Podcasts about calcineurin

Episode 557: Fancy Creams for Scaly Skin: Topical calcineurin inhibitors for atopic dermatitis In episode 557, Mike and James invite Emelie Braschi back to the podcast to talk about how effective topical calcineurin inhibitors are for atopic dermatitis. We'll give you all the numbers so have a listen and learn what they are. Show notes Tools for Practice Fancy Creams for Scaly Skin: Topical calcineurin inhibitors for atopic dermatitis

Episode 557: Fancy Creams for Scaly Skin: Topical calcineurin inhibitors for atopic dermatitis In episode 557, Mike and James invite Emelie Braschi back to the podcast to talk about how effective topical calcineurin inhibitors are for atopic dermatitis. We'll give you all the numbers so have a listen and learn what they are. Show notes […]

We revisit the topic of Hyperkelamia to update our prior episode from 2015 (pre-Lokelma) Hosts: Brian Gilberti, MD Jonathan Kobles, MD https://media.blubrry.com/coreem/content.blubrry.com/coreem/Hyperkalemia.mp3 Download 2 Comments Tags: Renal Colic Show Notes Introduction Background Physiology: Normal range and the significance of deviations (>5.5 mEq/L) Epidemiology: Prevalence of hyperkalemia in the ER ESRD missed HD → ECG, monitor Causes / Risk Factors Causes Kidney Dysfunction, Medications,  Cellular Destruction,  Endocrine Causes, Pseudohyperkalemia High-Risk Medications: Antibiotics: Bactrim, antifungals Calcineurin inhibitors

Link to bioRxiv paper: http://biorxiv.org/cgi/content/short/2023.01.31.526442v1?rss=1 Authors: Marchesan, E., Nardin, A., Mauri, S., Di Paola, S., Chinellato, M., von Stockum, S., Chakraborty, J., Herkenne, S., Basso, V., Schrepfer, E., Marin, O., Cendron, L., Medina, D. L., Scorrano, L., Ziviani, E. Abstract: Selective removal of dysfunctional mitochondria via autophagy is crucial for the maintenance of cellular homeostasis. This event is initiated by the translocation of the E3 ubiquitin ligase Parkin to damaged mitochondria, and it requires the Serine/Threonine-protein kinase PINK1. In a coordinated set of events, PINK1 operates upstream of Parkin in a linear pathway that leads to the phosphorylation of Parkin, Ubiquitin, and Parkin mitochondrial substrates, to promote ubiquitination of outer mitochondrial membrane proteins. Ubiquitin decorated mitochondria are selectively recruiting autophagy receptors,which are required to terminate the organelle via autophagy. In this work we show a previously uncharacterized molecular pathway that correlates the activation of the Ca2+-dependent phosphatase Calcineurin to Parkin-dependent mitophagy. Calcineurin downregulation or genetic inhibition prevents Parkin translocation to CCCP-treated mitochondria, and impairs stress-induced mitophagy, whereas Calcineurin activation promotes Parkin mitochondrial recruitment and basal mitophagy. Calcineurin interacts with Parkin, and promotes Parkin translocation in the absence of PINK1, but requires PINK1 expression to execute mitophagy in MEF cells. Genetic activation of Calcineurin in vivo boosts basal mitophagy in neurons, and corrects locomotor dysfunction and mitochondrial respiratory defects of a Drosophila model of impaired mitochondrial functions. Our study identifies Calcineurin as a novel key player in the regulation of Parkin translocation and mitophagy. Copy rights belong to original authors. Visit the link for more info Podcast created by Paper Player, LLC

