerylabs.com/careersKemal Uğur İletişim Bilgileri: kemal@pixerylabs.com00:50 - 01:52Kemal Uğur kimdir?02:02 - 06:19Pixery Labs Hikayesi Nasıl Doğdu?06:45 - 11:00Funimate uygulamasının/isminin hikayesi ve nasıl 50 milyona yakın download’a sahip olduğu.11:55 - 14:40Tiktok ve Musically’nin sıçrama yapmasının Funimate’e etkileri ve Funimate’in pazar konumlanması.14:45 - 17:00Funimate’in 2019 başından itibaren download artışının sebebi.Amerika’da günde en fazla indirilen uygulamalarda 11. olması.17:10 - 18:05Funimate'in 2 milyona yakın Instagram takipçisinin kaynağı :)18:25 - 22:20Impresso’nun hikayesi ve amaç.22:35 - 24:00İki uygulamanın gelir modeli.24:35 - 26:55Yurtdışından İstanbul’a geliş sürecindeki baskılarla başa çıkabilme.27:05 - 29:53Finlandiya’da en çok özlenenler? 31:00 - 33:45Funimate neden TikTok olamadı?33:50 - 35:10Influencer’lardan kimin kullanmasını ister?35:27 - 36:35Sıklıkla kullandığı uygulamalar.36:50 - 41:00Pixery Labs Hedefleri ve Vizyonu41:16 - 44:45Uygulama geliştiricilere verebileceği tavsiyeler.44:52 - 45:47KapanışMade in TurkeyLinkedin: https://www.linkedin.com/company/made-in-turkey/Twitter: http://twitter.com/madeinturkeyxyzEmail: selam@madeinturkey.xyzSpotify: https://open.spotify.com/show/0KrspleijwAwVpD3u4vYhaiTunes: https://podcasts.apple.com/tr/podcast/made-in-turkey/id1470738463

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Innerhalb des letzten Jahrhunderts intensiver Gedächtnisforschung ist es noch nicht gelungen, ein vollständiges und allgemein gültiges Modell für die Bildung von Langzeitgedächtnis zu entwickeln. Einige neuronale Moleküle, insbesondere Proteinkinasen und Transkriptionsfaktoren, scheinen hierbei in bestimmten Hirnregionen, deren Einbeziehung vom Lerntest abhängig ist, eine essentielle Bedeutung zu haben. Welche Rolle die lerninduzierte Neu-Expression von Genen (Transkription bzw. Translation) einnimmt, die als Teilprozesse der Konsolidierung postuliert werden, ist nach wie vor nicht eindeutig geklärt. Die Bedeutung dieser Teilprozesse wurde in dieser Arbeit bei Mäusen unter Verwendung von zwei hippokampusabhängigen Lerntests (auditorische trace-Konditionierung und kontextuelle Konditionierung) näher untersucht. Die drei hierbei im Vordergrund stehenden Aspekte waren die pharmakologische Validierung der Lerntests, der regionenspezifische Nachweis neuronaler Aktivierung und Untersuchungen zur Expression lernspezifischer Gene. Die pharmakologische Validierung der beiden Tests zeigte, dass durch lokale Gabe der translationshemmenden Substanz Anisomycin in den dorsalen Hippokampus zu verschiedenen Zeitpunkten vor und nach dem Lernereignis das Gedächtnis beeinträchtigt ist. Die proteinsyntheseabhängige Phase ist bei der kontextuellen Konditionierung spätestens nach einer Stunde abgeschlossen. Demgegenüber hatte die Hemmung der Transkription mit Amanitin auf keinen der beiden Tests Einfluss auf die Gedächtnisbildung. Die neuronale Aktivierung, die anhand der Induktion ausgewählter Immediate early genes (IEGs) im Hippokampus untersucht wurde, sollte indirekt Hinweise auf Genexpression liefern. Die IEGs waren im Gegensatz zur Literatur bei trace-Konditionierung schwach induziert (zif268 mRNA in CA1 und CA3) bzw. bei kontextueller Konditionierung nicht nachweisbar (c-Fos Protein in CA1). Um alternativ dazu die neuronale Aktivierung bezüglich einer erhöhten Proteinbiosyntheserate zu untersuchen, wurde eine Methode etabliert und validiert, die den Einbau der [35S]-markierten Aminosäuren Methionin und Cystein in neu synthetisierte Proteine regionenspezifisch darstellt (funktionelle Proteinbiosynthese). Hierbei zeigte sich in der Subregion CA1 des dorsalen Hippokampus eine erhöhte Proteinbiosyntheseaktivität nach kontextueller Konditionierung. Ein besonderer Vorteil der Methode besteht darin, dass mit Hilfe der Autoradiogramme funktionelle Netzwerke aufgezeigt werden können, indem Korrelationen in der Proteinbiosyntheseaktivität zwischen verschiedenen Hirnregionen auf deren funktionelle Einheit im Zusammenhang mit dem Lerntest verweisen. Unserer Erkenntnis nach ist das einer der ersten Befunde, womit bei Mäusen erfolgreich lernbedingte Veränderungen der Proteinbiosynthese unter Wahrung neuroanatomischer Auflösung dargestellt werden konnten. Die Untersuchungen zur lerninduzierten Expression spezifischer Gene erfolgten auf Ebene der Proteine, da bei der pharmakologischen Validierung der Lerntests nicht gezeigt werden konnte, dass Transkriptionsprozesse für die Gedächtnisbildung essentiell sind. Ausgehend von einem Standardprotokoll der zweidimensionalen Gelelektrophorese wurden unter Verwendung der radioaktiven Markierung von Proteinen mit [35S]-Methionin/Cystein Verbesserungen dieses Verfahrens hinsichtlich Sensitivität und signal-to-noise ratio erzielt. Mit dem verbesserten Verfahren konnte ein Protein gefunden werden, das nach kontextueller Konditionierung im Vergleich zu unbehandelten Tieren eine Veränderung der Nettoladung (Verschiebung des isoelektrischen Punktes) aufweist, was auf einen Unterschied in der posttranslationalen Modifikation schließen lässt. Quantitative Unterschiede wurden nicht gefunden. Dies ließe sich damit erklären, dass die Verfahren zu Proteinextraktion vor allem zytosolische Proteine berücksichtigen, membranständige Proteine jedoch weitgehend vernachlässigen. Zusammengefasst wurde im Rahmen dieser Arbeit ein Algorithmus etabliert, der sich auf vielfältige Art und Weise für Fragestellungen zur Charakterisierung lern- bzw. stressinduzierter Proteine unter Berücksichtigung neuroanatomischer Aspekte anwenden lässt. Berücksichtigt man, dass Anisomycin neben der Proteinsynthesehemmung auch andere zelluläre Prozesse beeinflusst, so fällt die vorliegende Arbeit kein abschließendes Urteil über die Rolle der Proteinbiosynthese bei hippokampusabhängigen Lernprozessen. Dies kann zu einem erheblichen Teil an der nichttopographischen Anatomie des Hippokampus liegen, so dass zukünftige Studien sich auf eng umrissene Hirnareale konzentrieren sollten.

