Podcasts about bvdv

AABP Executive Director Dr. Fred Gingrich is joined by Dr. Yung-Yi Mosley from the University of Georgia to discuss a recently published paper from the Bovine Practitioner to study the prevalence of bovine viral diarrhea virus (BVD) on Florida and Georgia dairy farms. The purpose of the study was to do a follow-up investigation from a previous study that demonstrated a 38% prevalence of BVDV in those states in 2015-2016.  Mosley walks through a general overview of BVDV including diagnostic testing and clinical syndromes that may result when cattle are infected with BVDV, including the development of a persistently infected animal (PI). She emphasizes that vaccination alone is not an effective control program for most herds and that testing for BVDV in purchased animals and biosecurity practices are important. Mosley stresses that if a producer is introducing pregnant animals, it is critical to not only test the dam, but also the fetus when it is born. The objectives of this study were to evaluate the prevalence of BVDV in Georgia and Florida dairy farms and determine the circulating BVDV subtype in this region. The study involved 37 farms with a total of 57,000 cows and evaluated 90 samples. The study identified 10% of farms having a positive bulk tank sample. The type of BVDV found was Type 1b. Mosley discusses the significance of this compared to available BVBV vaccines. Mosley also discusses the findings of the survey that was administered to producers participating in the study.  Finally, we discuss how veterinarians can use the information from this study to screen bulk tank milk samples for BVDV. A bulk tank milk sample is a useful screening test and is accurate for up to 1,200 cows to detect a positive. Veterinarians should review their clients' BVDV control programs to evaluate potential risks and implement a comprehensive prevention program. Links: A follow-up investigation of the reported high herd prevalence of bovine viral diarrhea in dairy farms in Georgia and Florida. (2025). The Bovine Practitioner, 59(1), 17-23. https://doi.org/10.21423/bpj20259049 Jones A, Ilha M, Berghaus R, et al. Surveillance of bovine viral diarrhea virus antigen in Florida & Georgia dairy herds using bulk tank milk samples. In: 2016 National Institute for Animal Agriculture Annual Conference. 2016.

Welcome to the first of three episodes of our coverage of NCBA 2024. In this episode, Carrie Veselka visits with Rob Cook, president of the National Grazing Lands Coalition on strategies to improve grazing, Abby George discusses the impact and management of BVDV with George Perry of Texas A&M University, and Tyrell Marchant talks prenatal cattle nutrition with Ted Perry from Purina Animal Nutrition.

The Underground gang discusses the ins and outs of estrous synchronization and Vince's obsession with "Farmer Finds a Wife".Mentioned in this Episode:MontanaRanchAngus.comFacebook @AngusUndergroundInstagram @AngusUndergroundContact AngusUnderground@Yahoo.com or call (406) 210-1366 if you are interested in becoming a sponsor for Angus Underground.“Gene-editing technology used to produce first BVDV resistant calf”BeefRepro.orgIowa Beef CenterInsureMyBull.comINHERITprogress.comAltosidIGR.com Quotes:“Praise God we have high cattle prices and some optimism right now in this business because the challenges have not gone away. That's for sure.” — [8:04] “I don't think we as a breed can withstand gene editing forever.” — [11:01] “How many freaking real breeders are we are there left? Because it seems like the majority of guys are just using the science, the almighty science.” — [11:38] “Breeding cattle, for your family, for the productivity, and your own balance sheet should be topic number one.” — [15:21] “Gene editing is almost just a distraction from what's really important in life.” — [16:18] “There's no substitution for knowing the cow. There's no substitute.” — [40:36]

Gene-Editing Technology Produces First Calf Resistant to BVDV

Dr Enoch Bergman is a vet from Swans Veterinary Sevices in Esperance, Western Australia. Enoch grew up in Wild Horse, Colorado and after graduating from University, moved to Australia, fell in love and fortunately for us, never left. Since his arrival Enoch has been actively involved in Australian BVDV (Pestivirus) research. In 2006 he established Australia's first commercial laboratory for the diagnosis of animals Persistently Infected with BVDV. He travels throughout Australia delivering lectures on BVDV and many other cattle topics, such as fertility and artificial breeding programs. He does all this with great insight and application, a genuine love for his work and the people he works with. See omnystudio.com/listener for privacy information.

