Podcasts about oxidase

In this episode, we explore the intricate structure and functions of mitochondria, focusing on the electron transport chain complexes and the generation of reactive oxygen species. We delve into the significance of lipid composition in maintaining mitochondrial integrity, the detrimental effects of ROS-induced lipid peroxidation, and how SS-31 can prevent this damage. Additionally, we discuss the potential therapeutic implications of SS-31 peptide not only on the cellular level in mitigating mitochondrial dysfunction, but also its role in various disease settings and exercise capacity as well. Topics: 1. Overview of Mitochondrial Structure - Outer membrane and inner membrane with cristae - Mitochondrial matrix containing DNA, ribosomes, and enzymes - Inner membrane with electron transport chain complexes (I to IV) and ATP synthase 2. Functions of Electron Transport Chain Complexes - Complex I (NADH Dehydrogenase) transferring electrons from NADH to ubiquinone - Complex II (Succinate Dehydrogenase) transferring electrons from FADH2 to coenzyme Q - Complex III (Cytochrome bc1 Complex) passing electrons to cytochrome c and pumping protons - Complex IV (Cytochrome c Oxidase) transferring electrons to oxygen to form water and pumping protons 3. Role of Electron Transfer in ATP Synthesis - Proton pumping by complexes I, III, and IV creating an electrochemical gradient - ATP synthase utilizing proton gradient to synthesize ATP from ADP and Pi 4. Generation and Effects of Reactive Oxygen Species (ROS) - Formation of ROS as byproducts of ATP production - Types of ROS and their damaging effects on cellular components 5. Causes of ROS Production and Mitochondrial Dysfunction - Electron leak leading to premature electron reactions with oxygen - Factors contributing to increased ROS production such as environmental toxins and diet --- Leela Quantum Tech --- 6. Importance of Lipid Composition in Mitochondrial Membrane - Phospholipids, particularly cardiolipin, in the inner mitochondrial membrane - Role of cardiolipin in maintaining membrane integrity and supporting respiration proteins 7. Impact of ROS and Lipid Peroxidation on Mitochondrial Function - ROS-induced lipid peroxidation affecting cardiolipin composition - Implications of cardiolipin peroxidation in diseases like metabolic dysfunction and insulin resistance 8. SS-31 Peptide Intro - Accumulation in the inner mitochondrial membrane - Dimethyltyrosine residue scavenging oxyradicals and inhibiting lipid peroxidation 9. Mechanisms of Action of SS-31 Peptide - Stabilization of lipid constructs in the inner mitochondrial membrane - Prevention of mitochondrial permeability transition pore (mPTP) opening - Reduction of mitochondrial ROS and prevention of mitochondrial swelling and cell death 10. Applications and Research Areas of SS-31 Peptide - Studies in neuroinflammation, neurodegeneration, diabetes, age-related diseases, kidney disease, and cardiac function - Potential as a therapeutic agent for diseases associated with mitochondrial dysfunction 11. Conclusion - Overview of SS-31 peptide's mechanisms and potential applications - Reminder to always consult licensed medical professionals. Thanks for tuning in! Leela Quantum Tech Get Chloe's Book Today! "⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠75 Gut-Healing Strategies & Biohacks⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠" Follow Chloe on Instagram ⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠@synthesisofwellness⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠ Follow Chloe on TikTok @chloe_c_porter Visit ⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠synthesisofwellness.com⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠⁠ to purchase products, subscribe to our mailing list, and more! Thanks again for tuning in! --- Support this podcast: https://podcasters.spotify.com/pod/show/chloe-porter6/support

Link to bioRxiv paper: http://biorxiv.org/cgi/content/short/2023.03.27.534387v1?rss=1 Authors: Sasaki, M., Hara, T., Wang, J. X., Zhou, Y., Kennedy, K. V., Umeweni, N. N., Alston, M. A., Spergel, Z. C., Nakagawa, R., McMillan, E. A., Whelan, K. A., Karakasheva, T. A., Hamilton, K. E., Ruffner, M. A., Muir, A. B. Abstract: Background & Aims: Epithelial disruption in eosinophilic esophagitis (EoE) encompasses both impaired differentiation and diminished barrier integrity. We have shown that lysyl oxidase (LOX), a collagen cross-linking enzyme, is upregulated in the esophageal epithelium in EoE. However, the functional roles of LOX in the esophageal epithelium remains unknown. Methods: We investigated roles for LOX in the human esophageal epithelium using 3-dimensional organoid and air-liquid interface cultures stimulated with interleukin (IL)-13 to recapitulate the EoE inflammatory milieu, followed by single-cell RNA sequencing, quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, western blot, histology, and functional analyses of barrier integrity. Results: Single-cell RNA sequencing analysis on patient-derived organoids revealed that LOX was induced by IL-13 in differentiated cells. LOX-overexpressing organoids demonstrated suppressed basal and upregulated differentiation markers. Additionally, LOX overexpression enhanced junctional protein genes and transepithelial electrical resistance. LOX overexpression restored the impaired differentiation and barrier function, including in the setting of IL-13 stimulation. Transcriptome analyses on LOX-overexpressing organoids identified enriched bone morphogenetic protein (BMP) signaling pathway compared to wild type organoids. Particularly, LOX overexpression increased BMP2 and decreased BMP antagonist follistatin. Finally, we found that BMP2 treatment restored the balance of basal and differentiated cells. Conclusions: Our data support a model whereby LOX exhibits non-canonical roles as a signaling molecule important for epithelial homeostasis in the setting of inflammation via activation of BMP pathway in esophagus. The LOX/BMP axis may be integral in esophageal epithelial differentiation and a promising target for future therapies. Copy rights belong to original authors. Visit the link for more info Podcast created by Paper Player, LLC