Link to bioRxiv paper: http://biorxiv.org/cgi/content/short/2022.11.29.518248v1?rss=1 Authors: Cuentas-Condori, A., Chen, S., Krout, M., Gallick, K., Tipps, J., Flautt, L., Richmond, J. E. E., Miller, D. M. Abstract: Presynaptic terminals are actively relocated during development to refine circuit function, but the underlying cell biological mechanisms are largely unknown. In C. elegans, the presynaptic boutons of GABAergic DD neurons are moved to new locations during early larval development. We show that developmentally regulated expression of a presynaptic Epithelial Na+ Channel (ENaC), UNC-8, promotes a Ca2+-dependent mechanism, resembling Activity-Dependent Bulk Endocytosis (ADBE), that dismantles presynaptic material for reassembly at nascent DD synapses. ADBE normally functions in highly active neurons to accelerate local recycling of synaptic vesicles. We show that DD presynaptic remodeling depends on canonical features of ADBE including elevated intracellular Ca2+, the phosphatase Calcineurin and its targets, dynamin and the F-BAR protein syndapin, and Arp2/3-driven actin polymerization. Thus, our findings suggest that a native mechanism (ADBE) for maintaining neurotransmitter release at local synapses has been repurposed, in this case, to dismantle presynaptic terminals for reassembly at new locations. Copy rights belong to original authors. Visit the link for more info Podcast created by Paper Player, LLC

Link to bioRxiv paper: http://biorxiv.org/cgi/content/short/2022.08.31.506100v1?rss=1 Authors: Armstrong, N. S., Frank, C. A. Abstract: The ability of synapses to maintain physiological levels of evoked neurotransmission is essential for neuronal stability. A variety of perturbations can disrupt neurotransmission, but synapses often compensate for disruptions and work to stabilize activity levels, using forms of homeostatic synaptic plasticity. Presynaptic homeostatic potentiation (PHP) is one such mechanism that is expressed at the model Drosophila melanogaster larval neuromuscular junction (NMJ) synapse. In PHP, neurotransmitter release increases in response to challenges to the synapse, resulting in the maintenance of evoked neurotransmission. Prior work separated PHP into two temporal phases, acute and chronic. Those data suggested that cytoplasmic calcium signaling was important for a long-term maintenance of PHP. Here we used a combination of transgenic Drosophila RNA interference and overexpression lines, along with NMJ electrophysiology, synapse imaging, and pharmacology to test if regulators of the calcium/calmodulin-dependent protein phosphatase calcineurin are necessary for the normal expression of acute or chronic forms of PHP. We found that either pre- or postsynaptic dysregulation of a Drosophila gene regulating calcineurin, sarah (sra), blocks PHP. Examination of tissue-specific data showed that increases and decreases in sra expression are both detrimental to PHP. Additionally, the acute and chronic phases of PHP are functionally separable depending entirely upon which sra genetic manipulation is used. Surprisingly, concurrent pre- and postsynaptic sra knockdown or overexpression ameliorated PHP blocks revealed in single tissue experiments. Pharmacological inhibition of calcineurin corroborated this latter finding. Our results suggest that a discrete balance of calcineurin signaling is needed across multiple synapse tissue types and over different temporal phases to stabilize peripheral synaptic outputs. Copy rights belong to original authors. Visit the link for more info Podcast created by PaperPlayer

