Tierärztliche Fakultät - Digitale Hochschulschriften der LMU - Teil 03/07

Idiopathic hypertriglyceridemia has been reported in Miniature Schnauzers. However, studies investigating the prevalence of this disorder in a large population of Miniature Schnauzers are lacking. 192 healthy Miniature Schnauzers and 38 healthy dogs of other breeds (control dogs) were enrolled in this study. Serum triglyceride and cholesterol concentrations were measured and statistically compared between the Miniature Schnauzers and the control group. Dogs were categorized based on their age, and median serum triglyceride concentrations were compared among different age groups. A total of 63 (32.8%) of the 192 Miniature Schnauzers had serum triglyceride concentrations above the upper limit of the reference range. In contrast, of the 38 control dogs, only 2 (5.3%) had serum triglyceride concentrations above the upper limit of the reference range. The median serum triglyceride concentration in Miniature Schnauzers was 73.5 mg/dL, which was significantly higher compared to that of the control group (median: 55 mg/dL; p=0.0005). Serum cholesterol concentration was above the upper limit of the reference range in 9 (9.0%) of 100 Miniature Schnauzers and in 2 (5.3%) of the control dogs. Mean serum cholesterol concentrations were not significantly different between the 2 groups (p=0.1374). Median serum triglyceride concentrations in Miniature Schnauzers increased significantly with age (p

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8823/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8823/1/Hocke_Katja.pdf Hocke, Katja Bernhardine

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8837/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8837/1/Schreiber_Carolin_Susanne.pdf Schreiber, Caro

Einige auf myeloiden und lymphoiden Zellen bei Mensch und Maus identifizierte Rezeptorfamilien weisen sowohl aktivierende als auch inhibitorische Rezeptoren auf, die wichtige Funktionen bei der Regulation des Immunsystems haben. Die Triggering Receptors Expressed on Myeloid Cells (TREMs) stellen eine dieser immunregulatorischen Rezeptorfamilien dar und wurden beim Säuger bereits genauer untersucht. In der vorliegenden Doktorarbeit wurden die Mitglieder der TREMs beim Huhn eingehend charakterisiert. Der potentiell aktivierende TREM-A1 besaß eine extrazytoplasmatische Ig-Domäne und einen kurzen zytoplasmatischen Abschnitt, im transmembranen Bereich aber Lysin, als eine positiv geladene AS, die mit einem ITAM-haltigen Adaptormolekül assoziieren könnte. TREM-A1 hatte ein MR von etwa 25 kDa. Die mRNA für das membranständige TREM-A1 wurde vor allem in Makrophagen detektiert, aber auch in Gehirn, Knochenmark, Milz, Bursa und Thymus. Auf Proteinebene konnte die Expression durch einen neu hergestellten, spezifischen monoklonalen Antikörper auf Monozyten und Makrophagen, aber auch auf etwa 50% der B-Zellen und einer Subpopulation der T-Zellen nachgewiesen werden. Die mRNA der Ig-Domäne von TREM-A1 war in Thrombozyten viel höher exprimiert als die mRNA für den membranständigen Rezeptor, was einen Hinweis auf die Existenz einer löslichen Splice-Variante von TREM-A1 in diesen Zellen liefert. Mit Hilfe von Reportergenassays und löslichen Rezeptorkonstrukten konnte gezeigt werden, dass der Ligand von TREM-A1 auf stimulierten Milzleukozyten exprimiert wird, nicht jedoch auf stimulierten oder unstimulierten anderen Leukozyten. TREM-A1 wies in AS-Sequenz und Gewebeverteilung hohe Ähnlichkeit zu TREM-2 beim Säuger auf. Der inhibitorische TREM-B1 besaß zwei Ig-Domänen und einen langen zytoplasmatischen Bereich mit zwei ITIMs. TREM-B1 hatte ein MR von etwa 47 kDa und wurde mit Hilfe der qPCR vor allem auf Thrombozyten detektiert. Die ITIMs im zytoplasmatischen Anteil wurden nach Pervanadatbehandlung phosphoriliert und rekrutierten die Protein-Tyrosin-Phosphatasen SHP-1 und SHP-2. Der Ligand von TREM-B1 wurde auf mit PMA/CaIonophor stimulierten Milzleukozyten exprimiert, nicht jedoch auf mit ConA stimulierten Milzleukozyten oder auf stimulierten bzw. unstimulierten Leukozyten anderer Organe. TREM-B1 wies in AS-Sequenz und Gewebeverteilung hohe Ähnlichkeit zu TLT-1 beim Säuger auf. Vom inhibitorischen TREM-B2 existierten drei Varianten, die aber alle einen langen zytoplasmatischen Bereich mit zwei ITIMs besitzen. TREM-B2v1 besaß zwei extrazytoplasmatische Ig-Domänen, TREM-B2v2 nur eine, wobei die membran-proximale Ig-Domäne von TREM-B2v1 fehlte. TREM-B2v3 hatte die beiden Ig-Domänen von TREM-B2v1 doppelt. Die mRNA aller drei Varianten wurde vor allem in PBMC und Makrophagen exprimiert, etwas weniger hoch in Knochenmark, PBL, Milz und Caecaltonsillen.

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8874/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8874/1/Schmitt_Ferdinand.pdf Schmitt, Ferdinand

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8881/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8881/1/Schneemeier_Christine_E.pdf.pdf Schneemeier, Christine ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8882/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8882/1/Schwarz_Johannes.pdf Schwarz, Johannes

Beißvorfälle mit zum Teil tödlichem Ausgang sowie die zunehmende Bevölkerungs- und damit auch Hundedichte vor allem in Ballungsräumen führten in den letzten Jahren zu einer starken Medienpräsenz des Themas Hundehaltung und Verantwortlichkeit der Besitzer. In der Folge wurden eine Reihe von Rechtsvorschriften erlassen, die, basierend auf dem Tierschutzgesetz, stets einen Sachkundenachweis des Hundehalters fordern. Ein äußerst wichtiger Themenkomplex innerhalb dieser Sachkundeprüfungen ist Hundeverhalten, insbesondere das Ausdrucksverhalten des Hundes. Durch Kenntnisse auf diesem Gebiet könnten gefährliche Situationen rechtzeitig erkannt und umgangen werden. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, in zeitgemäßer und fundierter Form Kenntnisse über das Ausdrucksverhalten des Hundes zu vermitteln. Es wurde hierfür die Umsetzung in einem interaktiven multimedialen Lernprogramm auf CD-Rom gewählt, um mit Hilfe von Videos in bewegten Bildern den zeitlichen Ablauf der komplexen Körpersprache und Mimik von Hunden darzustellen. Das verwendete Videomaterial stammte sowohl aus eigenen Aufnahmen als auch aus Fremdaufnahmen. Der Inhalt des Programms gliedert sich in zwei große Themenkomplexe. Der geschichtliche Teil, der die Domestikation des Hundes beleuchtet, soll Hintergrundwissen über den Vorfahren des Hundes, den Wolf, vermitteln und die Umstände der Domestikation erläutern, die den Grundstock für die einzigartige Beziehung zwischen Menschen und Hunden legt. Im zweiten Themenkomplex folgen Ausführungen über die rassespezifischen Besonderheiten in der Ausdrucksmöglichkeit bestimmter Hundetypen. Ein weiteres Kapitel befasst sich mit der Individualentwicklung des Hundes. Anschließend folgt der Bereich verschiedener Kommunikationsformen des Hundes, wobei schwerpunktmäßig das optische Ausdrucksverhalten dargestellt und mit 107 Videos und 296 Fotos und Graphiken unterlegt wird. Dem Benutzer bleibt freigestellt, ob er sich Seite für Seite durch das Programm arbeiten möchte oder ob er gezielt einzelne Kapitel anwählt, je nach Kenntnisstand und Interessenslage. Insgesamt bietet das Programm einen breit gefächerten Überblick über die Verhaltensweise der Spezies Hund, was dem Benutzer zusätzlich zum eigentlichen Thema die Möglichkeit geben soll, sich Wissen über die Hintergründe der Verhaltensweisen anzueignen. Es soll sowohl Tierärzten wie auch Studenten der Tiermedizin, aber auch Hundebesitzern die Möglichkeit geben, sich Sachkunde im Hinblick auf das Ausdrucksverhalten des Hundes anzueignen, um insbesondere Gefahrensituationen rechtzeitig zu erkennen und zu umgehen.