We finalize this series on BVDv with a cattle health discussion with OSU Extension Vet, Barry Whitworth. Barry gives great insight on the disease, symptoms and prevention measures. Managing Persistently Infected BVDv in Cattle BVD is Alive and Well in OK

The week we continue a 3 part series on BVDv and the impact on a local cattle herd. Part of the shipping fever pneumonia complex, this disease is wide reaching and impacts to the US cattle herd are significant. Think this doesn’t apply to you? Think again…this disease eludes producers with Persistently Infected (PI) animals. [ Read More ]

The week we start a 3 part series on BVDv and the impact on a local cattle herd. Part of the shipping fever pneumonia complex, this disease is wide reaching and impacts to the US cattle herd are significant. Think this doesn’t apply to you? Think again…this disease eludes producers with Persistently Infected (PI) animals. [ Read More ]

In this episode, AABP Executive Director Dr. Fred Gingrich talks with AABP Past President Dr. John Davidson. Dr. Davidson is the senior associate director of beef professional veterinary services with Boehringer Ingelheim (BI). BI is a platinum level sponsor of the 53rd AABP Annual Conference. Dr. Davidson reviews the history of bovine viral diarrhea virus (BVDV) in the US and the shift from Type 1a to Type 1b. BI has developed a website to track sample submissions for typing BVDV and results show 72% of samples submitted are Type 1b. We discuss the prevention and control strategies for beef and dairy operations including testing to identify persistently (PI) animals, biosecurity, and working with your veterinarian to develop a vaccination program, including the use of modified-live vaccines such as Pyramid 5 + Presponse SQ. We discuss some of the peer-reviewed publications on BVD Type 1b and vaccination:· Fulton R., et. al - Vaccine “Immune Response to bovine viral diarrhea vaccines (BVDV) detecting antibodies to BVDV subtypes 1a, 1b, 2a and 2c”· Leyh R. et. al - American Journal of Veterinary Research JVR “Fetal protection in heifers vaccinated with a modified-live virus vaccine containing bovine viral diarrhea virus subtypes 1a and 2a and exposed during gestation to cattle persistently infected with bovine viral diarrhea virus subtype 1b+”· Chase C. – Biologicals “The impact of BVDV Infection on Adaptive Immunity”· Wittum T. et. al – “Persistent bovine viral diarrhoea virus infection in US beef herds” Dr. Davidson wraps up the program with the Boehringer Ingelheim message “Cattle First” and what the message means to him and his colleagues. You can find the documentary produced by BI featuring the Johnson Family from Flying Diamond Ranch from Colorado at https://bit.ly/3gFWxlm. Visit the AABP virtual exhibit hall at http://louisville.aabp.org including the BI booth where you can find resources, contact information for the Professional Services Veterinary team, information on Zactran and Pyramid 5 + Presponse SQ. Find out more information about Boehringer Ingelheim and the products they carry at https://bit.ly/31Ctdbi.

Expand your approach to reduce the risks of BVDV

Kristel en Eveliese spreken over het implementeren van een arbeidsovereenkomst op 1 pagina met de Nederlandse arbeidsrechtadvocaat Daniël Maats.

In a three-pronged approach to BVDV management, Dr. Chis Chase shares why bulk-milk testing can be an effective screening tool In large dairy herds, but not for smaller operations. In terms of biosecurity, Dr. Chase shares his recommendations for how to safely merge replacement heifers into your existing herd. You’ll also learn about BVDV vaccination timing — when is the best time for modified-live-virus vaccines and when should inactivated vaccines be used. Dr. Chase also shares new findings on the emergence of BVDV type 1b, and why your vaccine should include protection against this subtype. He’ll also discuss the role of the Singer strain of type 1a in vaccines and how it can provide additional protection against BVDV 1b. Your veterinarian can play a key role in developing an effective BVDV vaccination strategy, including how to help pregnant animals develop plenty of antibodies for the colostrum, to help new calves off to a strong start.