Get inside the black box of transplant medicine as we discuss: Kidney transplant for the internist. Join Dr. Cyrus Askin, @askins_razor, one of our Curbsiders Correspondents, as he teams up with the fine folks from freely Filtered in this NephMadness episode exploring topics in kidney transplant! On this show, the gang turns to Dr. Samira Farouq, @ssfarouk, a Mount Sinai transplant nephrologist, to take the reins during this guided tour of concepts in transplant medicine that internists should be familiar with. During this episode, you’ll learn about indications for kidney transplant, immunosuppressive agents, what to watch out for in your post-transplant patients and so much more! And of course, we will talk a little NephMadness as we wrap things up. So maybe you need to learn about kidney transplant or perhaps you’re still mourning the loss of March Madness 2020 - either way, we encourage you to take a listen and hope you’ll enjoy!   Listeners can claim free CE credit for this episode at curbsiders.vcuhealth.org (goes live at 1200 ET on the episode’s release date).    Show Notes | Subscribe | Spotify | Swag! | Top Picks | Mailing List | thecurbsiders@gmail.com | CME   It's time for NephMadness 2020! Fill out your bracket before the April 30, 2020 deadline and be sure to list The Curbsiders as your team.  Read this year’s region posts here. Submit an individual or team bracket here. Discuss your picks with #NephTwitter!   Credits Written and Produced by: Cyrus Askin MD, Matthew Watto MD and the Freely Filtered Crew Infographic: Cyrus Askin MD Cover Art: Kate Grant MBChB DipGUMed Hosts: Cyrus Askin MD, Joel Topf MD, Samira Farouk MD, Swapnil Hiremath MD, Jennie Lin MD & Matt Sparks MD Editor: Matthew Watto MD (written materials); Clair Morgan of nodderly.com   Sponsor We are excited to announce that the Curbsiders are now partnering with VCU Health Continuing Education to offer continuing education credits for physicians and other healthcare professionals. Check out curbsiders.vcuhealth.org for more information.   Time Stamps 00:00 Announcement, Intro to Freely Filtered and NephMadness 04:00 Case of advanced CKD; Who/when to refer for transplant 12:05 Benefits of renal transplant 16:22 Counseling patients with advanced CKD about transplant and a bit on living donors 20:40 Medications after transplant; Drug-drug interactions 25:50 Dr. Sparks’ 30 second exam for the transplant patient; Diarrheal illness 32:07 Calcineurin inhibitor levels 36:42 Prophylaxis for long term complications 40:21 Allograft rejection; BAMF criteria 50:40 Cardiovascular risk; Statins 56:11 Malignancy after kidney transplant 60:00 NephMadness Transplant Region: Biomarkers vs Biopsy 72:23 Outro   Goal Listeners will learn valuable skills to assist in the management and counseling of pre- and post- kidney transplant patients.   Learning objectives After listening to this episode listeners will…   Recognize the criteria for kidney transplant referral and evaluation, as well as the importance of referring a patient as soon as they are eligible.  Be able to counsel a patient regarding what to expect before, during and after the transplant process. Know the main classes of medication used after patients have received transplants, to include their side effects and any relevant monitoring.  Be familiar with the different types of rejection, the clinical signs/symptoms of rejection and the utility / limitations of kidney biopsy. Be able to discuss the post-transplant complications of kidney transplantation (cardiovascular, malignancy, etc.) as well as what type of prophylactic medications should be considered in these patients.   Disclosures Drs. Cyrus Askin MD, Samira Farouk MD, Swapnil Hiremath MD, Jennie Lin MD & Matt Sparks MD report no relevant financial disclosures. Dr. Topf has received honoraria from Astra Zeneca and Cara Therapeutics. He is joint venture partner in Davita Dialysis centers receiving dividends. The Curbsiders report no relevant financial disclosures.    Citation Cyrus A, Topf J, Farouk S, Swapnil H, Lin J, Sparks M, Watto MF. “#210 NephMadness: Kidney Transplant for the Internist”. The Curbsiders Internal Medicine Podcast. https://thecurbsiders.com/episode-list. April 27, 2020

Michael Bird was one of the first 25 Certified Havening Practitioners in the world and has practiced as a Counselling Therapist/Life Coach/Sports Psychologist for more than 20 years. In that time he has been fortunate to have been able to support his clients through a process of discovery, acceptance, empowerment and change. He has helped countless clients to…Read More

