Podcasts about Titer

Flea Facts and Tick Talk Animal Radio Veterinary Correspondent Dr. Marty Becker is back to help you keep your pets flea-less and tick-less. The good doctor has the ugly truth about how ticks infect you and your pet with a multitude of nasty viruses. And are fleas becoming resistant to spot-on preventatives? Listen Now APPA Releases Pet Spending Figures The American Pet Products Association (APPA) released the yearly numbers of dollars spent within the pet industry. APPA says we spent 58 BILLION in last year on 397 million pets, including everything from freshwater fish and reptiles to cats and dogs. We spend over 20 billion on pet-food alone. No wonder the business is so cutthroat as many compete for our dollars. Listen Now 8 1/2 Year Old Hero Our Hero Person this week lives in Johannesburg, South Africa and she's 8-and-a-half years old. Alyssa Carter parlayed her love for Rhinos into fundraising to keep them from being poached. So far, she has been able to raise $23,000 by selling candy and trinkets to schoolmates and family. Listen Now To Vaccinate Or Not To Vaccinate Dr. Debbie teaches us all about the Titer test. The test determines the amount of antibodies in your pet, and ultimately if it is really necessary to vaccinate. She'll tell you why you should vaccinate and what types of animals should avoid vaccination altogether. Listen Now Amtrak On Track To Become Pet Friendly Amtrak is one step closer to becoming pet friendly. The House of Representatives has approved 8 billion in funding for a pilot program for people traveling with pets. At least one car per train would allow pets in kennels as long as they meet size requirements. The bill now goes to the Senate and then to the White House, where it reportedly is being supported. Listen Now Read more about this week's show.

  This panel discussion was originally published in the eBook “ Monoclonal Antibody Manufacturing Trends, Challenges, and Analytical Solutions to Eliminate Bioprocessing Bottlenecks” You can download all the articles in the series, by downloading the eBook.   Panel discussion members: Carrie Mason - Associate Director, R&D at Lonza Biologics Laura Madia - Independent Industry Consultant Alan Opper – Director of HaLCon Sales at RedShiftBio David Sloan, PhD – Senior Vice President, Life Sciences at RedShiftBio Brandy Sargent, Editor in-chief, Cell Culture Dish and Downstream Column (Moderator) In this panel discussion, we talked with industry experts about antibody process development and manufacturing. Specifically focusing on current antibody titer expectations, analytical challenges and how real time titer measurement is a game changer for bioproduction moving forward. Where is the industry at today with titer expectations and what are the best practices for measuring titer? Laura Madia With respect to expectations regarding titer over the years, what we've seen is a need for increased titer within the upstream development of a drug. As an industry, we have moved from the 80s where titers were closer to .2 to .5 grams per liter to the early 2000s where concentrations of titer production rose to 3 to 5 grams per liter. What we see today is a continued increase in titer concentrations, which creates a challenge to make sure that you have technologies that can accurately measure titer concentration without introducing any errors. The other thing that we have seen within the industry is the need for more data to not only understand what is happening in the tank, but also to be able to make decisions about the product as the process is running or shortly after. Lastly, it is important to consider people and resources. It has been exacerbated by COVID, but it is difficult to find people to work within the industry and there are fewer people within a production suite. This has helped to drive the need for online and remote monitoring and automation to make it easier to get the necessary measurements. David Sloan To follow up on the lack of workers, one of the things that we constantly hear from the customers we are working with is that training employees can be a real challenge and a very time-intensive process. Technologies that are easier to use and require less expertise help get people up and running and minimize errors amongst new users of a technology. Laura Madia As for the current best practices for measuring titer, HPLC is the gold standard. But HPLC presents some challenges including training and HPLC requires a highly skilled person to get accurate results. There is a need for something that is simple and easy to use when it comes to measuring titer. You will still need HPLC results for approval and decisions at the end, but to be able to monitor titer throughout the process is important. What are the challenges associated with the way that titer is measured today and what can we do as an industry to improve? Laura Madia One of the challenges is that most of the assays available today are batch processes, so that lends itself to providing a retrospective look and means that most people don't run samples throughout the process. This is because most people save these tests until the end when they can run a batch and make it more cost effective, and it is typically a long time to result so running it during the process isn't helpful. Systems today are more for batch process and are not set up for at-line measurement, unless you are lucky enough to be able to have an HPLC that's dedicated to that tank. Another challenge is speed and accuracy. Many of the techniques that are offline today are longer assays because they're running as a batch. You must wait for the entire batch, which is a long time to first result.

Titer testing has been around for a couple of decades, but it is now growing in popularity. The test indicates whether a dog has enough anti-bodies to be protected against certain diseases. But the test results can be used for seemingly contradictory purposes. Today on the show, we explore the ins and outs of titer tests, to give you a nuanced perspective on the benefits and risks that come with the current vaccine recommendations. About Dr. Enid Stiles Dr. Stiles is World Vet Association North American counselor and the chair of its Animal Welfare Working Group. She runs the Sherwook Park Animal Hospital in Beaconsfield, Quebec. She is a graduate of the Ontario Veterinary College, and a founding member of Veterinarians without Border Canada. She is passionate about helping animals and their families. https://sherwoodparkvet.com/ About Dr. Laurie Larson Dr. Larson is the director of the Companion Animal Vaccines and Immuno Diagnostic Service Laboratory (CAVIDS) at the University of Wisconsin's School of Veterinary Medicine. She directs the CAVIDS titer testing service which provides vaccinal antibody testing for dogs and cats across the U-S and Canada. Dr. Larson also teaches Veterinary Immunology to second year veterinary students and co-coordinates the Public Health course for third year veterinary students. https://www.vetmed.wisc.edu/lab/cavids/ About Dr. Jacqueline Ruskin Dr. Ruskin is the medical director of the VCA Animal Healing Center in Yardley, Pennsylvania. She fulfilled her childhood dream of becoming a veterinarian in 1998, when she graduated from Cornell University School of Veterinary Medicine. In addition to practicing exceptional conventional medicine, Dr. Ruskin also practices several holistic healing modalities. She learned much of her holistic medicine skills from the famous Dr. Marty Goldstein during a 13-year associateship in his practice. In 2019 Dr. Ruskin was featured in the documentary film “The Dog Doc” and was a contributing author to Dr. Marty Goldstein's latest book, "The Spirit of Animal Healing". https://vcahospitals.com/animal-healing-center About Dog Podcast Network (DPN) DPN is the first of its kind. A podcasting network as devoted to dogs, as they are to us. Our mission is simple: entertain, inspire and inform. We will improve the quality of life for dogs and the people who love them. Check out Dog Podcast Network for other dog-adjacent shows: The Long Leash where we rescue tasty scraps from the editing room floor in an unscripted interview show Dog Cancer Answers which offers vetted advice from real veterinarians who answer your questions about dog cancer Follow us on Facebook, Twitter, Instagram, and YouTube. Learn more about your ad choices. Visit megaphone.fm/adchoices

Intro: In this episode we interview Dr. Karla Williams and Dr. KeAndrea Titer. They are assistant professors of Internal Medicine at The University of Alabama at Birmingham. They are passionate about diversity, equity, and inclusion and both work to design initiatives and curriculum focused on recruitment, education, and building community. This includes the AIRR initiative, which we discuss in the episode. In this episode, we discuss creating a welcoming culture in medicine and working to drive cultural change through seeking to understand others. Welcome to Leading the Rounds. Questions We Asked: What inspired you to develop the Clear the AIRR initiative? What's the difference between a macro and microaggression? How should physicians deal with microaggressions? What does your program look like practically? How can leaders manage microaggressions?How do you create a culture of occupational wellness? What advice do you have for medical leaders? Book suggestions? Quotes & Ideas: Microaggression initiative (AIRR): Assessing, Identifying, Responding and Reporting As a leader, it is important to develop a culture where problems can be discussed openly and solutions can be made. As a trainee, it is important to seek out mentors who will feed into your career aspirations. Diversity and Inclusion programs should highlight mentorship, sponsorship and support “You have not been selected to this program because someone felt sorry for you. You have worked incredibly hard for this.”Occupational Wellness: Being in a career that you enjoy, providing value to those you are serving, and having a space to balance your own self care “You should work to see the best in everyone, but never be afraid to challenge them as well.” -Dr. Williams Enter to Learn, Depart to Serve Don't be afraid to go against the grain and change the culture of medicine. Books: Dr. Williams & Titer suggested reading The Bible as a way to learn leadership 7 Habits of Highly Effective People by Steven Covey 

Univ.-Prof. Dr. Michael Kundi diskutiert mit Univ.-Prof. Dr. Florian Thalhammer über Titer Bestimmung und Booster Optionen der COVID-19 Impfungen. Die Diskussion wurde im Zuge unseres Giftigen Live Streams am 6. April 2022 aufgezeichnet.

In this episode, Cassandra Calabrese, DO, dual-boarded in infectious disease and rheumatology, walks us through when to suspect Bartonella (it's not always a house cat!), how to diagnose and how to treat. Intro :01 Welcome to another exciting episode of Rheuminations :11 About today's episode :17 10th Annual Basic and Clinical Immunology for Busy Clinicians starts 2/26 2:18 A look at upcoming episodes 3:00 Check out Healio's Rheum + Boards – new questions coming soon! 3:15 The interview with Dr. Cassandra Calabrese 4:08 Is there always a cat exposure? 5:19 Are there other animals to look out for? Or other scenarios? 6:15 Endocarditis and Bartonella – consider these when things aren't adding up 7:20 What about Bartonella quintana, do you always treat it? 9:43 It seems Bartonella can be more subtle than other infectious endocarditis, is that true? 10:49 When suspicious, how do we test for Bartonella? 11:57 Titer is important 13:57 How do you treat this? 14:43 What are long-term outcomes like? 16:38 Thank you, Dr. Calabrese 17:35 Warthan-Starry stain 17:54 Thanks for listening 21:24 Cassandra Calabrese, DO, is associate staff in the department of rheumatic and immunologic disease and the department of infectious disease at Cleveland Clinic Foundation. We'd love to hear from you! Send your comments/questions to Dr. Brown at rheuminationspodcast@healio.com. Follow us on Twitter @HRheuminations @AdamJBrownMD @HealioRheum Disclosures: Brown and Calabrese report no relevant financial disclosures. References: Wright JR. Arch Pathol Lab Med. 2021;145:1297-1306.