Dr. Chris Chase is a Professor in the Department of Veterinary and Biomedical Sciences at South Dakota State University. His research has focused on developing better methods of detecting disease-causing organisms and preventing viral infections in animals. He has clinical experience in hog, dairy, cow-calf and feedlot herd health. In this episode, learn why testing every animal at birth is so important, well as why stillbirths, abortions and sudden deaths should also be tested. Dr. Chase discusses different testing methods, including polymerase chain reaction (PCR) tests using ear-notches or blood samples. He also covers when pooled laboratory samples may be appropriate. Dr. Chase recommends working with your veterinarian on a testing strategy to help minimize contaminated samples and the influence of recent vaccination that may impact test results. Finally, you’ll learn about transient BVDV infections, or infections that the animal’s immune system can clear it on its own, and when it might be worth a 30-day quarantine for animals that test positive.

In this episode, we’ll learn how PI calves typically acquire the infection in the uterus, before their immune systems have fully developed. You’ll also hear why testing the pregnant animal or the amniotic fluid are not effective for identifying PI calves. Infected calves may be healthy and grow normally or can be poor-doers that don’t live much past a year of age. In either case, the calves are infected for life and will shed the virus in all body secretions, exposing other animals in the herd. If a PI animal escapes detection, it can result in significant costs down the road. Dr. Chase shares the results of a research study that followed a herd with PI animals, including how long it took PI animals to succumb to mucosal disease. Finally, how do you determine if a calf was infected in the uterus or whether it simply has antibodies to the virus from the colostrum of a vaccinated mother? Learn this and more in episode two.

Die bovine neonatale Panzytopenie (BNP) ist ein seit 2006 auftretendes Krankheitsbild mit hoher Mortalität, bei dem neugeborene Kälber an einer hämorrhagischen Diathese aufgrund einer Panmyelophthise erkranken. Vielfältige mikrobiologisch-diagnostische Untersuchungen ergaben, wie bei anderen Arbeitsgruppen auch, keinen Hinweis auf ein infektiöses Geschehen in Zusammenhang mit BNP. IgG wurde, neben anderen Proteinen, aus Kolostrumproben von BNP- und Kontrollmüttern gereinigt, identifiziert und quantifiziert. In anschließenden Versuchen konnte eine signifikant höhere Bindung von IgG aus BNP-Kolostrum (IgGBNP) im Vergleich zu IgG aus Kontrollkolostrum (IgGKontr) an die peripheren Leukozyten genetisch nicht verwandter, junger Kälber nachgewiesen werden. Dabei war eine Bindung sowohl an Granulozyten, als auch an die peripheren mononukleären Blutzellen (PBMC) nachweisbar, wobei die Bindung an die PBMC-Population signifikant höher war. Zudem wurde eine signifikante Bindung von IgGBNP an die bovinen Zelllinien MDBK und BK-KL3A nachgewiesen. Eine Bindung an die porzine Zelllinie PK15 war nicht festzustellen. Die mögliche Toxizität von kolostralen Proteinen und von Serumproben, die von durch BNP betroffenen Kälbern und den Mutterkühen gewonnen wurden, wurde in verschiedenen Ansätzen mit oder ohne Komplementzusatz mit peripheren Leukozyten gesunder Kälber getestet. Es war weder ein Einfluss auf die Zellvitalität, noch ein Unterschied zwischen BNP- und Kontrollproben festzustellen. Da ein Zusammenhang von BNP mit dem, mittlerweile vom europäischen Markt genommenen, Impfstoff PregSure-BVD® (Pfizer) gegen die bovine Virusdiarrhö diskutiert wird, wurden Versuche zur Reduktion der Bindung von IgGBNP an die Leukozyten neugeborener Kälber mit Viruszellkulturernten verschiedener Pestiviren und den dazugehörigen Zellüberständen durchgeführt. Eine Vorinkubation von IgGBNP mit Zellkulturernten des, in MDBK-Zellen vermehrten, bovinen Virusdiarrhövirus (BVDV) und des, ebenfalls in MDBK-Zellen vermehrten, Border Disease Virus (BDV) ergab eine signifikante Reduktion der Bindung an die Leukozyten im Vergleich zu den Kontrollen. Interessanterweise war nach Vorinkubation mit Viruszellkulturernte des, in PK15-Zellen vermehrten, verwandten Pestivirus der europäischen Schweinepest (ESPV) keine Reduktion nachweisbar. Sowohl bei den Bindungstests, als auch bei den Reduktionsversuchen war es auffällig, dass dieselben IgGBNP-Proben unter gleichen Bedingungen in unterschiedlich starkem Ausmaß an die Leukozyten verschiedener Spenderkälber gebunden haben. Dies würde die bereits von anderen Arbeitsgruppen vorgeschlagene genetische Prädisposition in Zusammenhang mit der Entwicklung von BNP unterstützen. Erste Versuche zur Charakterisierung der/des Liganden der kolostralen Antikörper durch Versuche zur Reduktion der Bindung durch Vorbehandlung von MDBK-Zellen mit MHC-Klasse I-reaktiven, monoklonalen Antikörpern erbrachten keine eindeutigen Ergebnisse. Die Ergebnisse sprechen für einen oder mehrere wiederkäuerspezifische Zellliganden von IgGBNP, die entweder mit den Pestiviren BVDV und BDV assoziiert sind oder aber, hinsichtlich der Bindung an MDBK- und BK-KL3A-Zellen, auch mit Zellfragmenten aus der Produzentenzelllinie des Impfvirus in Verbindung stehen. Ein Zusammenhang mit dem Einsatz des BVDV-Impfstoffes PregSure-BVD® (Pfizer) erscheint möglich, da Impfstoffkomponenten die Bildung der leukozytenreaktiven IgG-Alloantikörper verursacht haben könnten. Ergänzend könnte eine genetische Prädisposition eine wichtige Rolle in der Entwicklung von BNP spielen.