Commentary by Dr. Valentin Fuster

Differentiate, diagnose, and treat the various forms of dermatitis and stop the ‘itch that rashes’ with this in-depth, myth-busting episode of “The Dermsiders” with Dr. Kalman Watsky Clinical Professor of Dermatology at Yale Medical School. Topics include: how to differentiate between and diagnosis various forms of dermatitis, topical therapies, common pitfalls, patch testing, and more! Special thanks to Bryan Brown and Beth Garbitelli who wrote and produced this episode and the show notes! Written by: Bryan Brown, MD and Beth Garbitelli Edited by: Matthew Watto, MD Infographics by: Bryan Brown, MD Cover image by: Beth Garbitelli Full show notes available at http://thecurbsiders.com/podcast Join our mailing list and receive a PDF copy of our show notes every Monday. Rate us on iTunes, recommend a guest or topic and give feedback at thecurbsiders@gmail.com. Time Stamps 00:00 Hook 00:24 Disclaimer 02:32 Picks of the week 03:33 Guest bio and intro to the topic 05:01 Getting to know our guest 10:24 Clinical case of dermatitis 11:00 Atopic dermatitis and eczema: definition and background 16:21 Counseling patients w/atopic dermatitis on choice of soap 19:46 Mimics of atopic dermatitis 25:16 Seborrheic dermatitis 26:46 Dyshidrotic eczema 28:35 Behavior modification for atopic dermatitis 32:21 Wet pajamas 34:34 Bleach baths 36:52 Contact dermatitis 41:29 Patch testing 45:58 Back to our case, making the diagnosis 47:44 Topical steroids 51:43 Skin atrophy from steroids 55:45 Calcineurin inhibitors as steroid sparing agents 59:30 How to handle chronic need for topical steroids 65:24 Questions from Facebook 69:04 Take home points 72:21 Outro Tags: eczema, dermatology, dermatologist, skin lesion, atopic, contact, allergic, irritant, steroid, topical, therapy, atrophy, dermatitis, rash, skin, patch, testing, calcineurin, inhibitor, assistant, care, doctor, education, family, foam, foamed, health, hospitalist, hospital, internal, internist, meded, medical, medicine, nurse, practitioner, professional, primary, physician, resident, student

When a patient receives a kidney transplant, there is a possibility that their body will reject this new organ and a variety of treatments are used to try to prevent this. However, these treatments can cause their own unwanted side effects. In a new Cochrane Review in July 2017, Krishna Karpe and colleagues from Canberra Hospital in Australia looked at the evidence for alleviating this for the group of drugs known as Calcineurin inhibitors. Here’s Krishna to tell us what they found.

When a patient receives a kidney transplant, there is a possibility that their body will reject this new organ and a variety of treatments are used to try to prevent this. However, these treatments can cause their own unwanted side effects. In a new Cochrane Review in July 2017, Krishna Karpe and colleagues from Canberra Hospital in Australia looked at the evidence for alleviating this for the group of drugs known as Calcineurin inhibitors. Here’s Krishna to tell us what they found.