1. Im Rahmen dieser Arbeit wurden transgene und nicht-transgene Rapspflanzen auf ihre biochemischen Unterschiede untersucht. Weiterhin wurde das Abbauverhalten des künstlich eingefügten Gens im Vergleich zu zwei endogenen Kontrollgenen im Verlauf der Seneszenz, im verrottenden Pflanzenmaterial und im Boden überprüft. Verschiedene Mikroorganismen wurden einem Selektionsdruck durch BASTA® ausgesetzt und unter diesen Bedingungen auf entstehende Resistenzen gegenüber dem Herbizid getestet. 2. Bei der Untersuchung der verschiedenen Seneszenzparametern ergaben sich für das Chlorophyll zwischen den transgenen und den nicht-transgenen Rapspflanzen keine Unterschiede. Die Bestimmungen von ACC und MACC sowie der Flavonoide hatten sich als nicht seneszenzrelevant für Brassica napus erwiesen. Bei der Analytik des Gesamtproteingehalts und der verschiedenen Aminosäuren zeigten die transgenen und nicht-transgenen Blätter ebenfalls analoges Verhalten. 3. Bei der Durchführung der quantitativen PCR wurden das rbcS-, das cab- und das pat- Gen über die gesamte Vegetationsperiode detektiert. Dabei war das pat-Gen immer in geringerer Menge nachgewiesen worden als die beiden Photosynthesegene. Der höchste Gehalt an den hier betrachteten Genen befand sich in den Stengeln. Auch im Rahmen dieser Untersuchungen zeigten die transgenen Pflanzen in ihrem Abbauverhalten keinen Unterschied zu den nicht-transgenen Pflanzen. Da das Fremdgen über gesamte Zeitdauer intakt vorlag, wäre theoretisch ein horizontaler Gentransfer möglich gewesen. Die Untersuchung des pat-Transkripts reflektierte ebenfalls den Abbau mit fortschreitender Seneszenz. Auch hier war die Detektion bis zum Ende der Vegetationsperiode möglich. Bei der Durchführung der Hybridisierung wurden für die Glutaminsynthetase zwei Transkripte detektiert. Beide Transkripte der Isoformen wurden im Verlauf der Seneszenz verstärkt exprimiert. Zusammenfassend zeigten die transgenen und die nicht-transgenen Blätter auch bei diesen Untersuchungen analoges Verhalten. 4. Das pat-Konstrukt konnte im Boden parallel zu den endogenen Pflanzengenen bis zu vier Wochen nach dem Unterpflügen der Rapspflanzen gegen Ende der Vegetationsperiode nachgewiesen werden. In den kompostierten Maispflanzen liess sich die kodierende Sequenz von 606 bp über einen Zeitraum von 23 Monaten detektieren. Während dieser Zeit stand es für einen horizontalen Gentransfer intakt zur Verfügung. Bei den Untersuchungen, unter Ausübung eines Selektionsdrucks auf verschiedene Agrobakterien-Stämme, Bacillus subtilis und Pseudomonas fluorescens, wurden keine spontanen Resistenzen erzielt. Auch konnte das 35S-pat- Gen-Konstrukt nicht erfolgreich in die Mikroorganismen transformiert werden. Aufgrund der im Rahmen dieser Arbeit erhaltenen Ergebnisse ist ein horizontaler Gentransfer als eher unwahrscheinlich einzustufen, kann aber vor allem in Anwesenheit eines Selektionsdrucks nicht ausgeschlossen werden.