Persistent infizierte (PI) Tiere stellen die wichtigste Transmissionsquelle für BVDV-Infektionen dar. Neuere Studien konnten zeigen, dass sich der Virusnachweis aus Ohrgewebeproben für die sichere und frühzeitige Detektion von neugeborenen PI-Kälbern eignet. Inwieweit transiente Infektionen mit dieser Methode erkannt werden, ist bisher nicht bekannt. Ziel dieser Arbeit war es, die transiente BVDV-Infektion mit Hautgewebeproben zu untersuchen. Im Rahmen eines Tierversuches wurden sechs Kälber intranasal mit BVDV inokuliert. Bei fünf Tieren konnte in der Folge eine transiente Infektion beobachtet werden, deren Verlauf mit verschiedenen Diagnostikmethoden untersucht wurde. Der BVDV-Nachweis gelang mittels Virusisolierung, Erns-Antigen-ELISA und real time RT-PCR in Blutleukozyten, Plasma sowie Nasen- und Speichelsekreten. Die höchste Sensitivität zeigte dabei der RNA-Nachweis mittels PCR. Eine Serokonversion konnte zwischen Tag 17 und 21 nach der Virusinokulation durch Antikörper-ELISA nachgewiesen werden. Bei der Untersuchung von Hautgewebeproben (Tag 2, 4, 7, 10, 14, 17, 21 p. inf.) konnten nur bei einem Kalb zwischen 2. und 17. Tag p. inf. geringe Mengen Virus-RNA (maximal 4000 RNA-Kopien/Probe an Tag 14 p. inf.) detektiert werden. Aus lysierten Hautproben konnte bei keinem Tier Erns-Antigen nachgewiesen werden. Des Weiteren wurden Daten von transient infizierten Rindern aus dem Bayerischen Feldprojekt „Studie zur Eignung der Ohrstanzmethode bei neugeborenen Kälbern zur Bekämpfung der BVD/MD“ näher betrachtet. Bei 22 Tieren ließ sich BVDV mittels PCR sowohl im Ohrgewebe (Ct-Werte zwischen 28 und 39) als auch im Blut nachweisen. Die Ohrstanze von drei dieser Tiere war mit dem Erns-ELISA schwach positiv (OD 0,4 bis 0,5), bei vier Tieren konnten deutlich positive (OD >1,1) Ergebnisse beobachtet werden. Darunter waren auch Kälber, deren Muttertiere in der Spätgravidität mit einer Lebendvakzine geimpft wurden. Auffallend waren weiterhin sechs Tiere, die eine sehr lange Virämie (bis zu 99 Tage p. p.) zeigten. Bei einer weiteren Gruppe (elf Tiere) konnte das Virus nur im Ohrgewebe mit PCR (Ct-Werte zwischen 31 und 35) nachgewiesen werden. Diese Kälber wurden in Herden geboren, in denen später mehrere PI-Tiere geboren wurden. Ein Tier aus der Feldstudie zeigte über ein Jahr hinweg abfallende Virusmengen mittels Virusisolierung, real time PCR und Erns-ELISA in Hautbiopsien, Blutproben und Sekreten. Im Alter von zehn Lebensmonaten konnten mittels PCR im Hodengewebe große Mengen an Virus-RNA (Ct-Wert 21) detektiert werden. Das Virus war aus nur 20 Hodenzellen isolierbar, gleichzeitig erwiesen sich Sekrete und Blut als nicht infektiös in der Zellkultur. Im 14. Lebensmonat gelang nur noch der Nachweis der Virus-RNA in der Haut. Weiterhin konnte ein starker Anstieg homologer neutralisierender Antikörper gegen das persistierende Virus bis zum Titer von 25600 gemessen werden. Insgesamt ist festzustellen, dass transiente fetale und postnatale BVDV Infektionen mittels Hautbiopsien bei jungen Kälbern vereinzelt nachweisbar sind. Die PCR war hierbei deutlich sensitiver als der BVDV-Erns-Antigennachweis. Bei Neuinfektionen in Herden werden transient infizierte Kälber bereits vor den persistent infizierten geboren. Auch nach der Vakzination mit BVDV-Lebendimpfstoff sind transiente Infektionen mittels Untersuchung von Hautbioptaten nachweisbar. Erstmals konnte die fetale Infektion eines männlichen Rindes im Feld mit folgender partieller Immuntoleranz charakterisiert werden, bei dem eine Viruselimination im Blut und auf den Schleimhäuten erfolgte, nicht jedoch im Hodengewebe.

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8909/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8909/1/Stadler_Oliver.pdf Stadler, Oliver ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät 0

Occurrence and toxicokinetics of myosmine depending on smoking and nutrition Myosmine, a minor tobacco alkaloid, occurs like the major tobacco alkaloids nicotine, nor-nicotine, anabasine and anatabine in small amounts in tobacco plants and tobacco smoke. Because of its low acute toxicity and the weak affinity to nicotinic receptors, no attention was given to myosmine for a long time. However, this changed with the discovery that myosmine occurs independently of nicotine in a great variety of staple foods, vegetables, fruits, nuts and dairy products and consequently in human milk, plasma and saliva. The possible health im¬pact of myosmine was further demonstrated by its conversion into reactive intermediates with carcinogenic potential. Due to its imine structure, myosmine is readily nitrosated and peroxi-dated. Nitrosation yields the tobacco-specific nitrosamine N'-nitrosonornicotine (NNN), a human carcinogen, which produces tumours in oesophagus, oral cavity and the respiratory tract of rodents. In larger quantities, the same reactive intermediates which are formed by me-tabolic activation of NNN and another tobacco-specific nitrosamine are generated by nitro-sation and peroxidation of myosmine. In biomonitoring studies the resulting DNA and protein adducts did not show the expected correlation with smoking status. Therefore, myosmine has been postulated to be an important additional source of these adducts. In the first chapter, a detailed literature survey is given covering all aspects of occurrence, biosynthesis, toxicokinetics and -dynamics of myosmine in the context of other tobacco alkaloids and tobacco-specific nitrosamines. In the experimental part, an analytical method was developed to determine myosmine, coti-nine and nicotine by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) in different matrices in order to study the occurrence of myosmine in livestock as well as in humans. First, myosmine was determined in plasma of pigs in dependence of the feeding condition. Second, human sa-liva and toenails from smokers and nonsmokers were analyzed for short and long-term expo-sure to myosmine and cotinine. The nails were also analyzed for nicotine. Finally, myosmine was determined in multiple samples of saliva of eight test persons to study the kinetics of myosmine under controlled dietary conditions. The results can be summarized as follows: • The analytical method has low detection limits for myosmine, nicotine and cotinine in toenails with 0.01, 0.02 and 0.035 ng/mg, respectively, and for myosmine and cotinine in plasma/saliva with 0.0012 and 0.05 ng/ml. The recovery is very high with 91-93% in plasma/saliva and 97–102% in toenails. The intraday precision is ≤ 8% for all analytes in toenails, whereas for plasma/saliva it is 18% with myosmine and 4% with cotinine. The analytical method has a high specificity by the use of deuterated internal standards. • In the plasma of 12 fasting pigs, myosmine was traceable with only one exception. The concentration of myosmine was 0.067 ± 0.049 ng/ml. Within 1 - 2 hours after start of fee-ding the concentration of myosmine in the plasma of 13 pigs was 0.497 ± 0.166 ng/ml, a statistically significant 7-fold difference to the fasting pigs (p < 0.0001). The swill con-tained 124 ng myosmine/g wet weight. • In toenails the concentrations of all analytes were significantly lower in 11 nonsmokers (0.021 ± 0.014 ng/mg) compared to 15 smokers (0.058 ± 0.052 ng/mg, p < 0.01). This 2.8-fold difference in myosmine concentrations between smokers and nonsmokers was clearly less than the 14-fold difference in nicotine concentrations (0.128 ± 0,008 versus 1.789 ± 0.964 ng/mg, p < 0.001). Cotinine was detectable only in toenails of smokers, 1.136 ± 0.843 ng/mg. Significant correlations exists between the concentrations of myosmine and nicotine (Spearman r = 0.67) as well as myosmine and cotinine (r = 0.63). A clearly better correlation (r = 0.83) was found between cotinine and nicotine values. • In saliva samples taken in parallel with toenails, the differences between nonsmokers and smokers were also smaller with myosmine, 0.73 ± 0.65 versus 2.54 ± 2.68 ng/ml than with cotinine, 1.85 ± 4.50 versus 83.14 ± 54.30 ng/ml. Nonetheless, concentrations of myos-mine and cotinine in saliva were highly correlated (p < 0.0001). • In eight volunteers, the kinetics of myosmine in saliva after food intake showed large indi-vidual differences. After four hours of fasting in the morning all subjects took a lunch containing about 2.7 µg of myosmine within half an hour. The basal concentrations of myosmine in saliva at lunch were between 0.05 and 0.28 ng/ml. In one subject only, a rapid rise of myosmine to 3.6 ng/ml was observed within three-quarters of an hour. In two subjects a plateau of 1.1 and 1.5 ng/ml was reached between 2½ and 4½ hours after lunch. The remaining five subjects showed only a weak rise of myosmine concentrations to a maximum of 0.42 ± 0.06 ng/ml within 1½ and 2½ hours. Fitting the data to the Bateman function, an elimination half-life of about 1.6 hours could be estimated which is roughly equivalent to the plasma half-life of nicotine in humans.