Systemische Immunsuppression nach Herztransplantation wurde in den letzten zwanzig Jahren fast ausschließlich unter Zuhilfenahme von Calcineurininhibitoren (CNI) wie Tacrolimus oder Ciclosporin A durchgeführt. Diese Medikamente besitzen jedoch ein erhebliches Nebenwirkungsprofil, und reduzieren insbesondere aufgrund ihrer Nephrotoxizität die Lebensqualität und Lebenserwartung der Patienten. Mit Proliferations-Signal-Inhibitoren wie Sirolimus und Mycophenolat Mofetil (MMF) stehen jedoch auch Immunsuppressiva zu Verfügung die ein anderes Nebenwirkungsprofil besitzen. Frühere Studien, mit dem Versuch Therapieregime zu ändern, auf Calcineurininhibitoren zu verzichten und ausschließlich auf Sirolimus und MMF zu wechseln, brachten vielversprechende Ergebnisse in Bezug auf Abstoßungsfreiheit und Transplantatvaskulopathie. Die Nierenfunktion konnte durch den Therapiewechsel erhalten werden und eine fortschreitende Nierenschädigung sogar verhindert werden (Fenandez-Valls M.2005). Alle diese bisherigen Untersuchungen basierten jedoch auf Studienprotokollen, die ein spätes Absetzen der Calcineurininhibitoren vorsahen. In dieser Studie wurden fünfzehn Patienten unmittelbar ab dem Zeitpunkt der orthotopen Herztransplanatation mit einer Calcineurininhibitor freie Immunsuppression behandelt. Als Basis- immunsuppression erhielten die Patienten Sirolimus (Rapamune®, Wyeth Pharma, Münster) mit angestrebtem Plasmaspiegel zwischen 10 und 15ng/ml, MMF (Cellcept®, Roche Pharmaceuticals AG, Basel, Schweiz) mit angestrebtem Talspiegel zwischen 1,5 und 4 µg/ml, sowie Corticosteroide (Prednisolut®, Mibe GmbH, Sandersdorf-Brehna) mit einer Dosis von initial 1mg/kg/Tag auf 0,1mg/kg/Tag ausgeschlichen. Die Patienten wurden über einen Zeitraum von fünf Jahren nachuntersucht. Dabei wurde neben dem Überleben der Patienten unter anderem die Häufigkeit von Abstoßungsreaktionen, Transplantatvaskulopathie, Pumpfunktion des Grafts, Nierenfunktion sowie Lipid und Glucosestoffwechsel beobachtet. Unsere Studie zeigte, dass de novo Calcineurininhibitor-freie Immunsuppression nach Herztransplantation mit guten klinischen Ergebnissen möglich ist, 14 der 15 in die Studie eingeschlossenen Patienten waren nach fünf Jahren am Leben. Die Anzahl der Abstoßungsreaktionen war jedoch höher als unter konventioneller Immunsupression. In unserer Studie, mit komplett CNI freiem Therapieprotokoll, war nach fünf Jahren lediglich bei 40% der Patienten keine Abstoßungsreaktion aufgetreten. Im Rahmen der Transplantatvaskulopathie kommt es nach Herztransplantation häufig zu einer Intimaproliferation und so zu einer Einengung der Gefäßdurchmesser. Die TVP stellt langfristig die primäre Ursache für ein Transplantatversagen dar und führt so entweder zum Tode oder zu einer erneuten Transplantation. In unserer Kohorte wurde über einen Beobachtungszeitraum von 5 Jahren keine Transplantatvaskulopathie beobachtet. Die Serumtriglyceridspiegel waren trotz Therapie mittels Statinen erhöht. Die chronische Nierenschädigung durch Calcineurininhibitoren ist irreversibel und die Nierenfunktion kann sich nur in geringem Maße erholen, wenn diese abgesetzt werden (Ojo AO, 2003). Sowohl MMF als auch Sirolimus haben keine nephrotoxischen Effekte und die Kombination beider verspricht einen Erhalt der Nierenfunktion über lange Zeit. Die Nierenfunktion in unserer Kohorte blieb nicht nur stabil, sondern verbesserte sich sogar leicht in dem Zeitraum der 5-Jahres Untersuchung. In keinem Fall wurde eine Nierenersatztherapie erforderlich. Die Kombination von MMF und Sirolimus mit kompletter Vermeidung von Calcineurininhibitoren scheint die Nierenfunktion zu erhalten und verbessert daher auch das Langzeit - Überleben. Während die Nephrotoxizität vermieden werden konnte, traten aber häufig andere nachteilige Ereignisse auf. Chirurgische Interventionen aufgrund von Perikardergüssen wurden in 5 Fällen erforderlich. Auch Pleuraergüsse, periphere Ödeme und venöse Thrombosen wurden beobachtet. Zwei Patienten mussten zwischenzeitlich aus der Studie genommen werden, da schwere gastrointestinale Nebenwirkungen auftraten. In drei Fällen wurde eine Konversion zu Calcineurininhibitoren nötig, da verzögerte Wundheilung auftrat, die eventuell auf den antiproliferativen Effekten von Sirolimus auf Fibroblasten beruht. Beim Vergleich mit Calcineurininhibitor basierter Immunsuppression, sollten uns mehrere Ergebnisse davor warnen, diese Therapie als Standard nach Herztransplantation zu verwenden. Allen voran die Anzahl der Abstoßungsreaktionen. Diese können schwerwiegende Folgen haben und schlimmstenfalls zu irreversiblem Transplantatversagen führen. Für Patienten, die beispielsweise ein beginnendes Nierenversagen haben, ist diese Immunsuppression jedoch ins Auge zu fassen. Unsere Daten zeigen einen außergewöhnlichen Effekt in Bezug auf das Auftreten der Transplantatvaskulopathie, dem Verlauf der Nierenfunktion und dem Auftreten von Transplantatvaskulopathie, verglichen mit Patienten, die mit Calcineurininhibitoren behandelt wurden. Die Verbesserung der Nierenfunktion für Patienten, mit beginnendem Nierenversagen ist ermutigend, hinsichtlich Erhaltung von Nierenfunktion und damit Lebensqualität nach Herztransplantation