Dr. Titer, Dr. Williams, Maani and Lindsey discuss macro/microaggressions in the clinical setting. Dr. KeAndrea Titer Dr. KeAndrea Titer is an Assistant Professor in the Division of General Internal Medicine at University of Alabama at Birmingham. She was born and raised in Tampa, Florida. She received her Bachelor of Science in Biology from Oakwood University in Huntsville, Alabama. She went… Read More »Episode 197: WDx #13 – Macro/microaggressions

With all of the new COVID variants popping up, the Docs discuss some of the new developments and CDC recommendations for staying safe.  The number of cases of the Delta Variant of the SARS-CoV-2 virus is ramping up and causing communities and governments to reinstate mask mandates. The Delta Variant is affecting children more than prior variants, causing the Docs to think about the impact it the virus is having on their kids. The Docs discuss who is eligible for booster shots and what that means for those new variants.    - R0/R naught: a mathematical term that indicates how contagious an infectious disease is. It's also referred to as the reproduction number. R naught tells you the average number of people who will contract a contagious disease from one person with that disease. It specifically applies to a population of people who were previously free of infection and haven't been vaccinated. - Titer: the titer test detects the presence of certain antibodies in the blood stream. Testing involves drawing blood from a patient and check it in a lab for presence of bacteria or disease. It is often used to see if someone is immune to a certain virus or needs vaccination. Want to see your favorite Docs at SXSW 2022?? Vote for 3 Black Docs to be panelists HERE. --New Episodes every Tuesday, available wherever you get your podcasts! Rate and Subscribe! Also, join us for our live streams on Facebook and Youtube!Sign Up for our newsletter here or at 3BlackDocs.com Please take a moment to fill out our survey so we can continue to bring you the content you love! Join the Conversation! Follow us on social media!3 Black Docsfacebook.com/3blackdocstwitter.com/3blackdocsinstagram.com/3blackdocsYouTube.com/3blackdocsDr. Karen Winkfieldfacebook.com/drwinkfieldtwitter.com/drwinkfieldinstagram.com/drwinkfieldDr. Zanetta Lamarfacebook.com/drzanettainstagram.com/drzanetta

Introducing low titer O whole blood or LTOWB into blood bank inventory can introduce challenges, including the logistics of maintaining and optimizing inventory and fulfilling regulatory requirements. That said, LTOWB can serve to improve massive transfusion workflow and potentially improve patient outcomes in patients undergoing massive transfusion, explain Julie Katz Karp, MD, FCAP, and Julie Cruz, MD, FCAP, in this CAPcast. Drs. Karp and Cruz are teaching a course on LTOWB at CAP21, which will be held Sept. 25-28: www.capannualmeeting.org.

Einige Frauen bemerken nach einer Impfung mit mRNA-Stoffen Veränderungen bei ihrem Zyklus - was weiß man darüber? Dann: Antikörper-Titer bei 12.000 – kann das sein? Und: Kann eine Impfung auch vor Long Covid schützen?

#034 Titer clinic: Lisa Rosamino is ready to start one now that COVID-19 pressures are letting up for her pet food buying club.She learned about titers from Dr. John Robb and me but wanted to make it easier for her many pet food customers to get that testing done easily and affordably.If your local vet has either refused to do titer testing or made them prohibitively expensive, you’ve got options. Recent reports from listeners that some vets are even refusing to draw blood for you to get a titer done spurred me to explore titer clinics as a viable workaround.Tune in to see what it takes and maybe you can organize a titer clinic in your neighborhood or pet store. I'll bet you could do this!I also review why yearly titers are both unnecessary and potentially dangerous if you don’t fully understand this test's results.For more help on titer testing and further understanding, be sure to visit the show notes for this episode at https://VitalAnimal.com/34

#030 We were taught in vet school that “one size fits all” when it comes to vaccination: a Great Dane and a Chihuahua both get a 1 cc dose of the vaccine. There was some vague explanation that the “antigenic load” was all the mattered, and big animals and small ones needed the same amount of challenging substance injected.This is what a past client was told recently when he asked for a smaller dose of rabies vaccine to be given to his 9 lb dog. His reaction (like mine should have been as a vet student) was “What the H? How does that make any sense at all?”I immediately knew who to interview on this: Dr. John Robb of Protect the Pets, who observed early on in his practice that the smaller the pet, the more likely they were to have a negative reaction to a vaccine. In his work at a Banfield clinic, he also had access to a very large study that showed, in well over a million dogs, that he was far from the only one to observe this.Join me and Dr. Robb as we discuss this reality that most of our profession refuses to come to grips with. We discuss how titers clearly demonstrate that immunity happens in the small pets with a lessened dose. Dr. Robb had to endure the long, lonely torment of his veterinary board for refusing to adhere to a standard dose that he knew would cause harm to his smaller patients.For more information and links, be sure to visit the show notes for this episode at https://VitalAnimal.com/30

Interview with Leah Houser, expert on vaccinations and titers for your pet's optimum health If you do not know what the Titer is, I highly recommend you listen and learn how to keep your precious pet from being over vaccinated. Your pet will thank you. --- Support this podcast: https://anchor.fm/vicki-draper9/support

#016 In this interview, I’m the guest and I’m being interviewed on homeopath Julie Anne Lee’s Adored Beast show. Tune in to learn how you can use titers wisely and save both money and your pet’s health when you know this stuff.Titers seem simple enough on the surface: they are measures of antibodies your animal has made to a germ of some sort, usually a virus.But what are the limits of titer testing?Does your vet read titers properly? Do breeders understand the difference between vaccination and immunization?13:00 What value does a titer have? Less vaccines? And why would you want to limit vaccines?If a vaccine label says “Repeat annually” what does that really mean? Is annual titer testing a better path or a waste?What’s DOI? How is that important?16:15 What are the limits of titer testing? When the titer falls, is your animal really no longer immune? 22:53 How likely are puppyhood illnesses going to hurt a senior? Is revaccinating your senior more risk than benefit?All this and more is answered in this episode to help you be a wise guardian for those innocent animals in your care, what ever species they are.For more help and links, be sure to see the show notes for this episode at https://VitalAnimal.com/16

S. Heon Lee - Correlation Between Serological Titer And Protection In Pigs Vaccinated by European Commission for the Control of FMD

Lockdown life be Shooting a Christmas Video.   This episode we just chat. 

Mr Castleton from the Armed Forces Blood program discusses how to do it. This is mission critical for PJ Teams and you should insatiate this now. The ability to have a walking blood bank with universal donors is game changing on the ground. THAT OTHERS MAY LIVE

#004 Dr. John Robb joins me and shares a lot of helpful knowledge on titers in pets. He’d like to see titers accepted widely by all licensing authorities as a means of preventing over-vaccination.Listen in as Dr. Robb shares these gems with us:02:34 “The titer tells us the pet has already achieved immunity. So there’s no benefit from the vaccine…you’re injecting something that can only harm, with no benefit. That’s malpractice, in my opinion.”04:34: “I don’t really agree with the numbers game, because the lowest titer is the same immunity as the highest titer.”05:06: “Dr. Schultz (Univ of Wis immunologist, Dr. Ron Schultz) said it best, ‘It should be a yes or no answer.’ …If your pet has any measurable antibodies…it’s a pregnancy test, you are or you are not (immune), period.”17:32: “One state requires a titer: Hawaii. Because they know the vaccine certificate doesn’t tell you that the dog is immune. And since they don’t have rabies in Hawaii, you can’t get in there without a titer.…when it becomes real, like ‘we don’t want to have rabies here,’ you better have a titer to prove your pet’s immune.”At Dr. Robb’s website, ProtectThePets.com, you’ll learn how you can save money on titer testing and get his official “Immune Certificate” for your animal. Also there are petitions to help you get your state’s legislatures to change their out of date rabies laws and letters you can use to write individual law makers.Be sure to see the show notes for links and resources from this episode.