Über einen Zeitraum von 1,5 Jahren wurden von 1013 Schaf-, 503 Ziegen- und 555 Rindern Blutproben aus 100 bayerischen Betrieben gezogen und auf das Vorhandensein von Pestivirus-Antikörpern bzw. BVDV/ BDV untersucht. Zum Antikörpernachweis wurden kommerziell erhältliche ELISAs verwandt: Ein indirekter ELISA (Svanovir BDV-Ab-ELISA, Svanova) und ein Blocking-ELISA (Priocheck BVDV-Ab-ELISA, Prionics) für Seren kleiner Wiederkäuer und ein weiterer indirekter ELISA (Svanovir BVDV-Ab-ELISA, Svanova) für Rinderseren. Weiterhin wurden 325 Pestivirus-Isolate aus bayerischen Rindern mittels Multiplex real time RT-PCR (Cador BVDV Type 1 / 2 BDV RT-PCR, Qiagen) typisiert. Die Einzeltierprävalenz betrug bei Schafen 8,2% und bei Ziegen 1,2%. Bezogen auf 91 schafhaltende Betriebe lag die Prävalenz bei 12,0%, in einem von 17 Betrieben wurden Pestivirusantikörper bei Ziegen gefunden. Mit Kreuzneutralisationstesten wurden die Antikörper typisiert: Bei den Schafseren waren 24,1% BVDV-1-, 1,2% BVDV-2-, 4,8% BVDV-1- oder 2- und 48,2% BDV-spezifisch. Die BDV-spezifischen Seren stammten alle aus einem Betrieb. Die verbleibenden 21,7% konnten wegen nur geringer Titerunterschiede zu den SNT-Stämmen nicht typisiert werden. Alle sechs Ziegenseren stammten aus einer Herde, sie wiesen jeweils den höchsten Titer gegen BVDV-2 auf, in zwei Fällen mit einem mehr als vierfachen Abstand zu BVDV-1 und BDV. Eine signifikant höhere Anzahl an seropositiven kleinen Wiederkäuern (p= 0,003) stammte aus Betrieben mit Rinderhaltung. BVDV-Infektionen von Rindern zu kleinen Wiederkäuern wurden beobachtet, wohingegen keine Hinweise für die Übertragung von Pestiviren von kleinen Wiederkäuern zu Rindern oder für die Persistenz von BVDV in kleinen Wiederkäuern vorhanden waren. Die Genotypisierung der 325 Pestivirus-Isolate aus Rindern lieferte folgendes Ergebnis: 91,4% erwiesen sich als BVDV-1 und 8,6% als BVDV-2, BDV wurde nicht gefunden. Anhand von 128 Schafseren mit neutralisierenden Antikörpern wurden Sensitivitäten von 81% für den indirekten ELISA und 94% für den Blocking-ELISA bestimmt. Die Spezifitäten lagen jeweils bei 93% and 100% (N=200 SNT-negative Seren).