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8931/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8931/1/Sprauer_Stefanie.pdf Sprauer, Stefanie ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8932/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8932/1/Spreyer_Philipp.pdf Spreyer, Philipp ddc

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8942/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8942/1/Lechner_Susanne.pdf Lechner, Susanne ddc:500, ddc:590

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8947/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8947/1/Kotov_Svetla.pdf Kotov, Svetla

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8951/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8951/1/Eichel_Jane-Carolin.pdf Eichel, Jane-Carolin ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

The subject of the study was to investigate the aetiology of SARDS. Following an initial literature review, patient data and clinical findings from 39 Patients were collected and analysed. One specific observation was that one third of all patients comprised Dachshunds and that 51.3 % of affected animals were female neutered. The average age of SARDS patients was found to be 8.8 years (range 3 months to 13 years). The ophthalmoscopic appearance of the fundus of SARDS patients was documented at different stages of the disease during serial examinations with the help of fundus photography. This revealed degenerative retinal changes which were found to progress linear following the onset of SARDS, finally resembling dogs with severe generalised progressive retinal degeneration. In the second part of the study, the hypothesis that SARD is an autoimmune disease, was tested with the help of autoantibody screening. In a first step, serum from 24 SARDS patients and 14 normal controls were assessed for autoantibodies to the purified autoantigens S-Antigen and CRALBP with the help of a western blot. No difference in the incidence of autoantibodies could be found between SARDS patients and healthy controls while testing the well known autoantigens S-antigen and CRALBP. In a second step, an attempt was made to identify new autoantigens by testing the entire retinal proteom as an autoantigenic source, again using Western blot techniques. Following the initial detection of a reaction against a specific protein found almost exclusively in SARDS patients, it was possible to identify this protein with the help of mass spectrometry (MALDI/TOF/TOF) as NSE. These findings were verified by the binding of IgG antibodies to purified NSE in 25% of the SARDS patients and 0% of the normal control dogs. The results of this study suggest that an autoimmune aetiology of SARDS involving autoantibodies against NSE is possible. However, it is unclear whether these play a causative role in SARDS or whether they are the result of retinal destruction by another mechanism. Further investigations into a possible autoimmune aetiology of SARDS are therefore indicated and the role of NSE as an autoantigen must be further assessed.

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8959/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8959/1/Stubhan_Miriam.pdf Stubhan, Miriam ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakul

Trotz verbesserter Therapiemöglichkeiten ist die Prognose beim Fibrosarkom der Katze noch immer ungünstig. In der vorliegenden Arbeit sollte die Verträglichkeit eines neuen Therapieansatzes zur Behandlung des felinen Fibrosarkoms untersucht werden. Verwendet wurde ein nonviraler Gentransfer mittels Magnetofektion, um eine Transfektion mit dem felinen Zytokingen GM-CSF zu erreichen. Ziel der durchgeführten Phase-I-Studie war die Festlegung einer maximalen tolerierten Dosis. In die prospektive Dosis-Eskalations-Studie wurden Katzen, die definierte Einschlusskriterien erfüllten, aufgenommen. Die Steigerung der Dosis des Plasmids, das für feGM-CSF kodiert, erfolgte in vier festgelegten Schritten (50, 250, 750 und 1250 µg Plasmid). Jeweils vier Katzen wurden in eine Dosisgruppe aufgenommen. Die Plasmide wurden in wässriger Lösung in einem 1:1-Verhältnis mit magnetischen Nanopartikeln gemischt, die zur besseren Bindung an die DNA mit Polyethylenimin beschichtet waren. Die Plasmidlösung mit einem Volumen von 500 µl wurde intratumoral injiziert. Danach wurde durch Applikation eines Neodymium-Eisen-Bor-Magneten auf das Tumorgebiet ein Magnetfeld für die Dauer einer Stunde angelegt. Durch diese Magnetofektion wurde die Transfektion auf das Tumorgebiet beschränkt, sowie die Effektivität des Gentransfers verbessert. Das Behandlungsprotokoll umfasste zwei intratumorale Injektionen an den Tagen -14 und -7 sowie die großräumige en-bloc-Resektion des Fibrosarkoms an Tag 1. Eine Kontrollgruppe bestehend aus vier Katzen wurde ohne Zusatztherapie einer Operation unterzogen. Aus ethischen Gründen wurde dabei auf eine Verzögerung der chirurgischen Entfernung durch Placebo-Applikationen im Zeitraum von 14 Tagen verzichtet. Eine Untersuchung auf mögliche auftretende Toxizitäten erfolgte an den Tagen -7, 0, 14, 45, 90 und 180. Zwei weitere Untersuchungen an den Tagen 270 und 360 dienten zur Kontrolle auf Rezidiv- und Metastasenbildung. Aufgetretene klinische oder hämatologische Toxizitäten wurden anhand eines speziellen Nebenwirkungskatalogs (VCOG-CTCAE-Tabelle) erfasst und in Korrelation zur durchgeführten Therapie gestellt, um über eine Zuordnung als Nebenwirkung entscheiden zu können. Ein statistischer Vergleich erfolgte für die Parameter Körpergewicht, Leukozytenzahl und das Differentialblutbild zwischen Kontrollkatzen, behandelten Katzen und den Katzen der verschiedenen Dosisgruppen. Sieben weitere Katzen wurden mit derselben Gentherapie mit humanem GM-CSF behandelt, bei denen der Expressionsachweis von huGM-CSF mittels ELISA in den Zellkulturüberständen der angezüchteten Tumore gelang. In den ersten drei Dosisgruppen traten keine schwerwiegenden Nebenwirkungen auf. Da bei drei der vier Katzen der höchsten Dosis leichte Nebenwirkungen beobachtet wurden, wurden zwei weitere Katzen mit der höchsten Dosis behandelt. Dabei traten jedoch keine Toxizitäten auf, so dass die Dosis von 1250 µg für feGM-CSF kodierendes Plasmid als sichere, gut verträgliche Dosis für nachfolgende Phase-II-Studien festgelegt werden konnte. Auch die beobachteten Ergebnisse bezüglich Rezidivrate sind als sehr viel versprechend einzustufen.

The objective of the present study was to examine if heart murmurs in adult cattle can be objectively diagnosed using phonocardiography. The examinations were conducted using phonocardiograms (PCG) and required a scheme for evaluation. Twenty cattle older than two years of age that were hospitalised at the Clinic for Ruminants, Oberschleissheim, were used for the study. In all of them, heart murmurs were detected during auscultation. The Meditron Analyzer 4.0 (Welch Allyn GmbH & Co KG, Jungingen) allowed the simultaneous recording of electrocardiogram (ECG) and PCG. The ECG using a thoracic lead served as a timeline for the PCG. In a pre-test (n = 20) so called threshold values were established which marked the division between the “background noise” (amplitudes between the heart sounds) and murmurs. These threshold values (for positive and negative range) were established for four different locations per side of the body (in the third and fourth intercostals spaces (ICS), dorsally and ventrally, re-spectively), as well as for the presentation of the PCG with use of a 50, 100 Hz filter, respectively. In the subsequent main study twenty animals were examined clinically and according to the results of auscultation assigned to the heart murmur grades (HM) 0-6 and categorised into groups: HM “faint” (HM grade 0-2), HM “moderately loud” (HM grade 3-4) and HM “loud” (HM grade 5-6). PCG were recorded on all eight locations mentioned above. The quality and number of acceptable PCGs of the right body side was very low, thus these recordings were not used in the analysis. For the PCG evaluation certain selected heart actions were presented in a larger scale and printed on graph paper. Systole and diastole were marked using the ECG and the threshold values were drawn in manually. In addition, systole and diastole were divided into 10 and 20 equal intervals for the 50 Hz and 100 Hz presentations, respectively. At these determined points the amplitudes were measured and recorded if they were above/below the threshold values or if no values could be measured at these points. For amplitudes that were outside the threshold values relative frequency at each point of measurement for each location and for 50 and 100 Hz presentations was calculated. Comparing the sum of the amplitudes outside the threshold values between the groups “faint” and “loud” significant differences were found for the location 1 (third ICS, dorsally, left side) in the systole at 50 Hz and for the loca-tion 2 (third ICS, ventrally, left side) in the systole at 100 Hz (p = 0.041 and p = 0.034). A significant difference between the groups “faint” and “loud” was found for the loca-tion 1 in the systole at 50 Hz (p = 0.042) concerning the area under the curve using the amplitudes measured at these 10 and 20 points of measurement, respectively. In addition, the mean values of the amplitudes that were outside the threshold values were calculated. Comparing the groups “faint” and “loud” a significant difference was also found for the location 1 in the systole at 50 Hz in the positive range (p = 0.034) as well as for location 2 in the systole at 50 Hz in the negative range (p = 0.045). Further investigations could confirm the tendencies found in the present study. Additional investigations with a larger number of animals could help to classify heart murmurs. Besides, they might help to increase the chances of obtaining usable measurements from the right side. Also, an algorithm for automatic evaluation of PCGs based on the data of the present study would be very helpful.