TITER or put FAUCI in jail

Welcome to another episode of Scrabble Dabble Doo! Hope you are staying safe and well hydrated in these loopy times we are living in. Only three more episodes before the end of our first season! The U,V,W,X,Y,Z show will probably come first, then the uncommon "S" show. We'll take a bit of time off and come back and attack the uncommon 6 letter words next season. TACAN TAFIA TANGA TARGA TANKA TAKAS, KATAS TAMAL ALTAR, RATAL, TALAR, ARTAL TATAR, ATTAR TAYRA TABID TABES, ABETS, BETAS, BATES. BASTE. BEATS TUBAE, BEAUT TABUN TSUBA, ABUTS, TABUS, TUBAS TACHE, TEACH, THECA, CHEAT TECTA, TACET TRIAC ACTOR, TAROC TARED, RATED, DERAT, DATER TRADE, TREAD TSADE, DATES, STADE, STEAD, SATED TSADI, DITAS, ADITS, STAID TARDO TELAE, ELATE TEGUA TELIA TINEA, ENTIA, TENIA TERAI, IRATE, RETIA PLATE, TEPAL, PLEAT, LEPTA, LEAPT, PALET, PETAL TALER, ALERT, ARTEL, LATER, RATEL TEPAS, PASTE, PATES, PEATS, SEPTA, SPATE, TAPES TARRE, RATER, TERRA TASSE, SEATS, EASTS, SATES, ASSET TAWSE, SWEAT, TWAES, WASTE, WETAS TRAYF GREAT, TARGE, GRATE, GATER, RETAG, TERGA TRAGI THALI, LAITH, LATHI THARM TAHRS, HARTS, TRASH THRAW, WRATH THUJA THUYA TAKIN TAIKO TAMIS,MAIST TAPIS, PITAS, SPAIT TAROK, KORAT, TROAK TALUK TAXOL TYPAL,PLATY, PATLY, APTLY TALUS, SAULT TRYMA TRONA TANTO TARNS, TRANS, RANTS TAUON TASSO, OASTS, STOAS TAXUS TSUBO, BOUTS TENCH TEUCH, CHUTE TELIC |TITCH TINCT STOCK, TOCKS TOCOS, SCOOT, COOTS TEIND, TINED TENDU, TUNED TREYF TUMID TONDI TONDO TOPEE TYEES TUTEE THEGN TOGUE TEGUS, GUEST THOLE, HELOT, HOTEL TOPHE THESP TYTHE THEWY TELOI, TOILE TUILE, UTILE TEMPI TEINS, TINES, INSET, NEIST, NITES, SENTI, STEIN TETRI, TITER, TITRE, TRITE TWIER, WRITE TROKE, TOKER TRONE, TENOR, NOTER, TONER TEPOY TYPEY TUYER TWYER TEUGH TIGON, INGOT GRIOT, TRIGO TRUGS TILTH THYMI TOPHI THRIP THYMY THORO, ORTHO THORP TROTH THOUS, SHOUT, SOUTH TIYIN TRIOL, LIROT TULSITIYNS TYIYN TOPOI TOPIS, POSIT TORSI, ROSTI, ROTIS, TIROS, TRIOS, TROIS TUPIK STORK, SKORT, TORSK TUSKY TOLYL TRULL TOLUS, LOTUS, LOUTS TOLTS TOYON TONUS, SNOUT TOPOS, STOOPTOROT

They smell good, feel soft and clean, and just exude energy. A bounce in their step, they are ready to play, run, climb and swim, but can also be content in the quiet moments of your life. Let alone being free of illness, these guys just shine. Eyes bright and clear, teeth gleaming, light dancing off their coats, they are balanced in their every move, a joy to be around. If you want animals like this, who share long years of vital life with you, you’ve come to the right place. Dr. Falconer will guide you, if you’re willing to step off the beaten path with open eyes and a bold heart. Your animals are counting on your choices to thrive. Dr. Falconer was once a conventional veterinarian. Here’s what he’s learned: MOST “PREVENTION” ACTUALLY CAUSES ILLNESS. Sad and expensive results for animals, which may be avoided entirely. He knows that old path and can guide you safely beyond it. Until Midnight, June 2. To get the “Graduation Sale” on Dr. Falconer’s best package of the drug free heartworm protocol ($40 off, but only till midnight), you can go to VitalAnimal.com/patrick https://vitalanimal.com/ Show highlights: Titer testing your animals to determine immunity before vaccinating Side effects from rabies vaccine; minimizing ill effects of rabies vaccines The toxicity of heartworm medicine The best age to spay and neuter animals Is a raw food that follows the 80/10/10 or whole prey model method an ideal food for a dog or cat to eat? Most shelters will vaccinate. What is the best recommendation going forward after the shelter has vaccinated the animal? Should we be concerned about tick bites on dogs? Questions from a listener: 1) Does it reduce efficacy if 2 or 3 homeopathic medications are given simultaneously, then a small treat afterwards? 2) Do tinctures like CBD Oil work similarly, ie may it be given at the same time as 1 or 2 homeopathic drops? 3) Do you recommend milk thistle for detoxification, and how much how often for a medium sized dog? Question from a listener: What remedy/posology to ease and root out constant licking of all 4 paws (most of the hair has been licked off) in this unprecedented wet spring resulting in longer grass (chemical free) . 11 yr old terrier has not been inoculated w/any vaccines since adoption 2 yrs ago Can anything be done for a dog that has had high post acid bile results? Dealing with fleas and ticks naturally

Covid 19 antibody

"TITER" needed or the federal government is neglecting Americans

Danielle from Canine Inspired Change is still in studio. Topics include: IMT disease and vaccines, Titer test, Natural Pet Expo, a hygroma on a dog and more from Canine Inspired Change.

When you bring that soft, sweet-smelling little ball of a puppy into your home, you know right away that she depends on you for, well, everything. It’s up to you to give her all the care she needs every day. It can be a little intimidating — she needs the best puppy food, plenty of attention, gentle training, safe toys, puppy socialization, a comfortable home, and proper veterinary care. And that includes puppy shots throughout her first year. Which Vaccinations Do Puppies Need? Going to the vet repeatedly over several months for vaccinations, and then for boosters or titers throughout your dog’s life, may seem like an inconvenience, but the diseases that vaccinations will shield our pets from are dangerous, potentially deadly, and, thankfully, mostly preventable. We read about so many different vaccinations, for so many different illnesses, that it can sometimes be confusing to know which vaccinations puppies need and which ones are important but optional. Here is an overview of the diseases that vaccinations will help your pet to avoid. Bordetella Bronchiseptica This highly infectious bacterium causes severe fits of coughing, whooping, vomiting, and, in rare cases, seizures and death. It is the primary cause of kennel cough. There are injectable and nasal spray vaccines available. Canine Distemper A severe and contagious disease caused by a virus that attacks the respiratory, gastrointestinal (GI), and nervous systems of dogs, raccoons, skunks, and other animals, distemper spreads through airborne exposure (through sneezing or coughing) from an infected animal. The virus can also be transmitted by shared food and water bowls and equipment. It causes discharges from the eyes and nose, fever, coughing, vomiting, diarrhea, seizures, twitching, paralysis, and, often, death. This disease used to be known as “hard pad” because it causes the footpad to thicken and harden. There is no cure for distemper. Treatment consists of supportive care and efforts to prevent secondary infections, control symptoms of vomiting, seizures and more. If the animal survives the symptoms, it is hoped that the dog’s immune system will have a chance to fight it off. Infected dogs can shed the virus for months. Canine Hepatitis Infectious canine hepatitis is a highly contagious viral infection that affects the liver, kidneys, spleen, lungs, and the eyes of the affected dog. This disease of the liver is caused by a virus that is unrelated to the human form of hepatitis. Symptoms range from a slight fever and congestion of the mucous membranes to vomiting, jaundice, stomach enlargement, and pain around the liver. Many dogs can overcome the mild form of the disease, but the severe form can kill. There is no cure, but doctors can treat the symptoms. Canine Parainfluenza One of several viruses that can contribute to kennel cough. Corona Virus It is a virus that usually affects dogs’ gastrointestinal systems, though it can also cause respiratory infections. Signs include most GI symptoms, including loss of appetite, vomiting, and diarrhea. Doctors can keep a dog hydrated, warm, and comfortable, and help alleviate nausea, but no drug kills coronaviruses. Heartworm When your puppy is around 12-to-16 weeks, talk to your vet about starting her on a heartworm preventive. Though there is no vaccine for this condition, it is preventable with regular medication. The name is descriptive — these worms lodge in the right side of the heart and the pulmonary arteries (that send blood to the lungs), though they can travel through the rest of the body and sometimes invade the liver and kidneys. The worms can grow to 14 inches long and, if clumped together, block and injure organs. A new infection often causes no symptoms, though dogs in later stages of the disease may cough, become lethargic, lose their appetite or have difficulty breathing. Infected dogs may tire after mild exercise. Unlike most of the conditions listed here, which are passed by urine, feces, and other body fluids, heartworms are transmitted by mosquitoes. Therefore, diagnosis is made via a blood test and not a fecal exam. The FDA has more information about heartworm. Kennel Cough Also known as infectious tracheobronchitis, kennel cough results from inflammation of the upper airways. It can be caused by bacterial, viral, or other infections, such as Bordetella and canine parainfluenza, and often involves multiple infections simultaneously. Usually, the disease is mild, causing bouts of harsh, dry coughing; sometimes it’s severe enough to spur retching and gagging, along with a loss of appetite. In rare cases, it can be deadly. It is easily spread between dogs kept close together, which is why it passes quickly through kennels. Antibiotics are usually not necessary, except in severe, chronic cases. Cough suppressants can make a dog more comfortable. Leptospirosis Unlike most diseases on this list, Leptospirosis is caused by bacteria, and some dogs may show no symptoms at all. Leptospirosis can be found worldwide in soil and water. It is a zoonotic disease, meaning that it can be spread from animals to people. When symptoms do appear, they can include fever, vomiting, abdominal pain, diarrhea, loss of appetite, severe weakness and lethargy, stiffness, jaundice, muscle pain, infertility, kidney failure (with or without liver failure). Antibiotics are effective, and the sooner they are given, the better. Lyme Disease Unlike the famous “bull’s-eye” rash that people exposed to Lyme disease often spot, no such telltale symptom occurs in dogs. Lyme disease (or borreliosis) is an infectious, tick-borne disease caused by a type of bacteria called a spirochete. Transmitted via ticks, an infected dog often starts limping, his lymph nodes swell, his temperature rises, and he stops eating. The disease can affect his heart, kidney, and joints, among other things, or lead to neurological disorders if left untreated. If diagnosed quickly, a course of antibiotics is extremely helpful, though relapses can occur months or even years later. Parvovirus Parvo is a highly contagious virus that affects all dogs, but unvaccinated dogs and puppies less than four months of age are at the most risk to contract it. The virus attacks the gastrointestinal system and creates a loss of appetite, vomiting, fever, and often severe, bloody diarrhea. Extreme dehydration can come on rapidly and kill a dog within 48-to-72 hours, so prompt veterinary attention is crucial. There is no cure, so keeping the dog hydrated and controlling the secondary symptoms can keep him going until his immune system beats the illness. Rabies Rabies is a viral disease of mammals that invades the central nervous system, causing headache, anxiety, hallucinations, excessive drooling, fear of water, paralysis, and death. It is most often transmitted through the bite of a rabid animal. Treatment within hours of infection is essential, otherwise, death is highly likely. Most states require a rabies vaccination. Check with your vet about rabies vaccination laws in your area. Of course, your veterinarian should weigh in and can always provide more information and guidance if needed on necessary and optional vaccinations. Puppy Vaccination Schedule The first thing to know is that there is not just one puppy vaccination schedule for all dogs. Factors such as which part of the country you live in, and your dog’s individual risk factors will come into play. Some dogs do not need every vaccine. This decision is between you and your veterinarian. Always discuss puppy vaccinations at your regularly scheduled appointments. That said, here is a generally accepted guideline of the puppy vaccination schedule for the first year. Puppy’s Age Recommended Vaccinations Optional Vaccinations 6 — 8 weeks Distemper, parainfluenza Bordetella 10 — 12 weeks DHPP (vaccines for distemper, adenovirus [hepatitis], parainfluenza, and parvovirus) Coronavirus, Leptospirosis, Bordetella, Lyme disease 12 — 24 weeks Rabies none 14 — 16 weeks DHPP Coronavirus, Lyme disease, Leptospirosis 12 — 16 months Rabies, DHPP Coronavirus, Leptospirosis, Bordetella, Lyme disease Every 1 — 2 years DHPP Coronavirus, Leptospirosis, Bordetella, Lyme disease Every 1 — 3 years Rabies (as required by law) none Puppy Vaccinations Cost How much vaccinations for your puppy will cost depends on several factors. Where you live is one: Veterinarians in crowded and expensive urban areas will charge more than a rural vet in a small town. In other words, there are significant differences in price. But no matter what the range in costs, some vaccines, such as the “core vaccines,” and for rabies, are necessary. Vet Info has a helpful guide for the approximate cost of puppy vaccinations for her first year. The average cost will be around $75—100. These will include the core vaccines, which are administered in a series of three: at 6-, 12-, and 16 weeks old. The core vaccines include the DHLPP (distemper, hepatitis, leptospirosis, parvo, and parainfluenza). Your pup will also need a rabies vaccination, which is usually around $15—20. (Some clinics include the cost of the rabies vaccination.) Often animal shelters charge less for vaccines — approximately $20 — or are even free. If you acquired your dog from a shelter, he would most likely have been vaccinated, up until the age when you got him. The initial puppy vaccination costs during the first year are higher than during adulthood. Vaccinations After Puppyhood: Boosters and Titers There is a difference of opinion about having your adult dog vaccinated every year. Some vets believe too many vaccinations in adult dogs pose health risks. But others disagree, saying that yearly vaccinations will prevent dangerous diseases such as distemper. Many dog owners opt for titer tests before they administer annual vaccinations. Titer tests measure a dog’s immunity levels, and this can determine which, if any, vaccinations are necessary. Please note that a titer test is not an option when it comes to the rabies vaccine. These are required by law (see above). Your vet can tell you the schedule for your particular state. And it’s all worth it. For your effort and care your puppy will lavish you with lifelong love in return. This critical first year of her life is a fun and exciting time for both of you. As she grows physically, the wonderful bond between you will grow, too.      