3.04 Gram Negative Bacteria   Microbiology review for the USMLE Step 1 Exam.   Gram negative bacteria are characterized by a thin cell wall surrounded by a lipid outer membrane They do not retain the violet gram stain and appear pink after staining Gram negative bacteria can be classified by shape: cocci, coccobacilli, bacilli, and spirals Gram negative cocci include Neisseria species, which can be further categorized as maltose fermenters or non maltose fermenters Gram negative coccobacilli include: Bordetella pertussis, Haemophilus influenzae, Pasteurella, Francisella tularensis, Brucella, and Acinetobacter Gram negative bacilli can be divided into lactose fermenting and non lactose fermenting categories Lactose fermenting gram negative bacilli include: Escherichia coli, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, and Serratia Non lactose fermenting gram negative bacilli can be further divided into oxidase positive and oxidase negative Oxidase positive non lactose fermenting gram negative bacilli include Pseudomonas Oxidase negative non lactose fermenting gram negative bacilli include Shigella, Yersinia, and Salmonella Gram negative spirals can be divided into oxidase positive and oxidase negative categories Oxidase positive gram negative spirals include Vibrio species, Helicobacter pylori, and Campylobacter jejuni Oxidase negative gram negative spirals include Borrelia burgdorferi (cause of lyme disease) and Treponema pallidum (cause of syphilis)

Producer/Host: Sarah O’Malley This episode explains the function of the CO1 gene, which is used for DNA barcoding animals. The gene codes for part of the protein cytochrome oxidase, which is integral to aerobic respiration and the generation of ATP. It is also idea for barcoding because of its not to fast/not too slow mutation rate. About the host: Sarah O’Malley is an ecologist, naturalist and science communicator passionate about deepening her listeners’ experiences with the natural world. She teaches biology and sustainability at Maine Maritime Academy and is currently collaborating on a guide book to the intertidal zone in the Gulf of Maine. The post The Essential Rhythm 12/11/22: Cytochrome oxidase what? first appeared on WERU 89.9 FM Blue Hill, Maine Local News and Public Affairs Archives.

Producer/Host: Sarah O’Malley This episode explains the function of the CO1 gene, which is used for DNA barcoding animals. The gene codes for part of the protein cytochrome oxidase, which is integral to aerobic respiration and the generation of ATP. It is also idea for barcoding because of its not to fast/not too slow mutation rate. About the host: Sarah O’Malley is an ecologist, naturalist and science communicator passionate about deepening her listeners’ experiences with the natural world. She teaches biology and sustainability at Maine Maritime Academy and is currently collaborating on a guide book to the intertidal zone in the Gulf of Maine. The post The Essential Rhythm 12/11/22: Cytochrome oxidase what? first appeared on WERU 89.9 FM Blue Hill, Maine Local News and Public Affairs Archives.

In this episode, we review the high-yield topic of Monoamine Oxidase (MAO) Inhibitors from the Psychiatry section. Follow Medbullets on social media: Facebook: www.facebook.com/medbullets Instagram: www.instagram.com/medbulletsofficial Twitter: www.twitter.com/medbullets --- Send in a voice message: https://anchor.fm/medbulletsstep1/message

In this episode, we review the high-yield topic of Monoamine Oxidase (MAO) Inhibitors from the Psychiatry section. Follow Medbullets on social media: Facebook: www.facebook.com/medbullets Instagram: www.instagram.com/medbulletsofficial Twitter: www.twitter.com/medbullets

In this episode I continue going over biochemicals for gram negative rods: oxidase. I also briefly discuss some species of gram negative rods and their oxidase results.

Obsessive compulsive disorder (OCD) can often be effectively treated with cognitive behavioral therapy or serotonin reuptake inhibitors. About one-third of patients, however, do not receive adequate symptom relief. Jon E. Grant discusses the potential of monoamine oxidase inhibitors (MAOIs) in treatment-resistant OCD. In an article in the journal, Dr. Grant and his coauthors present new data from a case series of nine patients; three had marked improvement on phenelzine and three had some improvement. Large-scale trials are needed to fully assess the benefits and risks of the therapy in this population group.

This podcast explores the controversial potential untoward effects on cardiovascular health of xanthine oxidase inhibitors (often used for treatment of gout). The podcast takes a deep dive into the evidence to date, how to interpret it for frontline ambulatory pharmacists, and also previews studies to look out for in the near future. Presented by: Michael Nagy, PharmD, BCACPAssistant Professor, Medical College of Wisconsin School of PharmacyClinical Pharmacy Specialist – Zablocki VA Medical Center, Milwaukee, WI

This episode covers monoamine oxidase inhibitors!