Anhand der vorliegenden Arbeit kann der aktuelle Kenntnisstand über die Morphologie des equinen Iliosakralgelenks (ISG) und die klinische Diagnostik der ISG-Erkrankung beim Pferd nachvollzogen werden. Mittels einer morphologischen Studie werden die normalen und die pathologischen Veränderungen von klinisch gesunden Iliosakralgelenken von Pferden (n = 25) im Alter von 1,5 Monaten bis 25 Jahren beschrieben. Im klinischen Teil wurden anhand von 20 Fallbeispielen aus dem eigenen Patientengut die klinischen Symptome und die sonographischen und szintigraphischen Befunde einer ISG-Erkrankung dargestellt. Mit Hilfe dieser Untersuchungen soll ein Untersuchungsprotokoll für Pferde mit Verdacht auf ISG-Erkrankung erstellt und dem Verlangen der Tierärzte nach einem Leitfaden für das Vorgehen bei ISG-Erkrankungen genüge getan werden. Auf Basis der Ergebnisse dieser Arbeit wird den Pferdetierärzten im deutschsprachigen Raum die Möglichkeit gegeben, die Veränderungen im ISG und die Schwierigkeiten der Diagnostik der ISG-Läsionen besser zu verstehen.

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8993/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8993/1/Marschall_Julia.pdf Marschall, Julia

Fri, 18 Jul 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8997/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8997/1/Barocke_Verena.pdf Barocke, Verena ddc:500, ddc:590, Ti

In der vorliegenden Arbeit wurden Futter- und Kotproben aus einem Aufzuchtversuch mit insgesamt 30 Beagles und 44 Foxhound-Boxer-Labrador(FBI)-Kreuzungen von der 6. bis zur 28. Lebenswoche auf ihren Bruttoenergie- und Nährstoffgehalt (Bombenkalorimetrie, Weender Analyse) analysiert und ausgewertet. Das Wachstum der Welpen war in dem Fütterungsversuch durch Anpassung der Futtermenge so gesteuert worden, dass alle Welpen nahezu entsprechend der Empfehlungen (MEYER und ZENTEK 1998, 2001) für die jeweiligen Rassen an Gewicht zunahmen, wobei die Futteraufnahme registriert wurde. Das Futter bestand zu 60% aus Pansen, 39% aus Reis und 1% aus Cellulose, wobei jede Charge auf ihren Nährstoffgehalt analysiert wurde. Die Welpen erhielten Calcium (Ca) entweder entsprechend der Empfehlungen (MEYER und ZENTEK 1998, 2001) oder aber das Dreifache des empfohlenen Bedarfs pro kg Körpermasse (KM). Alle anderen Nährstoffe wurden bedarfsdeckend zugeführt. Die Kotproben entstammten Verdauungsversuchen (5-7 Tage vollständige Kotsammlung) in den Wochen 12, 18 und 24. Berechnet wurde die scheinbare Verdaulichkeit der Energie und der Rohnährstoffe, der Gehalt an Umsetzbarer Energie (ME) im Futter (Stickstoff-korrigierte Verdauliche Energie) und die ME-Aufnahme der Welpen. Die scheinbare Verdaulichkeit der Energie und der Rohnährstoffe Protein, Fett sowie N-Freie Extraktstoffe zeigte keinen Alterseffekt. Hohe Calciumaufnahmen reduzierten dagegen die Verdaulichkeiten. Dieser Effekt war bei den FBIs besonders ausgeprägt. Die Energieaufnahme lag bei den Beagles während der gesamten Versuchsdauer zwischen 0,77 ± 0,14 MJ ME/kg KM^0,75 (Ca-Überversorgung, 6.-8. Woche; n = 20) und 0,93 ± 0,11 MJ ME/kg KM^0,75 (bedarfsdeckende Ca-Versorgung, 12.-14. Woche, n = 10). Von der 6. bis zur 16. Lebenswoche war ein leichter Anstieg zu verzeichnen, danach zeigte sich ein geringfügiger Abfall. Die Energieaufnahme bei den FBIs war signifikant höher als bei den Beagles. Sie betrug zwischen 0,84 ± 0,05 MJ ME/kg KM^0,75 (Ca-Überversorgung, 12.-14. Woche, n = 23) und 1,02 ± 0,16 MJ ME/kg KM^0,75 (bedarfsdeckende Ca-Versorgung, 6.-8. Woche, n = 15). Ein Effekt des Lebensalters war während dieses Zeitraumes nicht feststellbar. Ausgedrückt als Vielfaches des Erhaltungsbedarfs von 0,55 MJ ME/kg KM^0,75 benötigten die Beagles im Mittel etwa das 1,5-fache und die FBIs das 1,7fache des Erhaltungsbedarfs. Dies steht im Widerspruch zu den Bedarfsberechnungen des NRC (2006) wonach der Energiebedarf wachsender Welpen ausgedrückt als Vielfaches des Erhaltungsbedarfs von etwa dem Doppelten in einer nicht-linearen Funktion bis zum Ende des Wachstums allmählich auf den einfachen Erhaltungsbedarf absinkt. Die Empfehlungen zur Energieversorgung müssen daher vor allem zu Beginn des Wachstums nach unten korrigiert werden. Bei Zuteilung des Ca pro kg KM entsprechend der Vorgaben von MEYER und ZENTEK (2001) (NC-Gruppen) und einer Steuerung des Wachstums durch angepasste Energiezuteilung bewegte sich die Ca/ME-Relation bei den Beagles zwischen 0,51 ± 0,15 g/MJ ME (22.-24. Woche, n = 10) und 0,71 ± 0,29 g/MJ ME (12.-14. Woche), bei den FBIs zwischen 0,57 ± 0,07 g/MJ ME (20.-22. Woche, n = 15) und 0,80 ± 0,17 g/MJ ME (10.-12. Woche).

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8063/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8063/1/Effenberger_Tanja.pdf Effenberger, Tanja ddc:500, ddc:590, Tierärz

Effect of B-cell activating factor of the tumor necrosis factor family (BAFF) on the expression of pro- and anti-apoptotic bcl-2 family members in chicken B cells The recently discovered chicken cytokine BAFF (B-cell activating factor of the tumor necrosis factor family) was characterised as an important regulator of chicken B-cell homeostasis. Besides regulating B-cells in secondary lymphatic organs BAFF seems to have a significant impact on chicken B-cell development in the Bursa of Fabricius, too. Past studies already showed that chicken BAFF plays a vital role in the survival of B-cells both in vitro and in vivo. Yet molecular correlation for this effect has still to be established in the chicken. In mouse and man, the antiapoptotic effect of BAFF was linked to a regulation of certain bcl-2 family members. Thus this study focused on the identification of bcl-2 family members in the chicken and their regulation by BAFF at transcriptional level. By means of RT-PCR the expression of both anti-apoptotic (e.g. bcl-2, bcl-xL and Nr13) as well as pro-apoptotic (e.g. bak, bid, bim and bok) transcripts was shown in bursa, spleen and heart muscle at various developmental stages. To enable further studies quantitative RT-PCR assays were established for both anti-apoptotic (e.g. bcl-2, bcl-xL and Nr13) and pro-apoptotic (e.g. bak, bid, bim and bok) bcl-2 family members as well as for the B-cell specific marker chB6 and chBAFF. During bursal development, transcripts for pro-apoptotic bok and anti-apoptotic bcl-xL are increased while the level of bcl-2 mRNA is decreased. Considering the vast raise in B-cell number within the developing bursa, a means of correlating this with characterised changes in transcription levels had to be established. This was done based on expression levels of the B-cell marker chB6. Thus it could be shown that transcription of both anti-apoptotic genes like bcl-2 and Nr13 and pro-apoptotic genes such as bak and bim were decreased based on the amount of B-cell. In contrast, levels of bok transcript remained unchanged in B-cells during bursal development. Isolated lymphocytes taken from the spleen were used for inital studies on the impact of BAFF in vitro. In agreement with published data, the anti-apoptotic effect of BAFF could be demonstrated in this study, too. At transcriptional level, this was linked to a decrease in the transcription of pro-apoptotic bim. In contrast, incubation of spleen cells with chicken CD40-ligand resulted in the vast proliferation of B-cells from both juvenile and mature birds. However, age-related differences in the survival of lymphocytes were observed in this study, which correlated with a lower increase of anti-apoptotic bcl-xL in mature cells than in juvenile in response to CD40-ligand stimulation. To further analyse the effect of BAFF on bursal B-cell development in vivo a previously published retroviral vector system (RCAS) was utilized. Both the effect of overexpression of BAFF as well as its neutralization using a soluble decoy receptor (BCMA) were characterised at transcriptional level. Overexpressing BAFF led to insignificant changes during the development of the bursa. Since BAFF is expressed at high levels during all stages of bursal development, gene overexpression may not exert additional effects. Neutralization of BAFF on the other hand caused distinct changes among bcl-2 family members at the transcriptional level. It again proofed necessary to correlate these changes with B-cell numbers represented by the level of chB6 transcription. By this method genes highly expressed within the remaining B-cell population were characterised. Anti-apoptotic bcl-2 along with Nr13 was shown to be significantly increased in comparison to control cells.