I did 2 talks at MOAB. I reviewed how PJ PFC training has evolved and a philosophy for training, as well as validation and experience;  expansion for all Teams to do O Low Titer testing, experience with Telemedicine Consultation (telecon), and important clinical training opportunities.   Please ask friends and family support the Pararescue Foundation this holiday season. Its a great gift idea for them to make a contribution in your honor, or you for them!

Special guest Kathy Kornack talks titer testing for your pets.

On this episode we talk with Doctor of Nursing Education, Brent Thompson. We discuss his time as a flight nurse for the Air National Guard, his method of teaching nursing students (and everyone else for that matter), how to think critically in a world of constant misinformation, and why you would never want to see a T.V. show about nurses. If you liked this episode and you want to hear more, go to MaximumMediocrity.comSOCIAL MEDIA STUFFinstagramFacebookTwitter

Dr. Levy is in the studio with us!! We discuss events coming up. Topics include: vaccinations, cat kidney disease, anaplasmosis in a dog, a cat that continues to scratch and a cat that is acting like he has hairballs.

Is titre testing dogs one of the true alternatives to dog vaccination, especially for those concerned about vaccination side effects in dogs? Can it really predict immunity and save your dog from needless vaccination? Show notes: https://youtu.be/2L7yKk4bshA

LIVE from Roseville Chuck and Don's!! Dr. Jessica Levy, DVM-Holistic Vet joins the show. Topics include: puppy potty training, when should puppy get first exam, Titer tests and rabies vaccines.

In this podcast, we interviewed Dr. Adam Elhofy, Ph.D., Chief Scientific Officer, Bio-Ess, about the relationship between antibody titer and product quality attributes such as glycosylation. Dr. Elhofy shares his thoughts on both challenges and opportunities for optimizing both high titer and glycosylation profiles.  View show notes at cellculturedish.com/sacrifice-antibody-titer-quality-employing-cell-biology-get-best-worlds/

Dr. Adam Elhofy, Ph.D., CSO, Essential Pharmaceuticals, talks about cell culture media optimization. We discussed the evolution of cell culture media optimization, current goals, and the latest strategies and tools being used.

In this podcast, we interviewed Dr. Adam Elhofy, Ph.D., CSO, Essential Pharmaceuticals, about cell culture media optimization. We discussed the evolution of cell culture media optimization, current goals, and the latest strategies and tools being used. View the show notes at The Cell Culture Dish. View the show notes at cellculturedish.com/003-cell-culture-media-optimization-its-about-more-than-just-high-protein-titer/

Dr. Stephen C. Marini was educated in basic science and medicine at Hahnemann Medical College in Philadelphia where he received a M.S. in Microbiology and Immunology in 1976.  Doctoral studies followed at the University of Pennsylvania and Pacific Western University with dissertation research on avian tumor viruses accomplished at the Wistar Institute in Philadelphia.  He received his Ph.D. in Microbiology in 1989.  Vitalistic training and professional development occurred at the Pennsylvania College of Chiropractic where he received his D.C. in 1988.  He served as professor of Microbiology at the Pennsylvania College of Chiropractic from 1980-1995 and as Academic Dean from 1990-1993.   As a vitalist trained in classical science and conventional medicine, Dr. Marini appreciates the role of energy/information on an individual's health and healing process.  He recognizes the need for a complementary, patient-centered approach to healing and health care options.  Dr. Steve incorporates this knowledge and belief into his teaching of psychoneuroimmunology and vaccination issues.   Dr. Marini serves on the Boards of the International Chiropractic Pediatric Association (ICPA), the Holistic Pediatric Association (HPA), and the Integrated Healthcare Policy Consortium (IHPC).  For more information, please visit his website at www.marinichiroanded.com.  

Flea Facts and Tick Talk Animal Radio Veterinary Correspondent Dr. Marty Becker is back to help you keep your pets flea-less and tick-less. The good doctor has the ugly truth about how ticks infect you and your pet with a multitude of nasty viruses. And are fleas becoming resistant to spot-on preventatives? APPA Releases Pet Spending Figures The American Pet Products Association (APPA) released the yearly numbers of dollars spent within the pet industry. APPA says we spent 58 BILLION in last year on 397 million pets, including everything from freshwater fish and reptiles to cats and dogs. We spend over 20 billion on pet-food alone. No wonder the business is so cutthroat as many compete for our dollars. 8 1/2 Year Old Hero Our Hero Person this week lives in Johannesburg, South Africa and she's 8-and-a-half years old. Alyssa Carter parlayed her love for Rhinos into fundraising to keep them from being poached. So far, she has been able to raise $23,000 by selling candy and trinkets to schoolmates and family. To Vaccinate Or Not To Vaccinate Dr. Debbie teaches us all about the Titer test. The test determines the amount of antibodies in your pet, and ultimately if it is really necessary to vaccinate. She'll tell you why you should vaccinate and what types of animals should avoid vaccination altogether. Amtrak On Track To Become Pet Friendly Amtrak is one step closer to becoming pet friendly. The House of Representatives has approved 8 billion in funding for a pilot program for people traveling with pets. At least one car per train would allow pets in kennels as long as they meet size requirements. The bill now goes to the Senate and then to the White House, where it reportedly is being supported. More this week