Link to bioRxiv paper: http://biorxiv.org/cgi/content/short/2020.11.16.384487v1?rss=1 Authors: Dhawan, S., Myers, P., Landgraf, M. Abstract: Neurons utilize plasticity of dendritic arbors as part of a larger suite of adaptive plasticity mechanisms. This explicitly manifests with motoneurons in the Drosophila embryo and larva, where dendritic arbors are exclusively postsynaptic and are used as homeostatic devices, compensating for changes in synaptic input through adapting their growth and connectivity. We recently identified reactive oxygen species (ROS) as novel plasticity signals instrumental in this form of dendritic adjustment. ROS correlate with levels of neuronal activity and negatively regulate dendritic arbor size. Here, we investigated NADPH oxidases as potential sources of such activity-regulated ROS and implicate Dual Oxidase (but not Nox), which generates hydrogen peroxide extracellularly. We further show that the aquaporins Bib and Drip, but not Prip, are required for activity-regulated ROS-mediated adjustments of dendritic arbor size in motoneurons. These results suggest a model whereby neuronal activity leads to activation of the NADPH oxidase Dual Oxidase, which generates hydrogen peroxide at the extracellular face; aquaporins might then act as conduits that are necessary for these extracellular ROS to be channeled back into the cell where they negatively regulate dendritic arbor size. Copy rights belong to original authors. Visit the link for more info

Link to bioRxiv paper: http://biorxiv.org/cgi/content/short/2020.09.23.309245v1?rss=1 Authors: Wu, J.-X., Liu, R., Song, K., Chen, L. Abstract: Dual oxidases (DUOXs) produce hydrogen peroxide by transferring electrons from intracellular NADPH to extracellular oxygen. They are involved in many crucial biological processes and human diseases, especially in thyroid diseases. DUOXs are protein complexes co-assembled from the catalytic DUOX subunits and the auxiliary DUOXA subunits and their activities are regulated by intracellular calcium concentrations. Here, we report the cryo-EM structures of human DUOX1-DUOXA1 complex in both high-calcium and low-calcium states. These structures reveal the DUOX1 complex is a symmetric 2:2 hetero-tetramer stabilized by extensive inter-subunit interactions. Substrate NADPH and cofactor FAD are sandwiched between transmembrane domain and the cytosolic dehydrogenase domain of DUOX. In the presence of calcium ions, intracellular EF-hand modules enhance the catalytic activity of DUOX by stabilizing the dehydrogenase domain in a position that is optimal for electron transfer. Copy rights belong to original authors. Visit the link for more info

Thank you Brandon Trujillo, OMS IV for continuation of the podcasts focused on treatment of depression in a systematic fashion. Thank you Natalie Pratt, OMS IV; Cam Mecham, OMS IV; Angelo Garcia, OMS III and Rhett Dotson, OMS III for participating in the presentation. This presentation covers high yield principles that are tested but the area of coverage is narrow.

Link to bioRxiv paper: http://biorxiv.org/cgi/content/short/2020.05.31.126227v1?rss=1 Authors: Li, Q., Li, Q.-Q., Jia, J.-N., Liu, Z.-Q., Zhou, H.-H., Jin, W.-L., Mao, X.-Y. Abstract: Background and purpose: Epilepsy is a chronic neurological disease that is characterized by repetitive seizures. Seizures-related complications such as cognitive deficits, anxiety and sleep disorders seriously impact the life quality of patients. Antiepileptic drugs are widely used for the treatment of epilepsy. Sodium valproate is served as the first-line antiepileptic drugs and possesses various pharmacological effects on the brain. Sodium valproate exerts neuroprotective effects in acute nervous system diseases such as ischemic brain damage by inhibiting oxidative stress. However, the mechanism of neuroprotection of sodium valproate in epilepsy is unclear. Lysyl oxidase (Lox) is a monoamine oxidase that acts on extracellular matrix collagen and elastin and it can promote accumulation of oxidative stress. Our previous studies have confirmed that Lox is involved in ferroptosis, a novel iron-dependent and lipid peroxidation-mediated cell death pathway, during epilepsy. In this study, we would like to investigate whether sodium valproate can exert neuroprotective effects on kainic acid-induced epileptic seizures by inhibiting Lox-mediated ferroptosis. Methods: Epileptic mouse models were established by intracranial injection of 250 ng/l kainic acid on right hippocampus. Sodium valproate and ferroptosis inhibitors were administrated by intraperitoneal injecting. The epileptic behavior of the mice within 4 hours was recorded after intracranial injection of kainic acid. Mouse hippocampus was acquired to analyze the mRNA expression of prostaglandin-endoperoxide synthase 2 (PTGS2) and the production of 4-hydroxynonenal (4-HNE). In vitro, the protective effects of sodium valproate on glutamate-induced HT22 cell damage model was assessed by PI/Hoechst staining; The levels of PTGS2, 4-HNE and lipid ROS were analyzed by RT-qPCR, western blot and flow cytometry, respectively. RT-qPCR and Western blot analysis the mRNA and protein expression of Lox in the glutamate-induced HT22 cell damage model. The Lox overexpression model was established by intracranial injection of AAV on right hippocampus. Results: Pretreatment with sodium valproate and ferroptosis inhibitors could significantly alleviate the epileptic seizures in the kainic acid induced epilepsy mouse model. Western blot and RT-qPCR results showed that sodium valproate and ferroptosis inhibitors significantly inhibited the levels of 4-HNE and PTGS2. PI/Hoechst staining showed that 1 mM sodium valproate exerted protective effect on glutamate-induced HT22 cell injury model. There was no significant difference observed between sodium valproate and ferroptosis inhibitors co-intervention group and sodium valproate intervention group on glutamate-induced cell injury model. And sodium valproate could significantly inhibit the production of lipid reactive oxygen species and 4-HNE. The expression of Lox was significantly increased in the glutamate-induced HT22 cell injury model, which could be reversed by pretreatment of sodium valproate. And {beta}-aminopropionitrile (a specific inhibitor of Lox) could inhibit ferroptosis induced by glutamate, as well as ameliorate the epileptic seizures in the kainic acid induced epilepsy mouse model. Pretreatment with sodium valproate could not ameliorate the epileptic behavior in the Lox-overexpression mice. Western blot analysis showed that sodium valproate could not suppress the production of 4-HNE in kainic acid induced epileptic mice model. Conclusions: The neuroprotective effect of sodium valproate in epileptic seizures is closely related to the inhibition of ferroptosis. The inhibition of ferroptosis is involved in the neuroprotective effect of sodium valproate on glutamate-induced HT22 cell damage model. Sodium valproate may exert neuroprotective effects in kainic acid-induced epileptic seizures by abrogating Lox-mediated ferroptosis. Copy rights belong to original authors. Visit the link for more info