Ziel dieser Studie war es, die sonographische Darstellbarkeit der Bauchhöhlenorgane des Meer¬schweinchens zu erforschen und in systematischer Weise zu beschreiben sowie ge¬eignete Untersuchungstechniken und sonographische Normalbefunde zu dokumentieren. Hierzu wurden 28 klinisch gesunde Meerschweinchen verschiedener Altersstufen, Rassen und unterschiedli¬chen Geschlechts mit einer 6-13 MHz-Linearsonde in Rückenlage sonographisch untersucht und die Ergebnisse aufgezeichnet. Je ein weiteres Meerschweinchen wurde zur Abklärung einer vermuteten Urolithiasis bzw. zur Bestätigung einer Träch¬tigkeit vorgestellt. Alle Tiere verhielten sich trotz der ungewohnten Lagerung sehr kooperativ, was eine Sedation überflüssig machte. Einschränkungen bei der Untersuchung ergaben sich lediglich durch den stets futtergefüllten Magen und die großen Gärkammern Caecum und Colon im ventralen Abdomen, die mit ihrem Schallschatten dorsal gelegene Strukturen überlagerten. Besonders betroffen waren davon die linke Nebenniere, die größtenteils im rechten dorsalen Quadranten gelegenen Dünndarmanteile und die Ovarien bei weiblichen Tieren. Insgesamt konnten jedoch alle Organe der Bauch¬höhle außer dem Pankreas und dem unveränderten rechten Ovar reproduzierbar ab¬gebildet und beurteilt werden. Neben dem physiologischen Erscheinungsbild der Abdominalorgane konnten auch einige pathologische Befunde erhoben werden. Auffällig war vor allem das häufige Auftreten unterschiedlicher Mengen an Kristallen in der Harnblase, die sich als sedi¬mentierende, reflexreiche Echos darstellten. In dieser Studie ließen sich diese bei 22 von 28 Tieren nachweisen, klinische Symptome traten jedoch nicht auf. Bei dem Meerschweinchen, das wegen des Verdachts auf Urolithiasis vorgestellt wurde, zeigten sich ebenfalls große Mengen an Harngrieß, sowie zwei Konkremente im Harnblasenhals. Als weitere pathologische Veränderung konnten bei 7 von 17 weibli¬chen Meerschweinchen ein- oder beidseitig Ovarialzysten diagnostiziert werden, die allerdings keinerlei klinische Symptome verursachten. Schließlich wurde ein Meerschweinchen zur Bestätigung einer vermuteten Trächtig¬keit untersucht. Im Ultraschallbild konnten mehrere Fruchtanlagen dargestellt und Skelettanteile wie Schädel und Rippen, sowie Anteile der Leber identifiziert werden. Eine genaue Bestimmung der Anzahl der Feten war in diesem fortgeschrittenen Trächtigkeitsstadium nicht mit Sicherheit möglich. Insgesamt erwies sich die Sonographie mit wenigen Einschränkungen als sehr gut geeignet, die Organe der Abdominalhöhle beim Meerschweinchen abzubilden und zu beurteilen. Sie stellt somit neben der Röntgenuntersuchung ein wertvolles diagnosti¬sches Verfahren dar und sollte auch bei dieser Tierart routinemäßig zum Einsatz kommen.

Die Eignung des neuartigen intravaskulären Kontrastmittels MS-325 (Vasovist) zur Darstellung kurzzeitig ischämisch geschädigten Myokards mit der Magnetresonanztomographie (MRT) werden experimentell an der Ratte untersucht. Es sollte geprüft werden, ob bzw. inwieweit bei Verwendung von MS-325 kurze Ischämiezeiten im Bereich von 12 bis 30 Minuten (12, 18, 30 min) im Vergleich zum bisher in der klinischen Kardiologie genutzten extrazellulären gadoliniumhaltigen Kontrastmittel Magnevist(r) detektierbar sind, ab welcher Okklusionszeit ein Myokardinfarkt mit einem Kontrastmittel darstellbar ist und ob ein intravaskuläres Kontrastmittel wie MS-325 ischämisch geschädigtes jedoch nicht infarziertes Gewebe detektieren kann. Die Untersuchungen wurden an 40 weiblichen Ratten durchgeführt. Je drei Gruppen für MS 325 bzw. Gadolinium zu drei Ischämiezeiten: 12, 18 und 30 min. Es wurden T2- und T1-gewichtete Sequenzen innerhalb eines 120-Minuten Monitorings (nativ bzw. T2, 3, 15, 30, 45, 60, 90 und 120 min) erfasst und die MRT-Messungen histomorphometrisch (TTC-Gewebefärbung) überprüft. Dabei konnte bei insgesamt 16 Tieren ein Infarkt nachgewiesen werden. Dies betraf von den mit MS 325 behandelten Tieren 2 nach 18 min und 7 nach 30 min Ischämiedauer (n = 7 pro Versuchsgruppe). Von den Tieren, denen Magnevist(r) appliziert wurde, war nur die 30 min-Gruppe TTC-positiv. Die Untersuchungen ergaben, dass MS-325-Anreicherungen nach allen drei Okklusionszeiträumen zu erkennen waren. Es wurde sowohl infarziertes als auch nicht infarziertes, nur ischämisch geschädigtes Myokard dargestellt. Bei der 12-Minuten-Gruppe zeigten 3 Tiere eine erhöhte Signalintensität. In der Testgruppe MS 325; 30 min Okklusionszeit waren nur teilweise MRT-detektierbare Kontrastmittelanreicherungen nachweisbar. Nach 120 min des Monitorings konnten innerhalb dieser Gruppe bei 5 Tieren keine erhöhten T2-Signale im Ischämiegebiet erfasst werden. Hinsichtlich der Einschätzung der Infarktgröße (MRT versus TTC) zeigte sich bei der Bland-Altman-Analyse nach Kontrastmittelgabe für beide Kontrastmitteln zuerst eine Überschätzung der Infarktgröße. 60 bis 120 min nach Kontrastmittelgabe ist für MS 325 bereits eine leichte Unterschätzung der Infarktgröße festzustellen, für Gadolinium erst 120 min nach Kontrastmittelgabe. Die statistischen Auswertungen (4-Way-ANOVA, t-Tests) der Kontrastmittel-Spätan-reicherung (Kontrast Blut/Myokard, ischämisch geschädigtes Areal/Myokard, ischä-misch geschädigtes Areal/Blut) ergaben einen signifikanten Unterschied im Vergleich der beiden Kontrastmittel für den Kontrast Blut/Myokard. Die T1-gewichteten Sequenzen (4-Way-ANOVA, 3-Way-ANOVA, t-Tests) zeigten, dass Gewebekontraste auch bei kurzen Ischämiezeiten (12 bis 30 min) durch MS 325 im Vergleich zu Magnevist teilweise besser darstellbar waren. Dabei nahm die Kontrastdarstellung mit zunehmender Ischämiedauer zu.

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8161/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8161/1/Schultze_Corinna.pdf Schultze, Corinna ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8162/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8162/1/Schuemann_Alexandra.pdf Schümann, Alexandra

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8167/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8167/1/Murf_Andreas.pdf Murf, Andreas ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8168/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8168/1/Wacheck_Silke.pdf Wacheck, Silke

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8169/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8169/1/Alzen_Adib.pdf Alzen, Adib ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8210/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8210/1/Basler_Amelie.pdf.pdf Basler, Amelie ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8245/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8245/1/Kressel_Ulrike.pdf Kreßel, Ulrike

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8253/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8253/1/Plack_Alexandra_Piroschka.pdf Plack, Alexandra Piroschka

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8258/ https://edoc.ub.uni-muenchen.d

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8260/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8260/2/Heim_Alexandra.pdf Heim, Alexandra ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8265/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8265/1/Meinel_Katja.pdf Meinel, Katja