Vaccination against Bovine Viral Diarrhea Virus plays a major role in the obligatory German control program decided in 2008. Both kinds of vaccines licensed today for the use in cattle have disadvantages: MLV vaccines concerning their safety and killed vaccines concerning efficacy. In the presented work, virus generated by transfection of conventional bovine cell lines with RNA derived from a new BVDV-2 full-length clone (Mischkale et al., 2009) was used to infect cattle. Its effects compared to the wild type strain were investigated. Further, two mutants derived from this BVDV-2 full-length cDNA clone were tested in a vaccination-challenge trial in cattle following two approaches of attenuation (pseudovirions and deletion of the Npro protein). Their safety and efficacy as vaccine candidates were investigated.

Persistent infizierte (PI) Tiere stellen die wichtigste Transmissionsquelle für BVDV-Infektionen dar. Neuere Studien konnten zeigen, dass sich der Virusnachweis aus Ohrgewebeproben für die sichere und frühzeitige Detektion von neugeborenen PI-Kälbern eignet. Inwieweit transiente Infektionen mit dieser Methode erkannt werden, ist bisher nicht bekannt. Ziel dieser Arbeit war es, die transiente BVDV-Infektion mit Hautgewebeproben zu untersuchen. Im Rahmen eines Tierversuches wurden sechs Kälber intranasal mit BVDV inokuliert. Bei fünf Tieren konnte in der Folge eine transiente Infektion beobachtet werden, deren Verlauf mit verschiedenen Diagnostikmethoden untersucht wurde. Der BVDV-Nachweis gelang mittels Virusisolierung, Erns-Antigen-ELISA und real time RT-PCR in Blutleukozyten, Plasma sowie Nasen- und Speichelsekreten. Die höchste Sensitivität zeigte dabei der RNA-Nachweis mittels PCR. Eine Serokonversion konnte zwischen Tag 17 und 21 nach der Virusinokulation durch Antikörper-ELISA nachgewiesen werden. Bei der Untersuchung von Hautgewebeproben (Tag 2, 4, 7, 10, 14, 17, 21 p. inf.) konnten nur bei einem Kalb zwischen 2. und 17. Tag p. inf. geringe Mengen Virus-RNA (maximal 4000 RNA-Kopien/Probe an Tag 14 p. inf.) detektiert werden. Aus lysierten Hautproben konnte bei keinem Tier Erns-Antigen nachgewiesen werden. Des Weiteren wurden Daten von transient infizierten Rindern aus dem Bayerischen Feldprojekt „Studie zur Eignung der Ohrstanzmethode bei neugeborenen Kälbern zur Bekämpfung der BVD/MD“ näher betrachtet. Bei 22 Tieren ließ sich BVDV mittels PCR sowohl im Ohrgewebe (Ct-Werte zwischen 28 und 39) als auch im Blut nachweisen. Die Ohrstanze von drei dieser Tiere war mit dem Erns-ELISA schwach positiv (OD 0,4 bis 0,5), bei vier Tieren konnten deutlich positive (OD >1,1) Ergebnisse beobachtet werden. Darunter waren auch Kälber, deren Muttertiere in der Spätgravidität mit einer Lebendvakzine geimpft wurden. Auffallend waren weiterhin sechs Tiere, die eine sehr lange Virämie (bis zu 99 Tage p. p.) zeigten. Bei einer weiteren Gruppe (elf Tiere) konnte das Virus nur im Ohrgewebe mit PCR (Ct-Werte zwischen 31 und 35) nachgewiesen werden. Diese Kälber wurden in Herden geboren, in denen später mehrere PI-Tiere geboren wurden. Ein Tier aus der Feldstudie zeigte über ein Jahr hinweg abfallende Virusmengen mittels Virusisolierung, real time PCR und Erns-ELISA in Hautbiopsien, Blutproben und Sekreten. Im Alter von zehn Lebensmonaten konnten mittels PCR im Hodengewebe große Mengen an Virus-RNA (Ct-Wert 21) detektiert werden. Das Virus war aus nur 20 Hodenzellen isolierbar, gleichzeitig erwiesen sich Sekrete und Blut als nicht infektiös in der Zellkultur. Im 14. Lebensmonat gelang nur noch der Nachweis der Virus-RNA in der Haut. Weiterhin konnte ein starker Anstieg homologer neutralisierender Antikörper gegen das persistierende Virus bis zum Titer von 25600 gemessen werden. Insgesamt ist festzustellen, dass transiente fetale und postnatale BVDV Infektionen mittels Hautbiopsien bei jungen Kälbern vereinzelt nachweisbar sind. Die PCR war hierbei deutlich sensitiver als der BVDV-Erns-Antigennachweis. Bei Neuinfektionen in Herden werden transient infizierte Kälber bereits vor den persistent infizierten geboren. Auch nach der Vakzination mit BVDV-Lebendimpfstoff sind transiente Infektionen mittels Untersuchung von Hautbioptaten nachweisbar. Erstmals konnte die fetale Infektion eines männlichen Rindes im Feld mit folgender partieller Immuntoleranz charakterisiert werden, bei dem eine Viruselimination im Blut und auf den Schleimhäuten erfolgte, nicht jedoch im Hodengewebe.