We are solar powered beings! But we now spend 93% of our lives INDOORS.   Brilliant founder of Sauna Space, Brian Richards, takes us through the fascinating body-wide healing phenomena of red light therapy. We cover all the science, the applications, and the specifics of how biologically relevant light (found largely in firelight, sunrise, and sunset) can cause massive changes in cell behavior, function, and repair. There are hundreds of research studies on this subject. Over 400 gold-standard, placebo-controlled clinical trials exist on this subject. It's only a matter of time before we see tanning salons and 7-Elevens popping up with this sort of therapy. Learn the facts now and become a savvy consumer on the good stuff.   Our bodies are solar panels that need to be fueled by the light that nourishes them.     If after this episode, you feel compelled to order a SaunaSpace product of your own, you can use promo code "AMRONMD" to receive a discount on your order.

Reaktive Sauerstoffspezies und ihre Interaktionen mit NO und vaskulären Signalmechanismen spielen eine fundamentale Rolle bei der Entstehung der endothelialen Dysfunktion und damit von pathophysiologischen Veränderungen innerhalb der Blutgefäße. Als Hauptquelle von reaktiven Sauerstoffspezies in Endothelzellen ist die NAD(P)H-Oxidase bekannt. Diese Arbeit klärt zugrunde liegende Signalmechanismen zur Aktivierung der NAD(P)H-Oxidase auf: Die Ergebnisse zeigen, dass die Tyrosinphosphatase SHP-1 eine wichtige Rolle bei Regulation der NAD(P)H-Oxidase spielt. Das Signal der SHP-1 wird mittels Tyrosinde- bzw. Phosphorylierungen über die Phosphatidylinositol-3-Kinase vermittelt, welche via Rac1 die NAD(P)H-Oxidase kontrolliert. Aufgrund dieser Ergebnisse könnte der SHP-1 in Endothelzellen eine zentrale Bedeutung bei der Entstehung der Endotheldysfunktion zukommen, denn ihre Aktivität ist mitverantwortlich bei der Kontrolle der NAD(P)H-Oxidase. Als physiologischen Faktor, der diesen Signalweg beeinflusst fanden wir den bekannten Wachstumsfaktor VEGF. Darüber hinaus konnten wir zeigen, dass Estradiol über eine Aktivierung der SHP-1 die NAD(P)H-Oxidase Aktivität reduziert. Insgesamt stellt unsere Arbeit die SHP-1 als molekularen Schalter erstmals in Zusammenhang mit der Regulierung der NADP)H-Oxidase und klärt die zugrunde liegenden Signalmechanismen auf.

Ischemic stroke is the second leading cause of death worldwide. Only one moderately effective therapy exists, albeit with contraindications that exclude 90% of the patients. This medical need contrasts with a high failure rate of more than 1,000 pre-clinical drug candidates for stroke therapies. Thus, there is a need for translatable mechanisms of neuroprotection and more rigid thresholds of relevance in pre-clinical stroke models. One such candidate mechanism is oxidative stress. However, antioxidant approaches have failed in clinical trials, and the significant sources of oxidative stress in stroke are unknown. We here identify NADPH oxidase type 4 (NOX4) as a major source of oxidative stress and an effective therapeutic target in acute stroke. Upon ischemia, NOX4 was induced in human and mouse brain. Mice deficient in NOX4 (Nox4(-/-)) of either sex, but not those deficient for NOX1 or NOX2, were largely protected from oxidative stress, blood-brain-barrier leakage, and neuronal apoptosis, after both transient and permanent cerebral ischemia. This effect was independent of age, as elderly mice were equally protected. Restoration of oxidative stress reversed the stroke-protective phenotype in Nox4(-/-) mice. Application of the only validated low-molecular-weight pharmacological NADPH oxidase inhibitor, VAS2870, several hours after ischemia was as protective as deleting NOX4. The extent of neuroprotection was exceptional, resulting in significantly improved long-term neurological functions and reduced mortality. NOX4 therefore represents a major source of oxidative stress and novel class of drug target for stroke therapy.