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8268/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8268/1/Schweikl_Monika.pdf Schweikl, Monika ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Unmethylierte bakterielle DNA, die reich an CG Sequenzen ist stimuliert das angeborene Immunsystem. Die Vermittlung dieser Wirkung erfolgt über den Toll-like Rezeptor 9. Reine CG Sequenzen sind im Organismus nicht stabil, da sie sehr rasch von den körpereigenen Nukleasen abgebaut werden. Mit synthetisch hergestellten Oligodeoxyribonukleotiden, sogenannten CpG-ODNs, kann eine Nukleaseresistenz erzielt werden und der immunstimulatorische Effekt nachgeahmt werden. Weiterhin wirken sich CpG-ODNs positiv auf den Verlauf von bakteriellen Infektionen, Tumoren und Prioninfektionen aus. Man weiß, dass eine Aktivierung des Immunsystems durch einmalige Gabe von CpG-ODNs nur über einen kurzen Zeitraum stattfindet. Die CpG-ODNs führen im Organismus innerhalb von Minuten zu einem mRNA Anstieg und innerhalb von Stunden zu einer kurzfristigen Zytokinsekretion und IgM Produktion, werden dann aber rasch abgebaut, so dass der immunstimulatorische Effekt in der Regel nur kurz anhält. Um CpG-ODN als Therapeutikum besser nutzen zu können liegt der Wunsch nahe, die Wirkung von CpG-ODN zu verlängern. Eine mögliche Strategie ist hierbei eine repetitive Applikation. Ziel dieser Arbeit war, den immunstimulatorischen Effekt von repetitiver CpG-ODN-Gabe besser zu verstehen und mit der Repetition die Wirkung zu verlängern. Damit könnte CpG-ODN als Therapeutikum bei bakteriellen Infektionen, Tumoren und bei Prionerkrankungen wirkungsvoll eingesetzt werden. In dieser Arbeit wurden jeweils 12 Gruppen zu je 5 Mäusen gebildet, wobei die jeweiligen Gruppen an 5, 7 oder 21 aufeinanderfolgenden Tagen jeweils eine CpG-ODN, NaCl oder Neg-ODN Applikation i.p. erhielten. Die Mäuse wurden anschließend an Tag 7 oder 28 während bzw. nach der Behandlung getötet. So erhielt man folgende Gruppen: 5x-CpG-ODN, NaCl oder Neg-ODN behandelte, an Tag 7 getötete Mäuse 5x-CpG-ODN, NaCl oder Neg-ODN behandelte, an Tag 28 getötete Mäuse 7x-CpG-ODN, NaCl oder Neg-ODN behandelte, an Tag 7 getötete Mäuse 21x-CpG-ODN, NaCl oder Neg-ODN behandelte, an Tag 28 getötete Mäuse Im Verlauf der Arbeit, die die immunmodulatorische Wirkung auf das Gehirn und die Leber der Maus untersucht, konnten zusammenfassend folgende Ergebnisse herausgearbeitet werden, die mittels Real time PCR und Immunhistologie gewonnen wurden. Im Gehirn führt CpG-ODN zu einer mindestens einwöchigen Hochregulierung der mRNA von TNFα. Des Weiteren kommt es zu einer mindestens zweitägigen C1q und IFNg Hochregulierung. Eine IL-12p40 Hochregulierung findet nur ca. 18 Stunden statt, während eine STAT3 Hochregulierung nicht nachweisbar ist. In der histologischen Betrachtung finden sich in der HE Färbung keine pathologischen Veränderungen der Hirnarchitektur und in einer immunhistologischen Färbung mit CD 11b und GFAP bindenden Antikörpern keine Unterschiede zwischen den CpG-ODN, NaCl oder Neg-ODN behandelten Tieren. In der Leber findet sich eine signifikante Hochregulierung von IL-12p40 über mindestens drei Wochen und eine C1q, TNFα und IFNg Hochregulierung von mindestens einer Woche. Histologisch finden sich in der HE Färbung massive Leukozyteninfiltrate über mindestens zwei Tage. In der Immunhistologie sieht man an den Infiltraten beteiligte aktivierte Makrophagen, T und B-Lymphozyten, jeweils dargestellt mit CD 11b, CD 8 und B220 bindenden Antikörpern. Es zeigte sich, dass eine repetitive CpG-ODN-Gabe eine verlängerte stimulatorische Wirkung auf das Immunsystem ausübt, was Voraussetzung für den Einsatz als Therapeutikum ist. Besonders bemerkenswert ist die Tatsache, dass man durch periphere Gabe von CpG-ODN im Gehirn eine Immunstimulierung erreichen kann. Diese könnte im Rahmen einer Therapie von Prionerkrankungen, anderen Gehirninfektionen, Morbus Alzheimer oder Gehirntumoren Anwendung finden. Allerdings sind noch weitere Studien nötig, um Risiken wie Hepatotoxizität oder Autoimmunität besser abschätzen zu können und den Mechanismus zu erforschen, wie durch periphere Gabe von CpG-ODN eine immunologische Gehirnaktivierung erreichen wird. Eine wichtige Frage für die Zukunft ist hierbei, ob die Wirkung von CpG-ODN direkt auf die Gehirnzellen wirkt oder ob es einen second messenger gibt, der die Blut-Hirn-Schranke überwindet.

Investigation about the use of analgesics for the reduction of castration-induced pain in suckling piglets. This study is intended to investigate the implementation of analgesics in order to reduce pain induced by the castration of suckling piglets. Serum Cortisol and postoperative behaviour are used as parameters. Additionally, the influence on the healing process of the castration wounds is evaluated. 320 four to six day old male piglets with a good general condition and a birth weight over 1000g, are randomly allocated to group 1 to 15. The injections for the animals of group 12 to 15 are blinded. group number of animals application of the agent castration Cortisol 1 Handling NaCl 35 0,3 ml Saline Solution (0,9%) i.m. no 2 Handling Meloxicam 25 0,4 mg Meloxicam/kg wt i.m. no 3 Handling Flunixin 26 2,2 mg Flunixin-Meglumin/kg wt i.m. no 4 Handling Detomidin 25 40 μg Detomidinhydrochlorid/kg wt i.m. no 5 Castration NaCl 28 0,3 ml Saline Solution (0,9%) i.m. yes 6 Castration Meloxicam 25 0,4 mg Meloxicam/kg wt i.m. yes 7 Castration Flunixin 26 2,2 mg Flunixin-Meglumin/kg wt i.m. yes 8 Castration Metamizol + Skopolamin 25 50 mg Metamizol and 0,4 mg N-Butylscopolaminiumbromid/kg wt i.m. yes 9 Castration Metamizol 25 50 mg Metamizol/kg wt i.m. yes 10 Castration Carprofen 15 1,4 mg Carprofen/kg wt s.c. yes 11 Castration Detomidin 25 40 μg Detomidinhydrochlorid/kg wt i.m. yes Behaviour 12 Handling NaCl 10 0,3 ml Saline Solution (0,9%) i.m. no 13 Castration NaCl 10 0,3 ml Saline Solution (0,9%) i.m. yes 14 Castration Meloxicam 10 0,4 mg Meloxicam/kg wt i.m. yes 15 Castration Flunixin 10 2,2 mg Flunixin-Meglumin/kg wt i.m. yes 15 to 30 minutes after administering the substances, piglets are either castrated (groups 5-11 and 13-15) or only restrained for about 30 seconds (groups 1-4 and 12). They are returned to their box immediately afterwards. 2-3 ml blood is taken from all animals of the cortisol-groups before the application of the agents including 30 minutes, one hour, four and 24 hours after castration/fixation, and the concentration of cortisol in the serum is measured. The behaviour of all animals in groups 12 to 15 is observed individually for 20 minutes in the first and third hour after castration. Additionally, all piglets are scanned every 60 seconds for certain behaviours. On the first, fourth, seventh and 14th day after castration, wound healing and general condition are assessed and a “clinical score” is determined. The results of the cortisol measurement show that handling the animals has little influence on the cortisol level, while castration leads to a significant rise of the cortisol concentration that is still present four hours later. All of the tested non-opioid analgesics reduce the rise of the cortisol concentration after castration and a considerable reduction is especially noticeable after one hour. Group 6 “Castration Meloxicam” and group 7 “Castration Flunixin” show the lowest cortisol response to castration. The concentrations of cortisol in those two groups are significantly lower 30 minutes, one and four hours after castration than the concentration of group 5 “Castration NaCl”, and already after one hour they do not differ significantly from the corresponding handling groups. Irregardless if animals are castrated or only restrained, the use of Detomidin (group 4 and 11) leads to higher values of cortisol after castration/fixation compared to the values after the application of NaCl (group 1 and 5). A conspicuous impact on the postoperative behaviour is obvious when non-opioid analgesics are used. The frequency of occurrence of castration-induced signs of pain, drooping the tail and changing the position is explicitly reduced when Meloxicam and Flunixin are injected before castration. The effect of Flunixin is most clear. In this group, the incidence of castration-induced signs is only higher for five minutes after castration when compared to the Handling-group. Animals without preoperative medication show an overall reduced activity at the mammary glands and playing. Results indicate that non-opioid analgesics, especially efficient anti-inflammatory drugs like Meloxicam and Flunixin, are capable of reducing castration-induced pain in piglets. The castration wounds of 76,5% of the piglets are healed completely after 14 days. NSAIDs are incapable of improving the healing process.