Early detection and elimination of cattle persistently infected (PI) with bovine viral diarrhoea virus (BVDV) is a key element for eradication programs. Testing dried skin biopsies derived from ear tagging might be useful for detection of BVDV in newborn calves. The aims of this study were the development of methods for antigen solubilization and RNA preparation, the investigation of the stability of these viral components and the comparison of the analytical sensitivity of different tests. Commercial antigen capture ELISAs for NS3, Erns and mixed antigens, a blocking ELISA for BVDV antibodies and two real time RT-PCR assays for 5’UTR were used as BVDV specific tests. Ear biopsies were collected from nine BVDV antibody free PI animals (infected with BVDV-I CR4043) after slaughter and from twelve PI calves (fetal infection with BVDV-I PT810) after euthanasia at the age of 5-13 days in the time of colostral antibodies. For solubilization of the BVDV antigens the detergents dodecyl sulfate, sodium deoxycholate and EMPIGEN were inappropriate. Out of the suitable detergents (CHAPS, Triton X100, Nonidet P-40, Tween 20, n-Octyl-ß-D-glucopyranoside and Digitonin) Triton X100 in a concentration of 1% was chosen for antigen solubilization. Best RNA yield was obtained using a mixer mill and a guanidine thiocyanate containing buffer, followed by RNA isolation with Qiagen RNeasy® kits (Fibrous Tissue Mini Kit and Lipid Tissue Mini Kit). RNA isolation kits provided by Roche were less efficient. NS3-ELISAs were of low analytical sensitivity for ear biopsies, maternal antibodies led to negative results. In addition NS3 epitopes are very heat sensitive. In contrast Erns-ELISAs showed high analytical sensitivity. Samples of PI animals without maternal antibodies gave mean titers above 30. Maternal antibodies had limited effects. In samples of nine PI animals with colostral antibodies the lowest titer was 13. Relevant temperatures by sample drying and storage led to minor titer reductions. The real time RT-PCR resulted in a sensitivity more than 104 fold over the detection limit, even in calves in the time of neutralizing antibodies. Bacterial or fecal contamination before sample drying had no relevant influence on the stability of Erns and 5’UTR RNA. Erns-ELISAs and real time RT-PCR seem to be suitable for detecting BVDV in dried ear notch samples of PI animals. Before appliance in BVDV eradication programs, the diagnostic sensitivity and specificity of tests using ear biopsies have to be evaluated by studies in the field with an adequate number of samples and an appropriate monitoring.