Cronobacter spp. sind opportunistische pathogene Erreger, die insbesondere nach der Aufnahme kontaminierter Lebensmittel schwere Infektionen mit hohen Letalitätsraten bei Neugeborenen und immungeschwächten Erwachsenen hervorrufen können. Um spezifische immunchemische Nachweisverfahren für diese Keimgruppe zu etablieren, wurden in der vorliegenden Arbeit monoklonale Antikörper (mAK) zum Nachweis von Cronobacter spp. generiert und umfassend charakterisiert. Zur Präparation der Immunogene wurden Cronobacter-Keime mit Polymyxin B behandelt und anschließend wurden Mäuse entweder mit dem durch Zentrifugation erhaltenem Zellpellet (Ghosts) oder mit dem zellfreien Überstand (Lysat) dieser Präparationen immunisiert. Beide Präparationen erwiesen sich als hoch immunogen, die nachweisbaren Titer lagen üblicherweise bei > 1:10.000. Insgesamt konnten 14 stabile Hybridomzelllinien (sieben je Ansatz) etabliert werden. Die Intra- bzw. Inter-Genus-Spezifität und Affinität der entsprechenden mAK wurde umfassend unter Verwendung von indirekten EIA-Verfahren überprüft. Für Studien zur Epitopspezifität der generierten mAK wurden Immunoblots und Immunfluoreszenz-Analysen eingesetzt. Alle mAK, die aus der Immunisierung mit Cronobacter-Ghosts resultierten, zeichneten sich durch ein sehr breites Reaktionsspektrum aus, Kreuzreaktionen wurden vorzugsweise mit Vertretern aus der Familie der Enterobacteriaceae aber auch mit anderen gramnegativen Keimen beobachtet. Für alle mAK konnten Proteine als antigene Determinanten identifiziert werden, die relativen Molekulargewichte reaktiver Proteinbanden lagen üblicherweise im Bereich von > 40 kDa. Demgegenüber zeigten sechs der sieben mAK, die aus der Immunisierung von Mäusen mit Polymyxin B generierten Lysat-Präparationen resultierten, eine hohe Affinität für die O-spezifische Seitenkette der Cronobacter-typischen Lipopolysaccharide (LPS): mAK 2G4 αL reagierte hochspezifisch mit dem C. turicensis-Stamm (MHI 21026; Serotyp O1). Im indirekten EIA war dieser Erreger bei Keimzahlen von ca. 104 KbE/ml noch nachweisbar. Für die weiteren fünf mAK, die alle spezifisch mit C. sakazakii des Serotyps O1 reagierten, wurden im indirekten EIA Nachweisgrenzen im Bereich von 105-107 KbE/ml ermittelt. Alle mAK gegen LPS gehören zum IgG-Subtyp und reagierten in der Immunfluoreszenz mit lebenden Cronobacter-Keimen.

Among the discussed risk factors for high-titre inhibitor (HRI) development in patients with hemophilia A(HA) are high dose FVIII replacement therapy and use of recombinant FVIII concentrates (rFVIII). The aim of this study was to evaluate the aforementioned risk factors for HRI development in children with hemophilia A

Über einen Zeitraum von 1,5 Jahren wurden von 1013 Schaf-, 503 Ziegen- und 555 Rindern Blutproben aus 100 bayerischen Betrieben gezogen und auf das Vorhandensein von Pestivirus-Antikörpern bzw. BVDV/ BDV untersucht. Zum Antikörpernachweis wurden kommerziell erhältliche ELISAs verwandt: Ein indirekter ELISA (Svanovir BDV-Ab-ELISA, Svanova) und ein Blocking-ELISA (Priocheck BVDV-Ab-ELISA, Prionics) für Seren kleiner Wiederkäuer und ein weiterer indirekter ELISA (Svanovir BVDV-Ab-ELISA, Svanova) für Rinderseren. Weiterhin wurden 325 Pestivirus-Isolate aus bayerischen Rindern mittels Multiplex real time RT-PCR (Cador BVDV Type 1 / 2 BDV RT-PCR, Qiagen) typisiert. Die Einzeltierprävalenz betrug bei Schafen 8,2% und bei Ziegen 1,2%. Bezogen auf 91 schafhaltende Betriebe lag die Prävalenz bei 12,0%, in einem von 17 Betrieben wurden Pestivirusantikörper bei Ziegen gefunden. Mit Kreuzneutralisationstesten wurden die Antikörper typisiert: Bei den Schafseren waren 24,1% BVDV-1-, 1,2% BVDV-2-, 4,8% BVDV-1- oder 2- und 48,2% BDV-spezifisch. Die BDV-spezifischen Seren stammten alle aus einem Betrieb. Die verbleibenden 21,7% konnten wegen nur geringer Titerunterschiede zu den SNT-Stämmen nicht typisiert werden. Alle sechs Ziegenseren stammten aus einer Herde, sie wiesen jeweils den höchsten Titer gegen BVDV-2 auf, in zwei Fällen mit einem mehr als vierfachen Abstand zu BVDV-1 und BDV. Eine signifikant höhere Anzahl an seropositiven kleinen Wiederkäuern (p= 0,003) stammte aus Betrieben mit Rinderhaltung. BVDV-Infektionen von Rindern zu kleinen Wiederkäuern wurden beobachtet, wohingegen keine Hinweise für die Übertragung von Pestiviren von kleinen Wiederkäuern zu Rindern oder für die Persistenz von BVDV in kleinen Wiederkäuern vorhanden waren. Die Genotypisierung der 325 Pestivirus-Isolate aus Rindern lieferte folgendes Ergebnis: 91,4% erwiesen sich als BVDV-1 und 8,6% als BVDV-2, BDV wurde nicht gefunden. Anhand von 128 Schafseren mit neutralisierenden Antikörpern wurden Sensitivitäten von 81% für den indirekten ELISA und 94% für den Blocking-ELISA bestimmt. Die Spezifitäten lagen jeweils bei 93% and 100% (N=200 SNT-negative Seren).

Persistent infizierte (PI) Tiere stellen die wichtigste Transmissionsquelle für BVDV-Infektionen dar. Neuere Studien konnten zeigen, dass sich der Virusnachweis aus Ohrgewebeproben für die sichere und frühzeitige Detektion von neugeborenen PI-Kälbern eignet. Inwieweit transiente Infektionen mit dieser Methode erkannt werden, ist bisher nicht bekannt. Ziel dieser Arbeit war es, die transiente BVDV-Infektion mit Hautgewebeproben zu untersuchen. Im Rahmen eines Tierversuches wurden sechs Kälber intranasal mit BVDV inokuliert. Bei fünf Tieren konnte in der Folge eine transiente Infektion beobachtet werden, deren Verlauf mit verschiedenen Diagnostikmethoden untersucht wurde. Der BVDV-Nachweis gelang mittels Virusisolierung, Erns-Antigen-ELISA und real time RT-PCR in Blutleukozyten, Plasma sowie Nasen- und Speichelsekreten. Die höchste Sensitivität zeigte dabei der RNA-Nachweis mittels PCR. Eine Serokonversion konnte zwischen Tag 17 und 21 nach der Virusinokulation durch Antikörper-ELISA nachgewiesen werden. Bei der Untersuchung von Hautgewebeproben (Tag 2, 4, 7, 10, 14, 17, 21 p. inf.) konnten nur bei einem Kalb zwischen 2. und 17. Tag p. inf. geringe Mengen Virus-RNA (maximal 4000 RNA-Kopien/Probe an Tag 14 p. inf.) detektiert werden. Aus lysierten Hautproben konnte bei keinem Tier Erns-Antigen nachgewiesen werden. Des Weiteren wurden Daten von transient infizierten Rindern aus dem Bayerischen Feldprojekt „Studie zur Eignung der Ohrstanzmethode bei neugeborenen Kälbern zur Bekämpfung der BVD/MD“ näher betrachtet. Bei 22 Tieren ließ sich BVDV mittels PCR sowohl im Ohrgewebe (Ct-Werte zwischen 28 und 39) als auch im Blut nachweisen. Die Ohrstanze von drei dieser Tiere war mit dem Erns-ELISA schwach positiv (OD 0,4 bis 0,5), bei vier Tieren konnten deutlich positive (OD >1,1) Ergebnisse beobachtet werden. Darunter waren auch Kälber, deren Muttertiere in der Spätgravidität mit einer Lebendvakzine geimpft wurden. Auffallend waren weiterhin sechs Tiere, die eine sehr lange Virämie (bis zu 99 Tage p. p.) zeigten. Bei einer weiteren Gruppe (elf Tiere) konnte das Virus nur im Ohrgewebe mit PCR (Ct-Werte zwischen 31 und 35) nachgewiesen werden. Diese Kälber wurden in Herden geboren, in denen später mehrere PI-Tiere geboren wurden. Ein Tier aus der Feldstudie zeigte über ein Jahr hinweg abfallende Virusmengen mittels Virusisolierung, real time PCR und Erns-ELISA in Hautbiopsien, Blutproben und Sekreten. Im Alter von zehn Lebensmonaten konnten mittels PCR im Hodengewebe große Mengen an Virus-RNA (Ct-Wert 21) detektiert werden. Das Virus war aus nur 20 Hodenzellen isolierbar, gleichzeitig erwiesen sich Sekrete und Blut als nicht infektiös in der Zellkultur. Im 14. Lebensmonat gelang nur noch der Nachweis der Virus-RNA in der Haut. Weiterhin konnte ein starker Anstieg homologer neutralisierender Antikörper gegen das persistierende Virus bis zum Titer von 25600 gemessen werden. Insgesamt ist festzustellen, dass transiente fetale und postnatale BVDV Infektionen mittels Hautbiopsien bei jungen Kälbern vereinzelt nachweisbar sind. Die PCR war hierbei deutlich sensitiver als der BVDV-Erns-Antigennachweis. Bei Neuinfektionen in Herden werden transient infizierte Kälber bereits vor den persistent infizierten geboren. Auch nach der Vakzination mit BVDV-Lebendimpfstoff sind transiente Infektionen mittels Untersuchung von Hautbioptaten nachweisbar. Erstmals konnte die fetale Infektion eines männlichen Rindes im Feld mit folgender partieller Immuntoleranz charakterisiert werden, bei dem eine Viruselimination im Blut und auf den Schleimhäuten erfolgte, nicht jedoch im Hodengewebe.