Der humane Thyreotropin-Rezeptor (TSH-R) steuert die zentralen Funktionen der Schilddrüse und ist der wichtigste Regulator für deren Wachstum und Differenzierung. Er gehört zur Superfamilie der G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCR) und kann nach einer Stimulation mit TSH die G-Proteine aller vier Familien (Gs, Gi/o, Gq/11 und G12/13) aktivieren. Dabei werden die meisten zellulären Reaktionen wie die Proliferation der Schilddrüsenepithelzellen und die Bereitstellung der Schilddrüsenhormone einer Aktivierung von Gs zugeordnet. Zu Gs-unabhängigen Signalwegen des TSH-R war dagegen erst wenig bekannt. Da der Gq/11-vermittelte Signalweg durch die Aktivierung der Phospholipase C und Proteinkinase C in maligne Prozesse von Schilddrüsenzellen involviert sein könnte, sollten in der vorliegenden Arbeit Gq/11-abhängige Effektoren des TSH-R in humanen Schilddrüsenkarzinomzellen identifiziert und näher charakterisiert werden. Als Modellsystem wurden FTC 133 wt TSH-R Zellen verwendet, eine follikuläre Schilddrüsenkarzinom-Zelllinie, die den humanen TSH-R überexprimiert. In diesen wurde die Aktivierung des Calcium/Calcineurin-abhängigen Transkriptionsfaktors NFAT nach TSH-Stimulation erstmalig beschrieben. Bei einer anschließenden Reihenuntersuchung der NFAT-abhängigen Zielgene Autotaxin, VEGF, c-Myc, Regulator von Calcineurin 1 (RCAN1) und Cyclooxygenase-2 (Cox-2) wurden c-Myc, RCAN1 und Cox-2 als TSH-regulierte Gene identifiziert. Die Induktion von c-Myc war unabhängig von NFAT, dagegen bestätigten Expressionsstudien mit Calcineurin-Inhibitoren und dem spezifischen NFAT-Inhibitor INCA-6, dass RCAN1 und Cox-2 durch eine NFAT-Aktivierung induziert wurden. Diese Aktivierung wurde durch Gq/11-Proteine vermittelt, denn nach spezifischer Herunterregulation der Gq- und G11-α-Untereinheiten mittels siRNA konnten die Zielgene nicht mehr TSH-abhängig induziert werden. Weitere Analysen zum Mechanismus der NFAT-Aktivierung zeigten, dass eine Erhöhung der intrazellulären Calciumionenkonzentration ([Ca2+]i) allein über intrazelluläre Speicher nicht ausreichend war. Um NFAT zu aktivieren, mussten zusätzlich Calciumionen aus dem Extrazellulärraum einströmen. Untersuchungen mit dem STIM1-Inhibitor SKF-96365 wiesen dabei auf einen Calciumioneneinstrom über Speicher-operierte Ionenkanäle hin. Zusätzlich zur NFAT-regulierten Genexpression wurde in dieser Arbeit die TSH-induzierte Expression des Metallothioneins MT1X in FTC 133 wt TSH-R Zellen und in primären Thyreozyten analysiert. Die mRNA Induktion dieses Cystein-reichen und zytoprotektiven Proteins war ebenfalls abhängig von einer Expression der Gq/11-Proteine. Eine Erhöhung der [Ca2+]i reichte jedoch nicht aus, um MT1X signifikant zu induzieren. Zur gesteigerten Expression war darüber hinaus auch die Aktivierung der Proteinkinase C notwendig. In der vorliegenden Dissertation konnten somit RCAN1, Cox-2 und MT1X als Gq/11-regulierte Zielgene des humanen TSH-R charakterisiert werden. Dabei wurde eine NFAT-regulierte Genexpression nach einer TSH-Stimulation erstmalig gezeigt. Die präsentierten Ergebnisse weisen damit auf eine bisher unbeachtete biologische Rolle von Gq/11-abhängigen Signalwegen des humanen TSH-R in der Schilddrüse hin.