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8305/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8305/1/Kutscha_Janina.pdf Kutscha, Janina

Investigation of the distribution of Mycoplasma suis and comparing investigations of real-time PCR and acridine orange-stained blood smears concerning sensitivity and specificity As the porcine Eperythrozoonosis is most commonly a latent chronic infection, a high sensitive assay is required to evaluate the distribution of Mycoplasma suis in Germany. Due to its high sensitivity and specificity the real-time PCR was chosen for this study. In comparison to conventional PCR assays the real-time PCR is a rapid, easy-doing, more accurate and more sensitive system. In the present study the prevalence of M. suis in Germany was measured by using the LightCycler® System and a constant real-time PCR-protocol. Additionally a new method of DNA-Extraction, the Gen Elute Bacterial Genomic DNA Kit, was evaluated during this study. The Gen Elute Bacterial Genomic DNA Kit showed the same results concerning sensitivity and efficiency of DNA extraction as the automatical extraction with the MagNA Pure LCTM System. 1176 blood samples of slaughtered post-weaning pigs from 196 different pig herds were collected. In addition to PCR analysis a haemogram was made from any sample and clinicochemical parameter were determined. Moreover an acridine orange-stained blood smear was analysed from each sample. Real-time PCR showed a positive result for 164 out of 1176 samples (13,9%). With the acridine stain only 35 pigs were identified as infected with M. suis. 31 of these samples were also positive in the real-time PCR. In the present study microscopic examination on stained blood smears only detected M. suis infections with a bacterial load of at least 105 per ml blood. 80 (40,8%) out of 196 pig herds were detected positive for M .suis by real-time PCR. The number of M. suis infected herds in the different districts of Germany varied from 33,3% to 48%. The prevalence within one herd varried from 25% to 46,2% and showed an average value of 34,2%. A significant correlation between the bacterial load per ml blood and the degree of severity of anemia was shown. A decrease of the number of erythrocytes, hemoglobin concentration and hematocrit was observed when the bacterial load increased. By comparing real-time PCR and microscopic examination of acridine orange-stained blood smears it was shown that the real-time PCR system is able to detect even latent M. suis infections that are missed out in the microscopic examination. Furthermore immature erythrocytes and Howell-Jolly-bodies may lead to false positive results. With the use of the M. suis specific hybridisation probe system in the real-time PCR false positive results can be avoided. The LightCycler® MSG1 protocol has proven to be a high sensitive and easy-doing system that allows the integration in routine laboratories.

Investigations about the isoflurane anaesthesia in swine Compared to other animal species, swine show typical defensive behaviour towards any kind of physical manipulation. Anaesthesia is thus not only indicated for surgical interventions but for diagnostic and therapeutic measures as well. This study evaluates whether inhalational anaesthesia with isoflurane via facemask can serve as a potential alternative to regular intramuscular or intravenous anaesthesia. Two different apparati are compared: the first one disperses medical oxygen (O2), the second filtered compartment air (CA), both in conjunction with isoflurane. Animals with a body weight (BW) up to 20 kg receive simply an inhalational anaesthesia, patients weighing more than 20 kg in addition to that an intramuscular pre-medication 10 minutes earlier with ketamine (10 mg/kg BW) and azaperone (2 mg/kg BW). The survey examines 156 normal pigs and 19 statistically non-evaluated miniature pigs. Animals with more than 10 kg BW in particular show vehement physical reactions to the basal anaesthesia. Pre-medicated test animals are immobilized after ten minutes and the anaesthesia can be deepened with isoflurane. Animals receiving pure inhalational anaesthesia show ataxia after 29 to 34 seconds. After 48 to 60 seconds the probands are in prone position and after 65 to 89 seconds in lateral position. The pre-medicated animals on the other hand are significantly slower to show ataxia (after 1,4 minutes), prone position (after 1,8 to 1,9 minutes) and lateral position (4,3 to 4,4 minutes). The hypnosis and surgical tolerance stage of anaesthesia are reached significantly faster with isoflurane in CA than with isoflurane in O2. Test animals with isoflurane/O2 require an isoflurane-vaporiser position of 2,24 to 3,38 Vol% during the whole intervention, those with isoflurane/CA 2,17 to 2,88 Vol%. Compared to that, the premedicated animals need significantly less isoflurane with 1,5 to 2,38 Vol% (O2) and 1,52 to 2,08 Vol% (CA). Probands with O2 as carrier gas show a significantly better oxygen saturation (94-95%) than test subjects with CA (78%). The measured arterial pH value of 7,27 to 7,34 indicates a low acidosis; a partial pressure of carbon dioxide of 49,7 to 65,7 mmHg exceeds the reference values. The partial oxygen pressure is significantly better with O2 (190,0 to 266,2 mmHg) than with CA (57,4 to 65,7 mmHg). During the recovery phase, all animals exhibit the reappearance of the claw reflex, the dewclaw reflex, the muscle tension and positive skin sensibility in consecutive order. Somewhat later they raise their heads, get into the prone position and try to rise. Given several more minutes, they manage to stand. Probands receiving pure inhalation anaesthesia are significantly faster (1,3 to 9,8 minutes) to reach the waking stage than animals with a combination of ketamine, azaperone and isoflurane (2,1 to 24,4 minutes). The average blood pressure during the basal narcosis is 128/71 mmHg (systole/diastole) and 130/72 mmHg during the maintenance stage. Body weight and premedication apparently play no significant role. Miniature pigs deliver similar results as the premedicated pigs, but need remarkably less isoflurane (1,10 to 1,58 Vol%). Conclusion: a pure inhalation anaesthesia with isoflurane in swine can only be recommended for animals with a body weight up to 10 kg (O2-apparatus: 2,24 to 3,38 Vol% for surgical tolerance, CA-apparatus: 2,17 to 2,88 Vol% for surgical tolerance); rapid drifting off and rapid waking are the obvious advantages. A premedication with ketamine (10 mg/kg BW) and azaperone (2mg/kg BW) reduces the dose of isoflurane significantly (O2-apparatus: 1,5 to 2,38 Vol%, CA-apparatus: 1,52 to 2,08 Vol%). The use of O2 as carrier gas allows an optimal anaesthesia with optimal O2 - saturation for every animal weight and size (94 to 95%). CA as carrier gas can cause hypoxia and acidosis (O2-saturation: 78%, pH: 7,31 to 7,33, pCO2: 53,0 to 60,4 mmHg, pO2: 57,4 to 65,7 mmHg) during longer interventions. Miniature pigs need considerably less isoflurane, though this cannot result solely from the pre-medication and needs to be examined further.

Investigations into the diagnosis of the polyserositis complex in swine The aim of this study was to evaluate the PCR test results from collective swab samples of serous membranes for genomic fragments of H. parasuis and M. hyorhinis regarding their associations and correlations with the pretreatment, clinical and pathological findings as well as the detection of PRRSV EU strain and PCV-2. For the classification of the method in reference to H. parasuis the PCR results were compared with the results of the bacteriological examination of the BALF. Furthermore the association between PRRSV and PCV-2 as well as the correlations between the weight of the animals and the detection of the agents, the clinical score and the detection of the agents and between PCV-2 and H. parasuis, M. hyorhinis as well as PRRSV EU strain were determined. After the admission of the preliminary report, in which particularly the state of treatment and vaccination regarding H. parasuis was inquired, 143 pigs were clinically examined. The results were evaluated on the basis of a score system. From 117 pigs under neuroleptanalgesia bronchoalveolar lavage fluid was taken and examined bacteriologically for H. parasuis. The animals were euthanized afterwards and subjected to a gross pathological and histopathological examination. In the course of the necropsy collective swabs of the serous membranes were taken from the surfaces of pleura, pericard and peritoneum and analysed via PCR for genomic fragments of H. parasuis and M. hyorhinis. Additionally lung tissue samples were taken from 102 animals for the molecular biological proof of genomic fragments and tissue samples from lungs and lymph nodes were taken from 105 animals for in-situ hybridisation. The results show that the detection of the H. parasuis and M. hyorhinis in the PCR was not associated significantly with a previous treatment. No significant relation was found between the analysing methods, PCR from the collective serosal swab and bacteriological examination of the BALF. The detection of genomic fragments of H. parasuis showed a significant association with the findings of the auscultation. Furthermore the evidence of the agent in the PCR significantly correlated with the presence of CNS symptoms. The evaluation of the state of nutrition and the filling degree of the tarsal joints did not correlate significantly with the PCR proof of H. parasuis. In contrast significant relations were shown between the proof of genomic fragments of M. hyorhinis and the occurence of kyphosis, the findings of the auscultation and the evaluation of the state of nutrition, but the proof of genomic fragments of M. hyorhinis did not significantly correlate with the filling degree of the tarsal joints as well as the presence of CNS symptoms. The results of the pathological investigation showed a significant association of M. hyorhinis with the diagnosis of a catarrhal-suppurative bronchopneumonia as well as a significant association of both agents with the diagnosis of a serositis without differenciation of the site and for the singular diagnosis of a pleuritis and pericarditis. The proof of M. hyorhinis and H. parasuis in the PCR was not significantly associated with peritonitis and additionally that of H. parasuis was not significantly associated with the diagnosis of a catarrhal-suppurative bronchopneumonia. Significant associations were calculated between the detection of the following agents: H. parasuis and M. hyorhinis, H. parasuis and PRRSV EU strain as well as M. hyorhinis and PRRSV EU strain. In contrast the association between the detection of H. parasuis and PCV-2, M. hyorhinis and PCV-2 as well as PRRSV EU strain and PCV-2 was not significant. Furthermore associations were significant for the weight of the animals and the proof of PCV-2 respectively PRRSV EU strain, for the clinical score und the proof of H. parasuis respectively PCV-2 as well as for PCV-2 und PRRSV EU strain. In conclusion the sampling by collective dry swabs of the serous skins and the following PCR examination for genomic fragments is a meaningful method for the diagnosis of diseases, which are accompanied by polyserositis. With this procedure the proof of the agents can be carried out successfully in animals with clinical signs as well as in animals which are already pretreated with antibiotics. For H. parasuis and M. hyorhinis, both causal agents of polyserositis, a significant association was calculated. Both agents are capable of causing clinical signs and pathological findings associated with polyserositis. The disease induced by H. parasuis is called Glaesser´s disease, in reference to M. hyorhinis as Mycoplasma Polyserositis. Due to the existing association of both agents and the accompanied clinical and pathological signs it is reasonable to use the term “Polyserositis Complex”.