Hintergrund Humane mesenchymale Stammzellen sind ein viel versprechendes Ziel für die ex vivo Gentherapie, und Lentiviren sind exzellente Vehikel für den Gentransfer in hMSCs, da sie hohe Transduktionsfrequenzen mit langfristiger Genexpression erreichen. Dennoch könnte die Seneszenz von hMSCs die therapeutische Anwendung, infolge von zeitaufwendiger Zellselektion und Virus Titration, limitieren. Diese Arbeit beschreibt optimierte Protokolle für hoch effizienten ex vivo lentiviralen Gentransfer in hMSCs und eine schnelle und verlässliche Methode, um den funktionellen lentiviralen Titer mittels quantitativer Polymerase-Kettenreaktion (qPCR) zu bestimmen. Methoden EGFP wurde als Markergen/-protein verwendet, um verschiedene lentivirale Expressionsvektoren herzustellen. Die Produktion von Lentiviren wurde mit verschiedenen Verpackungssystemen getestet. Der Prozentsatz transduzierter Zellen wurde durch Polybrene und Blasticidinselektion erhöht. hMSCs von verschiedenen Spendern wurden mittels PCR und Western Blot analysiert. Regulierte Genexpression wurde durch Herstellung eines Tet-On selbstregulierten Expressionsvektors erreicht. Mit einem p24 ELISA-Test wurden übrig gebliebene virale Partikel im Zellkulturüberstand detektiert. Die Effizienz des lentiviralen Gentransfers wurde mittels Fluoreszenz-Mikroskopie beobachtet und mittels qRT-PCR und FACS-Analyse quantifiziert. Die lentiviralen Titer wurden mit qRT-PCR der exprimierten Transgene bestimmt. Die hMSC Differenzierung wurde histologisch untersucht. Ergebnisse Selbstinaktivierende lentivirale Vektoren der dritten Generation zeigten hoch effizienten Gentransfer in hMSCs bei der Verwendung von Polybrene. Die Blasticidinselektion hat den Prozentsatz der transgenen Zellen weiter erhöht unter Selektion von Zellen die mehrere Transgenkopien tragen. Die positiven Effekte von Polybrene und der Blasticidinselektion sind nicht von hMSCs eines speziellen Spenders abhängig. Präzise Regulation der Genexpression wurde durch Herstellung eines selbstregulierten Tet-On-Expressionssystems erreicht. Keine viralen Antigene wurden im Zellkulturüberstand nach aufeinander folgenden Medienwechseln detektiert, was auf die Abwesenheit von infektiösen Partikeln nach einigen Tagen hindeutet. In dieser Arbeit wurde ein starker linearer Zusammenhang zwischen der Virusverdünnung und der Stärke der Transgenexpression mittels qPCR Analysen beobachtet, wodurch die Virustitration durch Quantifizierung der Transgenexpression ermöglicht wird. Abschließend wurde durch Differenzierung in die adipogene, osteogene und chondrogene Richtung gezeigt, dass transduzierte hMSCs ihren Stammzellcharakter beibehalten haben und dass die Transgenexpression durch die Differenzierung nicht beeinflusst wurde. Schlussfolgerungen Die Quantifizierung der Transgen-Kopienanzahl durch qRT-PCR ist eine schnelle und verlässliche Methode, um den funktionellen lentiviralen Titer nach dem ex vivo Gentransfer in hMSCs zu bestimmen. Die in dieser Arbeit optimierte und charakterisierte Methode für die effiziente lentivirale Transduktion von humanen mesenchymalen Stammzellen, in Verbindung mit regulierbarer Transgenexpression, ist ein sicheres, verlässliches und leistungsstarkes Verfahren und bildet eine aussichtsreiche Grundlage für zukünftige Gentherapie und Tissue Engineering Anwendungen in hMSCs.

Zur Bekämpfung von genetisch bedingten Krankheiten werden oft Medikamente eingesetzt, die nur die Symptome bekämpfen, ohne aber die Ursache des Leidens zu eliminieren. Mit Hilfe der Gentherapie, so die Hoffnung, soll der Krankheits-verursachende Gendefekt durch therapeutische Fremdgene geheilt werden. In dieser Arbeit wurde eine auf EBV basierte Verpackungszellinie zur Herstellung von Genvektoren etabliert, welche unter Berücksichtigung aller derzeit bekannten Sicherheitsrisiken für eine Gentherapie optimiert wurde. Eine mögliche Anwendung für dieses EBV-basierte Gentransfersystem ist die Stimulierung von B-CLL-Zellen durch Expression des humanen CD40-Liganden. Dadurch sollen die Leukämiezellen einer Erkennung durch spezifische T-Zellen zugänglich gemacht werden. Für die Verwendung eines EBV-Genvektorsystems spricht unter anderem die hohe Effizienz der spezifischen Transduktion humaner B-Zellen, die große Fremdgen-Kapazität und die Fähigkeit zur latenten Infektion und daher langandauernden Genexpression. Zudem repliziert EBV episomal, modifiziert also nicht das Zellgenom. Allerdings ist EBV ein potentielles Tumorvirus. Daher wurden alle fünf bekannten Onkogene sowie der Transaktivator BZLF1 aus dem Helfergenom entfernt. Durch Deletion der Verpackungssignale wurde das Helfergenom so modifiziert, daß es nicht selbst in Virionen verpackt und freigesetzt werden kann. Die Verpackungseffizienz der Helferzellinie konnte durch FACS-Sortierung verbessert werden. Das EBV-Helfergenom wurde aus dieser Zellinie 293-VII+ reisoliert und seine Integrität durch PCR und Restriktionslängenvergleich bestätigt. Selbst bei provozierter Rekombination wurden von der Verpackungszelllinie 293-VII+ keine Virionen freigesetzt, die B-Zellen transformieren können. Ein weiterer Schwerpunkt dieser Arbeit war die Etablierung des therapeutischen hCD40L-tragenden Genvektors p2924 mit möglichst geringer Homologie zum Helfervirusgenom (TR und oriLyt als einzigen EBV-Sequenzen) und Verzicht auf Antibiotika-Selektionsmarker (stattdessen das nonsense suppressor-Transfer-RNA-Gen supF). Der bereits etablierte eGFP-tragende Genvektor p1933, welcher um etwa 6kb größer war und zusätzlich oriP trug, zeigte aber bessere Transfektionseigenschaften als p2924. Aus diesem Grund wurde unter anderem ein weiteres Genvektorplasmid konstruiert, bei welchem eGFP von p1933 durch hCD40L ersetzt wurde. Die Infektion bzw. Detektion von hCD40L auf B-CLL-Zellen war nur mit aufkonzentrierten Virusüberständen reproduzierbar, die mit diesem Plasmid hergestellt wurden. Allerdings trägt dieser Genvektor Amp als Selektionsmarker. Daher wurde zuletzt exemplarisch in dem eGFP-tragenden „großen“ Plasmid Amp durch supF ersetzt. Bislang wurden zur Propagierung von supF-Plasmiden Bakterienstämme verwendet, die die amber-Mutationen auf einem extrachromosomalen Plasmid enthielten. Um die einfache Gewinnung reiner Plasmidpräparationen zu ermöglichen, wurde auf der Basis von DH10B ein neuer Bakterienstamm mit chromosomaler amber-Mutation etabliert. Es wurde gezeigt, daß dieser Stamm sich zur antibiotikafreien Selektion und Produktion von supF-tragenden Plasmiden eignet. Somit stellt 293-VII+ eine optimierte Verpackungszelllinie dar, mit der EBV-basierte Genvektoren effizient hergestellt werden können, die sowohl etablierte B-Zelllinien als auch primäre B-Zellen transduzieren. Die erreichbaren Titer waren mit denen vergleichbar, die von der Verpackungszelllinie der ersten Generation (TR-2/293) produziert wurden. Die Produktion von Interferon- durch T-Zellen war erhöht, wenn sie mit B-CLL-Zellen stimuliert wurden, die zuvor mit Überständen aus verpackbaren, hCD40L-tragenden Vektoren nach Induktion des lytischen Zyklus transduziert wurden. Dieses Ergebnis lässt auf Aktivierung des Immunsystems in vivo hoffen. Ein völlig neuer Aspekt, der im Rahmen dieser Arbeit erstmalig beobachtet werden konnte, war der Übertrag von eGFP-Protein aus der Verpackungszelllinie in Rezipientenzellen. Alle Beobachtungen lassen auf einen spezifischen Transfer des fluoreszierenden Proteins aus dem Zytoplasma der Verpackungszelle auf die Oberfläche der B-Zellen durch Exosomen schließen. Experimente mit dem Modellantigen pp65 zeigten, dass auch dieses Protein direkt übertragen werden konnte und dadurch die Aktivierung von antigenspezifischen T-Zellen induzierte. In ähnlicher Weise konnten auch in einem reduzierten System die parentalen 293HEK-Zellen nach Transfektion mit Plasmiden für das EBV-Glykoprotein gp350/220 und das Antigen pp65 Überstände produzieren, die zu einer spezifischen Stimulation von T-Zellen führten. Diese Ergebnisse legen die zukünftige Entwicklung eines an EBV angelehnten Antigentransfersystems nahe, durch das mit Hilfe von B-Zellen als Stimulatoren eine spezifische T-Zellaktivierung erreicht werden kann.