Background. With the aim to improve the inferior outcomes in elderly recipients of kidneys from elderly cadaver donors, we applied and investigated a therapeutic regimen consisting of Calcineurin- inhibitor-free, mycophenolate mofetil (MMF) – based immunosuppressive induction/maintenance protocol. In this article, we report the long-term results of this clinical trial. Methods. 89 recipients (mean age:63,8 y) of kidneys from cadaver donors (mean age: 66,8y) were consecutively recruited for this 5-year, prospective, open, single centre, pilot trial. Induction therapy consisted of MMF and steroids in conjunction with a a short course (4-10 days) of rabbit ATG. Maintenance treatment was performed with MMF/steroids or MMF alone under strict therapeutic drug monitoring by aiming target MPA-trough levels between 2 – 6 mg/mL. Results. Cumulative 5-year patient and renal allograft survival was 87,69 % and 69,81 %, respectively. Acute rejection episodes occurred in 23,6 % (21 patients). Long-term function of the old renal allografts proved to be satisfactory as reflected by serum Creatinine-values of 1,53 mg/dl and Urea-values of 57,9 mg/dl at 5 years. Conclusion. Application of a nephrotoxicity- and atherogenicity-free, MMF-based immunosuppressive induction/maintenance protocol in elderly recipient of kidneys from elderly cadaver donors leads to improved long-term outcomes which are comparable with data from young recipients who have received allografts from young cadaver donors.