Im Rahmen dieser Dissertation wurde der potentielle Einfluss des endothelialen hyperpolarisierenden Faktors (EDHF) auf Thrombozyten untersucht und geprüft, ob die EDHF Wirkungen durch eine (oder mehrere) Epoxyeicosatriensäuren (Produkte der endothelialen CYP450 Monooxygenase) ausgelöst sein könnten. EDHF wurde bisher hauptsächlich, neben NO und Prostazyklin, als dritter funktionell bedeutender vom Endothel gebildeter vasodilatierender Faktor charakterisiert. Für NO und Prostazyklin ist vielfach eine Freisetzung in das Gefäßlumen und damit neben der lokalen dilatierenden Wirkung auch eine Beeinflussung zirkulierender Blutbestandteile, wie Thrombozyten beschrieben. Beide können die thrombozytäre Aktivierung und Aggregation effektiv hemmen und dadurch gefäßprotektive Wirkungen ausüben. Ob EDHF ebenfalls Blutbestandteile wie Thrombozyten beein-flussen kann, war die Hauptfragestellung dieser Arbeit. Wir konnten erstmals im Bioassay zeigen, dass kultivierte menschliche Endothelzellen (HUVEC) nach entsprechender Stimulation einen EDHF freisetzen, der Thrombozyten hyperpolarisiert. Weiterhin konnten wir nachweisen, dass dieser Faktor die thrombozytäre Adhäsion an Endothelzellen sowie die thrombozytäre Aktivierung (P-Selektin Expression) hemmte. Diese Effekte waren - analog zu den hyper-polarisierenden Effekten - vermittelt durch Aktivierung von Calcium aktivierbaren Kalium-Kanälen (KCa-Kanäle) mit großer (BKCa) und mittlerer (IKCa) Leitfähigkeit, nicht jedoch von denen mit geringerer (SKCa) Leitfähigkeit. Die beobachteten Hemmeffekte waren durch die EDHF Wirkungen auf das thrombozytäre Membranpotential erklärbar, ein zusätzlicher ergänzender membranpotentialunabhängiger Effekt konnte jedoch nicht ausgeschlossen werden. Der in unserem Bioassay nachweisbare EDHF zeigte ähnliche Eigenschaften wie exogen verabreichte Epoxyeicosatriensäuren (EETs) - Produkte, die durch die Cytochrom P450 2C8/9 Oxidase im Endothel aus Arachidonsäure gebildet werden. Erhärtet wurden diese Befunde durch eine CYP2C9 stabil überexprimierende Zellinie mit endothelialen Eigenschaften, welche verschiedene EETs in physiologischen Konzen-trationen freisetzte und deren Überstand ähnliche hyperpolarisierende und antiadhäsive Effekte auf Thrombozyten wie der EDHF hatte. EDHF stellte somit unter unseren experimentellen Bedingungen eine Epoxyeicosa-triensäure (oder eine Mischung verschiedener EETs) dar. Bei vielen Herz-Kreislauf Erkrankungen spielen thrombozytäre Aktivierung und Adhäsion eine wichtige Rolle. Insbesondere beim akuten Herzinfarkt, der Haupttodesursache in westlichen Industrieländern, kommt es in patho-physiologisch, z.B. durch Atherosklerose, vorgeschädigten Gefäßen, aufgrund einer arteriellen Thrombusbildung zum kompletten Gefäß-verschluss mit Myokardischämie. Daher könnte EDHF bzw. EET - infolge seiner thrombozytenhyperpolarisierenden und antiadhäsiven Effekte - von großer Bedeutung sein, vor allem, wenn er durch Risikofaktoren wie freie Sauerstoffradikale und Hyperlipidämie weniger stark beeinflusst würde als NO. Die Daten dieser Dissertation könnten somit zukünftiger Ansatzpunkt für weitere Untersuchungen sowie Basis für die Entwicklung potentiell gefäßprotektiver Medikamente zur effektiveren Therapie kardiovaskulärer Erkrankungen darstellen.

Background and Purpose: Oxidative stress has been proposed as a major contributing factor for vascular disease, that acts independently from its participation in predisposing disorders such as diabetes and arterial hypertension. A functionally relevant C242T polymorphism of the CYBA gene encoding the NAD(P)H oxidase p22(phox) subunit, is supposed to lead to an abnormal reduction in the generation of reactive oxygen species in vascular smooth-muscle and endothelial cells. Methods: We investigated the p22(phox) C242T single-nucleotide polymorphism by polymerase chain reaction in consecutive patients with ischemic stroke or transient ischemic attack under the age of 50 (n = 161) and in population-based control subjects (n = 136). Results: Homozygosity for the T variant was associated with an enhanced risk for cerebral ischemia (odds ratio 3.85, confidence interval 1.39-10.64) after adjusting for classical risk factors. Risk for cerebral ischemia was not increased in heterozygous subjects. Conclusion: The p22(phox) C242T single-nucleotide polymorphism is associated with stroke risk. This finding supports the hypothesis that oxidative stress may contribute to stroke pathogenesis. Copyright (C) 2008 S. Karger AG, Basel.