Efficacy of Echinacea-Supplemented Feeding on Health and Immune Status of Horses Phytotherapeutic medication with immunemodulatory efficacy represent one possible alternative to general bactericidal or anti-inflammatory agents. The genus Echinacea with its more than 300 phytotherapeutic or homeopathic preparations takes up a significant part of the phytotherapeutic medication segment. It is already well-established as a feeding supplement for horses. The aim of this study is to examine whether a 2.5 percent supplement of Echinacea Purpurea (Purple Coneflower) in the day to day feeding of healthy horses has no adverse affects but may rather have a positive effect on the level of stress, the general health condition as well as the immune system. The placebo-controlled double blind study included 37 horses. Aerial plant parts of E. purpurea were added to the feeding ration in the form of pellets over a period of 35 days. The dosage made up 2.5 percent of the estimated average daily dry matter intake based on sustenance requirements of 2 kg TS/100 kg LM. General well-being, blood results, the plasma cortisol concentration as well as the serum concentration of immune globuline G were determined on Day 0, 10, 21, 28, 35, and 70. The respiratory burst activity of granulocytes was measured as well as the plasma’s anti-oxidative potential. An anti-rabies vaccination was used to detect a possible influence on the development of vaccine titer. General well-being and health condition of the included horses rated good throughout the examinations conducted in the course of the study. The statistically evaluated parameters respiration, temperature, pulse, and digestion showed no significant fluctuations within or between comparison and control groups, which would suggest a positive or negative impact of the Echinacea feeding supplement. For lack of difference between groups an influence of Echinacea on plasma cortisol concentrations may also be ruled out. The granulocytes’ respiratory burst activity was determined on Days 0, 21, and 35 for ten horses at a time from the Echinacea-group as well as the control group. In the course of the experiment a decline of the Median Fluorescence Intensity was observed. Still, a causal connection to the Echinaceasupplement could not be concluded, because tests showed no significant differences between the Echinacea-group and the control group. The plasma’s anti-oxidative capacity was determined on Days 0, 10, and 28. In the course of the experiment, values increased in the Echinacea-group as well as the control group. No significant difference was detected between the groups. Determination of immuneglobuline G fostered serum results between 17.15 mg/ml and 26.82 mg/ml. During the experiment, there was a decline in IgG-concentrations after Day 0. In the control group this became visible from the second blood sample on. In the Echinacea-group, this became visible only in the fourth and subsequent blood samples. There were however no significant differences between groups. The anti-rabies vaccination was administered on Day 21. The titer was determined on Day 21 and Day 35. Titer development did not differ between Echinacea-group and control group. A separate consideration of first and refresh vaccinations did not yield significant differences between groups either. Concluding from the results of this study, feeding supplemented with 2.5 percent E. purpurea has no adverse affects on healthy horses. However, there also is no positive influence on the condition of health and immune system to be expected. It was not possible to determine a positive or negative influence of Echinacea-supplemented feeding on any of the discussed parameters under this test conditions (typical horse keeping conditions, placebo-controlled double blind study).

HRSV ist eine häufige und weltweit verbreitete Ursache von Infektionen des Respirationstraktes. Es führt zu einer entzündlichen Erkrankung der respiratorischen Schleimhäute mit Mukosaödem, Hypersekretion und Bronchospasmus. Die Übertragung des viralen Erregers erfolgt durch Tröpfcheninfektion oder Kontakt mit kontaminierten Gegenständen. HRSV-Infektionen zeigen die höchste Inzidenz bei Säuglingen, vor allem in den ersten zwei bis sechs Lebensmonaten. Bei 25% bis 40% dieser Säuglinge nimmt die Erkrankung einen schweren Verlauf mit Befall des unteren Respirationstraktes in Form einer HRSV-Bronchiolitis oder -Pneumonie. Bei 0,5% bis 2,0% ist eine stationäre Behandlung im Krankenhaus erforderlich. Die Inzidenz nimmt wegen des zunehmend effektiveren Immunsystems mit dem Alter ab. Erwachsene und ältere Kinder zeigen meist keine Symptome bzw. Symptome einer leichten Erkältung. Reinfektionen im Laufe des Lebens sind häufig. Eine effektive kausale Therapie bei HRSV-Infektionen steht derzeit nicht zur Verfügung. Bei Patienten mit leichtem Krankheitsverlauf ist keine spezielle Behandlung erforderlich, therapiert wird symptomatisch. Aktuell ist keine spezifische Prävention in Form einer aktiven Impfung oder als effektive antivirale Therapie etabliert. Angesichts der hohen Inzidenz von HRSV-Infektionen und -Reinfektionen sowie der enormen gesundheitlichen und wirtschaftlichen Auswirkungen ist ein effektiver Impfstoff gegen HRSV als Forschungsziel vorrangig. Das Genom von HRSV, das zur Ordnung der Mononegavirales gehört, besteht aus einem negativ-orientierten RNA-Einzelstrang mit einer Länge von 15 222 Nukleotiden (beim A2-Stamm) und kodiert für zehn subgenomische mRNAs in der Reihenfolge 3’-leader, NS1, NS2, N, P, M, SH, G, F, M2(1+2), L, trailer-5’, die zur Expression von elf viralen Proteinen führen: fünf RNP-assoziierte Proteine, das sind das Nukleoprotein N, das Phosphoprotein P, die große katalytische Untereinheit L der RNA-Polymerase und der Transkriptionselongationsfaktor M2-1 sowie das nicht essentielle M2-2-Protein; vier Hüllproteine, dazu zählen das nicht-glykosylierte Matrixprotein M und drei Oberflächenproteine, im Einzelnen das Fusionsprotein F, das Anheftungsprotein G und das kleine hydrophobe Protein SH; zwei Nicht-Strukturproteine NS1 und NS2. NS1 und NS2 zeichnen die Pneumoviren vor allen anderen Viren der Ordnung der Mononegavirales aus. Beide NS-Proteine sind im Virion nur in Spuren nachweisbar, während sie in infizierten Zellen akkumulieren. Die beiden für die Proteine NS1 und NS2 kodierenden, nichtüberlappenden Gene liegen am 3‘-Ende des Genoms direkt im Anschluss an die leader-Region. NS1 und NS2 stimmen in den vier carboxyterminalen Aminosäuren überein, ansonsten weisen sie keine Sequenzähnlichkeiten auf. Das NS1-Gen hat eine Länge von 552 nt und kodiert für ein leicht saures Protein von 139 AS und 15,7 kD. Das NS2-Gen ist 503 nt lang und kodiert für ein basisches Protein von 124 AS und 14,7 kD. Die für die Ordnung der Mononegavirales charakteristische progressive Attenuation der Transkription sowie die Genlokalisation von NS1 und NS2 am 3‘-Ende lassen auf die höchste Transkriptionsrate für NS1- und NS2-mRNA unter den zehn HSRV-mRNA schließen, was auf eine bedeutende Rolle der NS1- und NS2-Proteine in infizierten Zellen hindeutet. NS1 und NS2 antagonisieren im Zusammenwirken die durch alpha-IFN und beta-IFN induzierte antivirale Antwort des Wirtsorganismus. Hierfür ist eine Koexpression beider NS-Proteine unbedingt erforderlich, ein NS-Protein allein zeigt keine derartige Aktivität. Der Mechanismus, mit dem HRSV die IFN-Antwort des Wirtsorganismus umgeht, ist unklar. In dieser Arbeit wurde die Funktion der NS-Proteine von klinischen HRSV-Isolaten aus fünf bis fünfzehn Monate alten Kindern untersucht. Durch die Anzucht der klinischen HRSV-Isolate in HEp-2-Zellkultur unter identischen Bedingungen wurden zunächst patientenabhängige Faktoren ausgeschaltet und damit die Grundlage für die Vergleichbarkeit der Wachstumseigenschaften der Isolate geschaffen. In den daraufhin erstellten Wachstumskurven konnten deutlich voneinander abweichende Wachstumverhalten der Isolate aufgezeigt werden. Der Befund, dass 3/4 der Bronchiolitis hervorrufenden HRS-Viren hohe infektiöse Titer (>106 infektiöse Viruspartikel/ ml an Tag 3) erreichten, während dies nur bei 1/3 der Bronchitis verursachenden Viren zu beobachten war, könnte auf eine Korrelation zwischen Wachstum in vitro und Pathogenität in vivo hindeuten. Um dies zu belegen, müsste eine größere Zahl von klinischen Isolaten analysiert werden. Die beiden Nicht-Strukturproteine versetzen HRSV in die Lage, die antivirale IFN-Antwort der Wirtszelle zu umgehen. Durch Behandlung von Virus-infizierten Zellkulturen mit IFN ließ sich nachweisen, dass alle klinischen HRSV-Isolate die Eigenschaft der IFN-Resistenz gleichermaßen besitzen und erst durch unphysiologisch hohe IFN Dosen eine wesentliche Inhibierung der Virusreplikation erreicht werden kann. Die in gleicher Weise ausgeprägte α-IFN-Resistenz bei den in Virulenz und Wachstumsgeschwindigkeit unterschiedlichen Viren deutete bereits darauf hin, dass diese Resistenz essentiell für alle klinischen RSV-Isolate ist, und dass zusätzliche Faktoren für das Maß der Aggressivität der Erreger verantwortlich sind. Mittels Nukleotid- und Aminosäuresequenzanalysen von NS1 und NS2 konnte dies weitgehend bestätigt werden. Anhand von RNA aus den HRSV-Isolaten wurde mit Hilfe des Enzyms Reverse Transkriptase cDNA von NS1 und NS2 synthetisiert, die nach dem Prinzip der PCR in vitro amplifiziert wurde. In anschließenden Klonierungsarbeiten wurden aus dem Vektor pBluescript II SK (–) und NS1-DNA bzw. NS1+NS2-DNA als Insert Plasmide konstruiert, in denen die Gensequenzen von NS1 und NS2 ermittelt und rechnergestützt in die entsprechenden Aminosäuresequenzen translatiert wurden. Die Analyse der NS-Sequenzen zeigte eine überraschend hohe Konservierung. Die Isolate waren einschließlich des Long-Stamms diesbezüglich untereinander sehr ähnlich. Diese Beobachtung stimmt mit der IFN-Resistenz überein und zeigt die Bedeutung der NS-Proteine. Die Ergebnisse dieser Arbeit deuten darauf hin, dass Abweichungen in den Sequenzen der übrigen Gene sowie patientenbezogene Faktoren wie Abwehrlage und anatomische Beschaffenheit des Respirationstraktes als Grund für die Unterschiede im Schweregrad der HRSV-Infektion eine Rolle spielen. Angesichts der stabilen Koexpression beider Nicht-Strukturproteine und des dadurch bedingten effektiven IFN-Escape sichern die Gene NS1 und NS2 die Überlebensfähigkeit von HRSV in vivo und stellen ebenso geeignete wie interessante Angriffspunkte in der Entwicklung eines attenuierten Lebendimpfstoffs dar.