We investigated the presence of autoantibodies to baculovirus-expressed human recombinant 65- and 67-kD isoforms of glutamate decarboxylase (GAD65 and GAD67) in insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM). In the immunoprecipitation test using [35S]methionine-labeled GADs antibodies to GAD65 were detected in 13/15 (87%) islet cell antibody (ICA)-positive and in 1/35 (2.9%) ICA-negative first-degree relatives of patients with IDDM, in 6/11 (54.5%) ICA-positive nondiabetic schoolchildren, and in 35/50 (70%) patients with newly diagnosed IDDM. GAD67 antibodies were positive only in five (33%) of the ICA-positive relatives (P < 0.05) and in nine (18%) IDDM patients at onset (P < 0.00001). After onset of IDDM antibodies to GAD65 and GAD67 declined but were still positive in 25 and 9.4% of subjects with long-standing IDDM (> 10 yr). In all study groups antibodies to GAD67 were only detected in GAD65 antibody-positive sera. An immunotrapping enzyme activity assay for GAD65 antibodies was positive in 64/75 (85.3%) of sera that were GAD antibody positive in the immunoprecipitation test (r = 0.870, P < 0.0001). In two (2.7%) sera GAD65 antibodies that block GAD enzyme activity were found. Our data suggest that antibodies to GAD65 but not to GAD67 represent sensitive markers for preclinical and overt IDDM. The immunotrapping assay here described represents a valuable technique for specific and sensitive screening for GAD antibodies.

The import of cytochrome c into mitochondria can be resolved into a number of discrete steps. Here we report on the covalent attachment of heme to apocytochrome c by the enzyme cytochrome c heme lyase in mitochondria from Neurospora crassa. A new method was developed to measure directly the linkage of heme to apocytochrome c. This method is independent of conformational changes in the protein accompanying heme attachment. Tryptic peptides of [35S]cysteine-labelled apocytochrome c, and of enzymatically formed holocytochrome c, were resolved by reverse-phase HPLC. The cysteine-containing peptide to which heme was attached eluted later than the corresponding peptide from apocytochrome c and could be quantified by counting 35S radioactivity as a measure of holocytochrome c formation. Using this procedure, the covalent attachment of heme to apocytochrome c, which is dependent on the enzyme cytochrome c heme lyase, could be measured. Activity required heme (as hemin) and could be reversibly inhibited by the analogue deuterohemin. Holocytochrome c formation was stimulated 5–10-fold by NADH > NADPH > glutathione and was independent of a potential across the inner mitochondrial membrane. NADH was not required for the binding of apocytochrome c to mitochondria and was not involved in the reduction of the cysteine thiols prior to heme attachment. Holocytochrome c formation was also dependent on a cytosolic factor that was necessary for the heme attaching step of cytochrome c import. The factor was a heat-stable, protease-insensitive, low-molecular-mass component of unknown function. Cytochrome c heme lyase appeared to be a soluble protein located in the mitochondrial intermembrane space and was distinct from the previously identified apocytochrome c binding protein having a similar location. A model is presented in which the covalent attachment of heme by cytochrome c heme lyase also plays an essential role in the import pathway of cytochrome c.

Biosynthesis of isocitrate lyase, a tetrameric enzyme of the glyoxysomal matrix, was studied in Neurospora crassa, in which the formation of glyoxysomes was induced by a substitution of sucrose medium by acetate medium. * 1. Translation of Neurospora mRNA in reticulocyte lysates yields a product which has the same apparent molecular weight as the subunit of the functional enzyme. Using N-formyl[35S]methionyl tRNAMetf as a label, the translation product shows the same apparent size which indicates that the amino terminus has no additional 'signal'-type sequence. * 2. Read-out systems employing free and membrane-bound polysomes show that only free ribosomes are active in the synthesis of isocitrate lyase. * 3. Isocitrate lyase synthesized in reticulocyte lysate is released into the supernatant and is soluble in a monomeric form. It interacts with Triton X-100 to form mixed micells in contrast to the functional tetrameric form. * 4. Transfer of isocitrate lyase synthesized in vitro into isolated glyoxysomes is suggested by results of experiments in which supernatants from reticulocyte lysates are incubated with a particle fraction isolated from acetate-grown cells. No transfer occurs when particles from non-induced cells are employed. Resistance to added proteinase is used as a criterion for transmembrane transfer. The data support a post-translational transfer mechanism for isocitrate lyase. They suggest that isocitrate lyase passes through a cytosolic precurscr pool as a monomer and is transferred into glyoxysomes.