In der vorliegenden Arbeit wurden die immunogenen Eigenschaften des Nichtstruktur-proteins 3 (NS3) des Virus der Bovinen Virusdiarrhö (BVDV) erstmals im natürlichen Wirt charakterisiert. Hierzu wurden sechs Kälber dreimal im Abstand von vier Wochen mit BVDV-NS3-rekombinantem modifiziertem Vacciniavirus Ankara (MVA) intramuskulär immunisiert (>108 infektiöse Einheiten). Vier Kälber, die mit LacZ-rekombinantem MVA (>108 infektiöse Einheiten) immunisiert wurden, bildeten die Kontrollgruppe. Fünf Wochen nach der letzten Immunisierung erfolgte eine Belastungsinfektion mit dem BVD-Virusisolat PT810 (106 kulturinfektiöse Dosen50). Für die Untersuchung der BVDV-spezifischen zellulären Immunitätsmechanismen wurden die Lymphozyten aller Tiere mit infektiösem BVDV-PT810 in vitro restimuliert und mit Hilfe verschiedener Testsysteme untersucht. Eine zytofluorometrische Nachweismethode (Fluoreszenzfarbstoff: Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester [CFSE]) diente der Detektion einer antigenspezifischen Lymphozytenproliferation. Die Aktivität BVDV-spezifischer zytotoxischer T-Lymphozyten (CTL) gegen autologe, BVDV-infizierte Zielzellen wurde mit Durchflusszytometrie gemessen. Mit Hilfe einer Real Time PCR wurde die Interleukin-2 (IL-2) und 4 (IL-4) mRNA-Synthese untersucht. Ein kommerziell erhältlicher ELISA (Bovigam) diente dem Nachweis der γ-Interferon-Synthese. Über einen Zeitraum von 19 Tagen nach der intranasalen BVDV-Testinfektion wurden die Kälber täglich klinisch untersucht, die Gesamtleukozytenzahl im peripheren Blut bestimmt, quantitative BVDV-Isolierungen aus den Leukozyten durchgeführt und BVDV-spezifische Antikörper mit Serumneutralisationstesten gemessen. Bereits vor der Belastungsinfektion ließ sich bei allen Kälbern, die mit BVDV-NS3-rekombinatem MVA immunisiert wurden, eine antigenspezifische Lymphozytentransformation nachweisen. Ebenso konnte bei vier Tieren der Versuchsgruppe (N = 6) nach der dritten Immunisierung eine deutliche BVDV-spezifische Zytotoxizität gegenüber autologen Hodenzellen detektiert werden. Nach der BVDV-Belastungsinfektion war die spezifische Zytotoxizität bei fünf der sechs BVDV-NS3-MVA-Impftiere höher als bei den Tieren der LacZ-Kontrolle. Im Gegensatz zur Kontrollgruppe ließ sich bei der Versuchsgruppe nach der dritten Immunisierung ein deutlicher Anstieg der IL-2 und IL-4 mRNA-Syntheserate von in vitro mit BVDV-restimulierten Lymphozyten nachweisen. Bei fünf der sechs Kälber war zu diesem Zeitpunkt auch γ-Interferon detektierbar. Der Nachweis von BVDV-neutralisierenden Antikörpern war vor der Testinfektion bei keinem Kalb möglich. Nach der Testinfektion konnte ein spezifischer Priming-Effekt für alle immunologischen Parameter, einschließlich der Bildung BVDV-neutralisierender Antikörper, festgestellt werden. Erwartungsgemäß wurden bei beiden Tiergruppen keine Krankheitssymptome beobachtet. Das Ausmaß der Leukopenie infolge der Testinfektion war gleich. Dagegen war der semiquantitativ bestimmte BVDV-Titer in Blutproben der Kontrollgruppe an den Tagen 3-13 nach der Infektion etwa doppelt so hoch (1,9-fach) wie bei der Versuchsgruppe (p = 0,016; signifikant). Im Mittel war bei der Versuchgruppe an 6,7 Tagen und bei der Kontrollgruppe an 8,0 Tagen BVDV reisolierbar (p = 0,121; nicht signifikant). Neben den beachtlichen immunologischen Stimulationseffekten wurde die Reduktion der Viruslast als Hinweis für eine protektive Wirkung des BVDV-NS3 gewertet.

Fri, 11 Feb 2005 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/3814/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/3814/1/Semmler_Ilia.pdf Semmler, Ilia ddc:590, ddc:500, Tierär