Das humanpathogene Bakterium H. pylori persistiert im Gastroduodenaltrakt für Jahre oder sogar Jahrzehnte und löst durch die Kolonisation der Magenmukosa eine chronische Entzündungsreaktion aus. In den meisten Fällen bleibt diese symptomlos, es können jedoch auch schwerwiegende Erkrankungen wie ein Magen- oder Zwölffingerdarm-Geschwür oder Magenkrebs daraus hervorgehen. Obwohl die Infektion eine starke zelluläre und humorale Immunantwort hervorruft, kann H. pylori durch das Immunsystem nicht eliminiert werden. In dieser Arbeit wurde der Einfluss von H. pylori auf die Proliferation und Aktivierung von CD4+ T-Zellen untersucht. Dabei zeigte sich, dass H. pylori zwei Faktoren besitzt, um die Expansion der T-Zellen zu hemmen. Der eine, nicht näher charakterisierte Faktor scheint mit der Oberfläche der Bakterien assoziiert zu sein und inhibiert die Proliferation der T-Zellen bei direktem Kontakt der Bakterien mit den Zellen. Der zweite Faktor wurde als vakuolisierendes Zytotoxin VacA identifiziert, das, wie bisher bekannt war, in Epithelzellen die Bildung saurer Vakuolen auslöst. T-Zellen produzieren, wenn sie aktiviert werden, den Wachstumsfaktor IL- 2, beginnen sich zu vermehren und setzen eine Immunreaktion gegen das Pathogen in Gang. Das VacA-Toxin hemmt jedoch die Bildung von IL-2 und bewirkt eine Hemmung des Zellzyklus bei T-Zellen, indem es die Expression der Cycline D3 und E reprimiert. Diese sind essentiell für die Aktivierung des Retinoblastom-Proteins, das den Übergang des Zellzyklus von der G1- in die S-Phase vermittelt. Durch die Hemmung der IL-2-Produktion und die Erniedrigung der Oberflächenlokalisation von CD25, der -Kette des IL-2-Rezeptors, unterbricht VacA die Signaltransduktion, die normalerweise über den IL-2-Rezeptor zur Expression der Cycline führt. Die Hemmung der IL-2-Produktion durch VacA erfolgt auf transkriptioneller Ebene, indem die Aktivierung des Transkriptionsfaktors NFAT (Nuclear Factor of Activated T cells) verhindert wird. Die anderen für die Transkription des IL-2-Gens essentiellen Transkriptionsfaktoren AP-1 und NF-B werden durch VacA nicht beeinflusst. Die Stimulation der T-Zellen aktiviert zwei Haupt-Signalwege: einer führt über den MAPKinase / ERK-Kinase Weg zur Aktivierung von AP-1 und NF-B, der andere löst eine Erhöhung der Calcium-Konzentration im Zytoplasma aus, was die Ca2+-abhängige Phosphatase Calcineurin aktiviert. Calcineurin dephosphoryliert daraufhin den Transkriptionsfaktor NFAT und NFAT wird in den Zellkern transportiert, wo es zusammen mit AP-1 und NF-B die Transkription des IL-2-Gens initiiert. Es konnte gezeigt werden, dass VacA die Translokation von NFAT in den Kern durch Hemmung der Phosphatase-Aktivität von Calcineurin verhindert. Dies hat zur Folge, dass NFAT-abhängige Gene, wie das IL-2- Gen oder das für CD25 codierende Gen, nicht abgelesen werden können. Dass Calcineurin ein geeignetes Zielmolekül ist, um eine Immunantwort zu unterdrücken, zeigen auch die medizinisch bedeutsamen Substanzen FK506 (Tacrolimus) und Cyclosporin A. Beide V Zusammenfassung 91 Substanzen verursachen durch Hemmung von Calcineurin eine starke Immunsuppression. In DNA-Microarray-Analysen wurde untersucht, ob VacA einen ähnlich drastischen Effekt auf die Funktion der T-Zellen hat wie FK506. Dabei zeigte der Vergleich der Genexpression von VacA- und FK506-behandelten T-Zellen, dass VacA eine Untergruppe der Gene, die auch von FK506 reprimiert werden, herunterreguliert, wie z.B. die Gene für die Zytokine Macrophage Inflammatory Protein (MIP)-1, MIP-1, Single C Motif-1 (SCM-1) und SCM- 1. VacA scheint also die Genaktivität von T-Zellen ähnlich wie FK506 zu modulieren, was auf einen ähnlichen Mechanismus, nämlich die Calcineurin-Hemmung schließen lässt. Da das VacA-Toxin ein sekretiertes Protein ist, das auch in den tieferen Schichten des Magengewebes nachgewiesen werden kann, erreicht H. pylori nicht nur die vereinzelt im Magenepithel vorkommenden T-Zellen, sondern auch die T-Zellen, die bei der Infektion in die Lamina propria, eine tiefere Schicht der Magenmukosa, einwandern. Durch die Unterdrückung der T-Zell-Aktivierung und die Repression von Zytokin-Genen, die wichtig sind für die Modulation der Immunantwort, induziert H. pylori so vermutlich eine lokale Immunsuppression, die seine Eliminierung durch das Immunsystem verhindert und eine chronische Infektion des Magens ermöglicht. In einem zweiten Projekt wurde die Spaltung von CagA in ein 100 kD- und ein Tyrosinphosphoryliertes 40 kD- Fragment nach dessen Translokation in diverse Zelltypen untersucht. Dabei konnte gezeigt werden, dass die Prozessierung nicht nur in Makrophagen, sondern auch in dendritischen Zellen und in T-Zellen auftritt. Die Spaltung scheint von der Tyrosin-Phosphorylierung des CagA-Proteins und von Calcium abhängig zu sein. Dabei wurde die Ca2+-abhängige Protease Calpain in einem in vitro-Ansatz als ein CagAprozessierendes Enzym identifiziert. Auch in Makrophagen kann die Spaltung von CagA in P100 und P40P-Tyr durch den Calpain-Inhibitor Calpeptin verhindert werden. Die Tatsache, dass transloziertes CagA in allen getesteten eukaryontischen Zelltypen außer der Magenepithelzellinie AGS prozessiert wird, deutet darauf hin, dass diese Prozessierung eine biologische Bedeutung hat.