Mitochondrial verursachte Erkrankungen beim Menschen wurden erstmals 1959 entdeckt und 1962 von Rolf Luft beschrieben. Diese Erkrankungen sind nicht so selten, wie bisher angenommen: ihre geschätzte Prävalenz liegt bei 10-15 Fällen pro 100 000 Personen. Der Verdacht einer mitochondrialen Dysfunktion stellt sich immer dann, wenn es zu einer unerklärbaren Zusammensetzung von Symptomen bei scheinbar nicht verwandten Organen kommt. Es sind hauptsächlich das stark von der Atmungskette abhängige Muskel- und Nervengewebe betroffen. Ursächlich können Fehler in der Atmungskettenfunktion sein. Komplex - I - und IV -Mangel stellen dabei die zwei häufigsten Atmungsketten-Defekte dar. Das Ziel dieser Arbeit bestand darin, diese beiden Enzyme der Atmungskette NADH-CoQ-Reduktase (Komplex I) und Cytochrom-C-Oxidase (Komplex IV) in verschiedenen menschlichen Geweben (Skelettmuskulatur, Fibroblasten und Chorionzotten) zu charakterisieren. Die zu untersuchenden Variablen waren dabei die Nachweisbarkeit, die Proteinkonzentrationsabhängigkeit, die Aktivität, die Haltbarkeit und die Kinetik der Enzymkomplexe. In Bezug auf die pränatale Diagnostik sollte die Verwendbarkeit von Chorionzotten geprüft werden. Aktivitätsmessungen von Patienten wurden dargestellt und diskutiert. Die Skelettmuskulatur wies die am höchsten messbaren Aktivitäten bei beiden Komplexen auf. Bei den enzymkinetischen Studien zeigten alle untersuchten Gewebe für beide Komplexe lineare Verläufe der Lineweaver-Burk-Diagramme. Die sich aus den Diagrammen ableitende Maximal-Geschwindigkeit war für den Skelettmuskel in beiden Enzymen am höchsten. Das Muskelgewebe wies jedoch gegenüber den Fibroblasten und Chorionzotten eine geringere Affinität zum Substrat auf. Im Stabilitätstest wurde deutlich, dass sowohl die NADH-CoQ-Reduktase wie auch die Cytochrom-C-Oxidase bei -20°C extrem lagerungsinstabil waren. Es konnte bei drei Patienten, die eine typische Klinik für einen Defekt in der Atmungskette aufwiesen, eine biochemische Ursache gefunden werden. Bei zwei Patienten wurde eine reduzierte Aktivität im Komplex I gemessen. Sie präsentierten eine milde ausgeprägte myopathische Form. Ein Säugling zeigte einen kompletten Verlust der Komplex-IV-Atkivität. Dieser litt an Krampfanfällen, muskulärer Hypotonie und schwerer Azidose litt. Er verstarb an respiratorischer Insuffizienz am 10. Lebenstag