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8326/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8326/1/Medl_Nikola.pdf Medl, Nikola ddc:500, ddc:590, Tierärztliche Fakultät

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8330/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8330/1/Rucker_Ute.pdf Ru

Fri, 8 Feb 2008 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8333/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/8333/1/Roczek_Alexandra.pdf Roczek, Alexandra

A field study on lighting in the production of meat-type-chickens was conducted between April 2006 and February 2007. Part 1 comprised a survey on lighting practices in a substantial number of broiler farms in southern Germany (n = 187 broiler stables covering a total area of 276.337 m²). It was carried out on the basis of a questionnaire adapted to broiler management. The focus of data collection was put on animal welfare issues of lighting. It was found that in conventional broiler farming closed buildings, with or without windows, are the most common kind of facility used. This applies to the number of farms as well as to the total area. A comparatively high proportion of stables from the early days of poultry farming in Germany shows that these agricultural buildings often remain in use unchanged for decades. Thus, once taken, decisions on lighting have practical consequences over the whole life-cycle of an agricultural building. The surroundings in closed stables are primarily conceived to accommodate the need of farm staff for work-efficiency and workplace-safety. Scientific findings on visual perception of poultry have not been implemented systematically in poultry farming, yet even though lighting constitutes a central management factor which can influence behaviour and health of the animals to a substantial degree. An exception is the fact that conventional fluorescent lights with a flicker frequency of 100 Hz, which poultry may perceive as discontinuous, have largely been eliminated from the farms we examined. Subsequently the lighting environments of characteristic types of broiler sheds were examined by means of spectrophotometry. Data were collected on illuminance, irradiance, UVA-irradiance and colour temperature in summer as well as in winter. Substantial differences were found between the two sampling dates, particularly where ultraviolet radiation was concerned. Additionally considerable differences between the type of building (with or without daylight) could be described. Taking into consideration the enlarged sensory facilities of birds (perception of ultraviolet radiation, flicker fusion frequency higher than 100 Hz), it can be concluded that the currently used methods for sampling light intensity, particularly the lux-unit, are suitable for poultry to a limited extent only. Part 2 was a study on the effects of two lighting programmes which differed exclusively in intensity (5 lx and 20 lx) from the 13th day of the fattening period. The following parameters were collected and evaluated under field conditions: ► Development of intraocular pressure ► Development of eye measures ► Behaviour and time-budget ► Excretion of glucocorticoids (corticosterone) ► Performance parameters Under 5 lx a modulation of intraocular pressure was observed. Moreover all eye measures were larger under 5 lx than under 20 lx. A biological relevance of these differences, which were very slight, can be denied with a high certainty. The animals kept under 20 lx showed phases of higher activity and more explorative and comfort behaviour than the group raised under 5 lx. These results could be interpreted as a decrease in global activity due to the low light intensity. The lighting programme with an intensity of 5 lx resulted in a tendency for a higher excretion of fecal corticosterone, which was significant on day 35 only. This could be interpreted as a direct influence of dark surroundings on glucocorticoid metabolism. Bright lighting (20 lx) increased the risk for necrotic dermatitis (inflammatory process) by a factor of more than three. A prolonged fattening time of 37-39 days predisposed the animals to the development of necrotic dermatitis as well. Pododermatitis score was better under dim lighting. Further effects of lighting on production parameters could not be found. Taken together, these results give strong hints that a decrease of light intensity to approximately 5 lx at the beginning of the third week of a production cycle may constitute a tool to improve performance and prevent skin damage. Nonetheless these low light intensities could be stressful for the animals. These results were collected under field conditions and under certain restrictions. More research under controlled conditions remains therefore to be done.

Verschiedene Studien deuten auf eine Beteiligung des Vitamin-D-Hormonsystems in der Entwicklung von Diabetes mellitus hin. Aufgrund eines Defekts in der 1,25(OH)2-Vitamin-D-Synthese stellt das PVDR 1-Schwein ein sehr gutes Modell zur Erforschung der Wirkung von 1,25(OH)2-Vitamin D auf das endokrine Pankreas dar. Die Evaluierung des direkten Einflusses von Vitamin D auf die Langerhans Inseln in vivo erfordert, dass in den Versuchstieren Vitamin D-unabhängige normocalcämische Bedingungen herrschen, da Hypocalcämie per se eine verminderte Funktion des endokrinen Pankreas mit sich bringt. Der Hauptteil dieser Arbeit bestand in den Bestrebungen, diese normocalcämischen Bedingungen dietätisch mit Lactose, Lactulose, Maltitol, Xylitol und Difruktosedianhydrid III (DFA III) zu erzeugen. Vor der Testung der Substanzen auf deren Vermögen den ionisierten Calciumspiegel im Blut zu erhöhen, wurden Toleranztests durchgeführt, um einen negativen Effekt auf die Gesundheit der Versuchsschweine auszuschließen. Die Wirkungstests mit adulten Schweinen ergaben, dass Normocalcämie durch die Zufütterung von Lactose (35%), Lactulose (20%), Maltitol (30%), Xylitol (30%) oder DFA III (6%) in der ursprünglichen Substanz beim PVDR 1-Schwein nicht erreicht werden kann. Dennoch konnten wir zeigen, dass vor allem Xylitol und in abgeschwächter Form auch Lactulose eine tendenzielle Steigerung des ionisierten Calciumgehaltes im Vollblut von homozygoten Schweinen bewirkt. Nachdem in adulten Schweinen keine Normocalcämie mittels unterschiedlich angereichertem Futter erreicht werden konnte, sollte im zweiten Teil der Arbeit überprüft werden, ob mit Hilfe von supplementierten Milchaustauscherfutter (MAT) eine Normalisierung des Calciumhaushaltes bei PVDR 1-Ferkeln möglich ist. Bei heterozygoten Ferkeln hatte DFA III tendenziell einen positiven Effekt auf die Calcium-Konzentration im Blut. Bei homozygoten Ferkeln zeigte sich jedoch kein Effekt auf die Calcium-Konzentration im Blut. Deutliche Unterschiede in den Überlebensraten der Versuchsgruppen, nämlich 80% in der DFA III- und 25% in der Kontrollgruppe, lassen darauf schließen, dass DFA III eine günstige Wirkung auf die Entwicklung der Rachitis bei PVDR 1-Ferkeln hat. Zusätzliche in vitro-Untersuchungen mit Langerhans-Inseln von Wildtyp- und PVDR 1-Ferkeln, durchgeführt um die Wirkung von 1,25(OH)2-Vitamin D auf die Insulinsekretion zu überprüfen, ergaben, dass Vitamin D-stimulierte Wildtyp-Inseln höhere Insulinsekretionen aufwiesen. Die Insulinsekretionen der Pankreas-Inseln von PVDR 1-Tieren, die signifikant niedriger waren als die der Wildtyp-Ferkel, konnten jedoch durch 1,25(OH)2-Vitamin D nicht gesteigert werden. Aufbauend auf diese Studie könnten Folgeversuche mit anderen Substanzen und höheren Tierzahlen diesem Tiermodell eine höhere Aussagekraft verleihen.