Die chronische lymphatische Leukämie ist die häufigste Leukämie im Erwachsenenalter in den westlichen Ländern. Erkenntnisse der letzten Jahre haben das Spektrum verfügbarer Therapien deutlich erweitert, kurativ ist bisher nur die allogene Knochenmarkstransplantation. Im Blut der betroffenen Patienten treten die Zellen des malignen Klons in Kontakt mit autologen Immuneffektorzellen. Gentherapeutische Strategien basierend auf dem Transfer immunstimulatorischer Moleküle eröffnen deshalb neue Perspektiven für die Therapie der B-CLL. In der vorliegenden Arbeit wird erstmals die Eignung eines Helfervirus-freien EBV-Genvektorsystems für den Gentransfer in primäre B-CLL-Zellen beschrieben. Durch Optimierung der Vektorverpackung für ein eGFP kodierendes Plasmid konnte gezeigt werden, dass sich mit Hilfe einer Helfervirus-freien Verpackungszelline infektiöse Titer bis zu 2 x 106 infektiöse Partikel/ml generieren lassen. Das untersuchte Vektorsystem eignet sich für einen effizienten Gentransfer in primäre B-CLL-Zellen. Auf eine CD40L-Stimulation, wie sie zur Verbesserung der Transfereffizienz von Adenoviren zur Anwendung kommt, kann dabei verzichtet werden. Der Gentransfer lässt sich mit Hilfe eines monokonalen Antikörpers gegen CD21 weitgehend neutralisieren. In Kontrollexperimenten mit Überständen aus der Verpackung TR-deletierter Genvektorplasmide sinkt die Gentransferrate auf Werte nahe der Nachweisgrenze. Nach Verpackung des therapeutischen Moleküls CD40L sinkt die Transfereffizienz gegenüber dem eGFP kodierenden Genvektor und vermehrt unspezifische Effekte werden beobachtet. Zu den charakteristischen Eigenschaften EBV abgeleiteter Genvektoren zählen ein Tropismus für B-Lymphozyten und eine grosse Verpackungskapazität, die den Transfer von Gensequenzen bis zu einer Grösse von 160 kb erlaubt. Als essentielle EBV-Elemente enthalten die Genvektoren nur die Verpackungssignale TR und den lytischen Replikationsorigin oriLyt. Zukünfte Entwicklungen des Vektorsystems haben zum Ziel das Risiko von Rekombinationsereignissen zu reduzieren, die zur Freisetzung replikationsfähiger Virusmutanten oder potentiell onkogener viraler Gene führen könnten.

Die Vorhersage der Fertilität und die Aufklärung von Zusammenhängen zwischen der Befruchtungsfähigkeit und Parametern im Organismus ist in der Reproduktionsmedizin ein zentrales Anliegen, um eine effizientere Selektion hochfertiler Tiere zu erreichen. Das Seminalplasma wurde als geeigneter Parameter zur Beurteilung der Fertilität identifiziert, da die positive Beeinflussung der Spermienmotilität und die Vorverlegung der Ovulation durch Seminalplasma nachgewiesen wurde. Diese Arbeit hatte das Ziel anhand verschiedener Pietrainebergruppen und Hybridebergruppen einerseits Komponenten des IGF-Systems im Eberseminalplasma zu identifizieren und ihren Einfluss auf die Fertilität zu überprüfen, andererseits mittels der Proteomics-Technik das komplexe Proteingemisch im Eberseminalplasma zu analysieren. Es wurde das Vorhandensein von IGF-I/II im Eberseminalplasma nachgewiesen, ein Zusammenhang mit der Fertilität bestand nicht. Die Untersuchung der IGFBP-Aktivität ergab beim Vergleich der verschiedenen Pietrainebergruppen signifikante Unterschiede in der relativen Intensität der IGFBP-Banden, die Hybrideber bestätigten diese Ergebnisse nicht. Um eine möglichst einfache, nicht radioaktive Testung dieser IGFBP-Aktivität zu ermöglichen, war es nötig, zu ermitteln, um welche IGFBPs es sich bei diesen Banden handelte. In einer Seminalplasmaprobe wurde IGFBP-5 mittels MALDI-MS identifiziert. Ein Western-Blot mit gegen IGFBP-5 generierten Antikörpern wäre ein effektives Verfahren zur Ermittlung der IGFBP-5-Aktivität im Eberseminalplasma. Die Nutzung der Proteomics-Technik zur Darstellung des Proteinmusters im Eberseminalplasma erwies sich als problematisch, da eine vertikale Streifung und die starke Intensität einzelner Spots die Identifizierung erschwerte. Es wurden mittels MALDI-TOF-TOF PSP-I und b-Mikroseminoprotein identifiziert.Um möglicherweise von PSP-I maskierte Proteine geringerer Intensität darstellen zu können, war es nötig, den PSP-I Gehalt vor der 2D-Gelelektrophorese zu verringern. Antikörper, die gegen zwei Hauptisoformen des PSP-I generiert wurden, zeigten hohe Titer gegen PSP-I und waren auch in der Lage natives PSP-I zu erkennen. Damit ist die affinitätschromatographische Abreicherung von PSP-I möglich und dadurch die Verbesserung der Trennleistung, so dass die 2D-Gelelektrophorese zur Identifizierung positiv wirksamer Proteinkomponenten im Seminalplasmas effizient genutzt werden kann.

Die vorliegende Arbeit beschäftigt sich mit neuen Ansätzen zur Immuntherapie von B-Zell-Lymphomen. Als Mausmodell wurden das Lymphom A20 und der eher leukämisch wachsende BCL1-Tumor verwendet. Alle Zellen eines B-Zell-Lymphoms produzieren einen identischen Antikörper, den sogenannten Idiotyp, der als tumorspezifisches Antigen benutzt werden kann: Die antigenbindenden variablen Regionen von schwerer und leichter Kette sind für die Tumorzellen jedes Patienten spezifisch. Die variablen Regionen lassen sich mit einem flexiblen Linker-Peptid zu single-chain Fragmenten (scFv) fusionieren. Die Antigenbindung und die Struktur als Tumorantigen bleiben dabei erhalten. Die BCL1-Sequenz war bereits bekannt, sie ließ sich mit Hilfe familienspezischer Primer mit PCR amplifizieren und klonieren. Bei der stark hypermutierten Sequenz des A20-Idiotyps versagte das Standardverfahren der Konsensus-Primer, erst eine 5'-RACE-PCR war erfolgreich. Der optimale Effektormechanismus (humoral, CD4 oder CD8 vermittelt) zur Immuntherapie von Lymphomen ist nicht bekannt. Bei DNA-Vakzinen lässt sich die Immunantwort besonders effektiv modulieren. Hier wurde ein System entwickelt, um rasch die Wirksamkeit verschiedener Kombinationen in vivo untersuchen zu können: Der scFv-Idiotyp wurde mit einem Zytokin (IL1beta, IL4, IL12, GM-CSF oder Flt3 ligand) und/oder einem Adjuvans (Tetanus Toxin Fragment C oder HBsAg) gekoppelt. In vitro wurde die Expression, die Faltung des scFv und die biologische Aktivität bestätigt. Neben der spezifischen Zytokinwirkung stabilisieren die Fusionspartner die scFv-Proteine deutlich. Zunächst wurde mit dem Modellantigen HBsAg die Immunisierungstechnik optimiert: Intradermale Plasmid-Injektion in die Ohr Pinna ergab konsistent hohe Antikörper-Titer. Bereits ohne in vitro-Restimulation konnte eine starke zelluläre Antwort nachgewiesen werden. Weiterhin wurde für die beiden Tumormodelle A20 und BCL1 die Wachstumskinetik invivo bestimmt und ein Pilotversuch (32 Tiere) mit drei ausgewählten Konstrukten durchgeführt: Von sechs splenektomierten Mäusen zeigte nur eine nach zwei Immunisierungen eine spezifische zelluläre Antwort gegen A20. In keiner Versuchsgruppe zeigte sich eine signifikante Lebensverlängerung nach Lymphomchallenge. Zusammenfassend ist erstmalig ein System entwickelt worden, das es auf einfache Weise ermöglicht, die Wirksamkeit von verschiedenen Zytokinen und Adjuvantien zur Idiotyp-Vakzinierung zu untersuchen. Dieses System bietet viel Raum für Optimierungen.