Reaktive – Sauerstoff - Spezies (ROS) spielen in der Physiologie und Pathophysiologie des vaskulären Systems eine wichtige Rolle. So kommt es z.B. bei Hypertonie, Atherosklerose, Ischämie / Reperfusion und weiteren Krankheiten und Stoffwechselstörungen, wie z.B. Hypercholesterinämie und Diabetes mellitus zu einem Ungleichgewicht zwischen Sauerstoffradikalbildung und anti - oxidativen Mechanismen. Superoxidanionen (O2 -) spielen insofern eine besondere Rolle, als sie durch direkte Interaktion endotheliales NO inaktivieren, so daß es seine vasodilatatorische, anti – proliferative und plättchenaggregationshemmende Funktion nicht mehr voll erfüllen kann. Damit ist O2 - maßgeblich an der Induktion der Endotheldysfunktion beteiligt. Bei Beginn dieser Arbeit gab es erste Hinweise, daß eine der leukozytären NAD(P)H - Oxidase ähnlichen Oxidase auch im Endothel existiert und wesentlich zur endothelialen O2 - - Bildung beiträgt. Wenig erforscht waren jedoch die Regulationsmechanismen dieser Oxidase. Ein bisher noch nicht bekannter Stimulus zur Steigerung der endothelialen O2 - - Bildung wurde 1996 beschrieben. In Endothelzellen aus bovinen Pulmonararterien führte eine Depolarisation zu einer gesteigerten O2 - - Bildung. Dies kann insofern von Bedeutung sein, als es sowohl unter physiologischen, als auch pathophysiologischen Bedingungen zu akuten oder chronischen Veränderungen des endothelialen Membranpotentials kommt. In dieser Arbeit wurde nun untersucht, ob eine NAD(P)H – Oxidase in der Tat auch in humanen Endothelzellen vorhanden ist, ob sie im Gegensatz zur leukozytären Form konstitutiv aktiv ist, und welchen Beitrag sie zur basalen endothelialen O2 - - Bildung leistet. Weitere Untersuchungen in HUVEC sollten zeigen, ob und wie sich sowohl De – als auch Hyperpolarisation der Zellmembran auf die O2 - - Bildung auswirken, welches Enzym hierbei eine Rolle spielt und welche Signaltransduktionsmechanismen beteiligt sind. Zur O2 - - Messung an vaskulären Zellen war die Verwendung der Lucigenin – Chemilumineszenz – Methode etabliert, so daß auch hier anfänglich mit dieser Methode gearbeitet wurde. Da jedoch dann Befunde veröffentlicht wurden, die zeigten, daß Lucigenin in Enzymsyste-men, die sonst kein oder nur wenig O2 - produzieren, zu einer erheblichen O2 - - Bildung führte, mußte mit weiteren Methoden der O2 - - Messung überprüft werden, ob diese Nachteile auch unter unseren Versuchsbedingungen auftraten. Verwendet wurden hierzu die MCLA – verstärkte Chemilumineszenz, die NBT – und Cytochrom C – Methode. Mit diesen verschiedenen, voneinander unabhängigen Methoden zeigte sich, daß in Anwesenheit von NADH Lucigenin selbst zu einer wesentlich gesteigerten O2 - - Bildung in Lysaten von humanen Umbilikalvenenendothelzellen (HUVEC) führt. Daher wurde zur Untersuchung der endothelialen O2 - - Bildung in dieser Arbeit schließlich nur die Cytochrom C Methode verwendet. Zur Überprüfung der Auswirkungen der verwendeten Substanzen auf das Membranpotential wurde die Membranpotentialmeßmethode mittels dem Potential – sensitiven Fluoreszenzfarbstoff Bis - oxonol aufgebaut und verwendet. Intakte HUVEC zeigten eine basale O2 - - Produktion, die durch bekannte Inhibitoren der leukozytären NAD(P)H – Oxidase, mit unterschiedlichen Wirkmechanismen signifikant gehemmt wurde (Diphenyleniodonium ca. 48%, Phenylarsenoxid ca. 34% ). Ebenso resultierte die Inaktivierung des GTP - bindenden - Proteins rac mit Clostridium difficile Toxin B in einer signifikanten Reduktion der basalen endothelialen O2 - - Produktion um ca. 30%. Weiterhin konnte gezeigt werden, daß nach Aufhebung der zellulären Integrität durch das Lysieren der HUVEC die Gabe von NADH eine um ca. 2.7 fach erhöhte O2 - - Produktion im Vergleich zu NADPH bewirkte. Mit Hilfe der Immunfluoreszenz bzw. rtPCR konnten außerdem zumindest ein Teil der leukozytären NAD(P)H – Oxidase Untereinheiten, p67phox und gp91phox auch in HUVEC nachgewiesen werden. Zur gezielten Depolarisation des Membranpotentials wurden ein Puffer mit erhöhter Kaliumkonzentration (90 mM), der nicht selektive Kalium – Kanal - Blocker Tetrabutylammonium Chlorid (1 mM) und das Kation – Ionophor Gramicidin (1 µM) verwendet. Die basale endotheliale O2 - - Produktion wurde durch diese Substanzen in ähnlichem Ausmaß (~ 60% ) signifikant gesteigert (n=23, p

Im Mittelpunkt der vorliegenden Arbeit steht die Funktion der Untereinheit e (Sue) der mitochondrialen F1FO-ATP Synthase von Saccharomyces cerevisi-ae. Anhand der Resultate der durchgeführten Experimente wurden folgende Schlussfolgerungen gezogen: (1) Sue ist der Lage, ein Sue-Homodimeres zu bilden. Das Protein spielt eine zentrale Rolle bei der Assemblierung der F1FO-ATP Synthase zu einem stabilen Dimer. Sue-Disruptanten bilden entsprechend kein stabiles ATP Synthase-Dimeres aus. Die C-terminalen 36 Aminosäurereste von Sue, die gegenüber Untereinheiten e aus Säugerzellen zusätzlich vorhanden sind, sind für die Dimerisierung von Sue und der F1FO-ATP Synthase ohne Bedeutung. (2) Zwischen den Untereinheiten e und k, die beide im FO-Sektor der ATP Synthase lokalisiert sind, besteht eine enge räumliche Beziehung. Für die In-teraktion von Sue mit Suk ist der Bereich von Sue, der anderen Untereinheiten e aus Säugerzellen ähnelt, ausreichend. (3) Im Hefegenom wurde ein der Sequenz von Suk nahe verwandtes Le-seraster gefunden. Die Sequenzähnlichkeit auf Aminosäureebene beträgt 45%. Ein entsprechendes hypothetisches Protein wurde als Suk hom bezeichnet. Eine Deletion dieser Sequenz allein oder gemeinsam mit dem Gen für Suk blieb ohne Auswirkungen auf die oxidative Phosphorylierung, die Assemblie-rung der F1FO-ATP Synthase und die Expression von Untereinheiten des FO-Sektors der F1FO-ATP Synthase. (4) Die Dimerisierung der F1FO-ATP Synthase und somit auch die Funkti-on von Sue als Dimerisierungsfaktor erwies sich als essentiell für die Funkti-on weiterer Komponenten der Atmungskette: der Cytochrom c-Oxidase und des Cytochrom bc1-Komplexes. Die Assemblierung der ATP Synthase wirkt sich auf die Aktivitäten der beiden Komponenten des Cytochrom bc1-COX-Suprakomplexes aus. Sie beeinflusst auch deren Assemblierung in den Supra-komplex beziehungsweise seine Stabilität. Die Anwesenheit der Region von Sue, die anderen Untereinheiten e aus Säugetierzellen ähnelt, reicht für die Bildung des Cytochrom bc1-COX-Suprakomplexes aus. Das Dimer der ATPase Synthase ist demzufolge in den Suprakomplex einge-bunden. Allerdings hat der Assemblierungszustand des Cytochrom bc1-COX-Suprakomplexes keinerlei Auswirkungen auf die Assemblierung der ATP Synthase. Dies deutet auf einen hierarchisch ablaufenden Prozeß der Bildung eines Suprakomplexes aus Cytochrom bc1-Komplex, Cytochrom c-Oxidase und F1FO-ATP Synthase hin. Die ATP Synthase nutzt zur Bildung von ATP den elektrochemischen Gra-dienten über die innere Mitochondrienmembran, an dessen Aufbau der Cy-tochrom bc1-Komplex und die Cytochrom c-Oxidase beteiligt sind. Eine Ein-bindung dieser Enzyme in einen Suprakomplex würde eine koordinierte Re-gulation der oxidativen Phosphorylierung ermöglichen. (5) Zwischen der Untereinheit Sue der F1FO-ATP Synthase und der Unter-einheit Cox2 der Cytochrom c-Oxidase konnte eine enge räumliche Bezie-hung nachgewiesen werden. Diese ist von der Funktionalität der F1FO-ATP Synthase abhängig. Anhand der Ergebnisse der vorliegenden Arbeit konnte somit folgende Erklä-rung für die Funktion der Untereinheit e der mitochondrialen F1FO-ATP Synthase gefunden werden: Sue dient als Dimerisierungsfaktor der F1FO-ATP Synthase. Die Dimerisie-rung von Sue und damit die Dimerisierung der ATP Synthase ist essentiell für die Stabilisierung des Cytochrom bc1-COX-Suprakomplexes und die Funkti-on seiner Komponenten.

A number of studies point at platelet monoamine oxidase (MAO) activity being reduced in alcoholics with a family history of drinking, this being a possible vulnerability marker for alcoholism. To test this hypothesis, we examined a group of recently detoxified alcoholics with high (n = 25) and low genetic loading for alcoholism (n = 28) and a group of healthy controls (n = 21). Clinical assessments were made using the SCID II interview for psychiatric disorders, the Family History Assessment Module and the Semi-Structural Assessment of Genetics in Alcoholism, a questionnaire especially designed for genetic studies. Platelet MAO activity with and without ethanol stimulation and the percentage of MAO activity with ethanol did not differ between groups. The only significant difference was a lower inhibition of MAO activity with ethanol in alcoholics both with and without a family history compared to controls. In patients with antisocial personality traits, platelet MAO activity was also not found to be different from other alcoholics. Our findings question the hypothesis of reduced platelet MAO activity to be a possible vulnerability marker for alcoholism. Copyright (C) 2000 S. Karger AG. Basel.

Tue, 15 Oct 1974 12:00:00 +0100 http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T36-447P02V-2S&_user=616146&_coverDate=10%2F15%2F1974&_rdoc=22&_fmt=high&_orig=browse&_srch=doc-info(%23toc%234938%231974%23999529997%23268635%23FLP%23display%23Volume)&_cdi=4938&_sort=d&_docancho https://epub.ub.uni-muenchen.de/7275/1/Neupert_Walter_7275.pdf Neupert, Walter; Werner, Sigurd; Rücker, Axel von

Three different cell types of Neurospora crassa deficient in cytochrome oxidase were studied: the nuclear mutant cni-1, the cytoplasmic mutant mi-1 and copper-depleted wild-type cells. * 1. The enzyme-deficient cells have retained a functioning mitochondrial protein synthesis. It accounted for 12–16% of the total protein synthesis of the cell. However, the analysis of mitochondrial translation products by gel electrophoresis revealed that different amounts of individual membrane proteins were synthesized. Especially mutant cni-1 produced large amounts of a small molecular weight translation product, which is barely detectable in wild-type. * 2. Mitochondrial preparations of cytochrome-oxidase-deficient cells were examined for precursors of cytochrome oxidase. The presence of polypeptide components of cytochrome oxidase in the mitochondria was established with specific antibodies. On the other hand, no significant amounts of heme a could be extracted. * 3. Radioactively labelled components of cytochrome oxidase were isolated by immunoprecipitation and analysed by gel electrophoresis. All three cell types contained the enzyme components 4–7, which are translated on cytoplasmic ribosomes. The mitochondrially synthesized components 1–3 were present in mi-1 mutant and in copper-depleted wild-type cells. In contrast, components 2 and 3 were not detectable in the nuclear mutant cni-1. Both relative and absolute amounts of these polypeptides in the enzyme-deficient cells were quite different from those in wild-type cells. * 4. The components of cytochrome oxidase found in the enzyme-deficient cells were tightly associated with the mitochondrial membranes. * 5. Processes, which affect and may control the production of enzyme precursors or their assembly to a functional cytochrome oxidase are discussed.

Wed, 1 Jan 1969 12:00:00 +0100 http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T36-447MYVN-2G&_user=616146&_coverDate=06%2F30%2F1969&_rdoc=15&_fmt=high&_orig=browse&_srch=doc-info(%23toc%234938%231969%23999969995%23268413%23FLP%23display%23Volume)&_cdi=4938&_sort=d&_docancho https://epub.ub.uni-muenchen.de/7157/1/Neupert_Walter_7157.pdf Neupert, Walter; Brunner, G.