Podcasts about transgene

Dans ce numéro du Journal des biotechs, Jamila El-Bougrini, analyste chez Invest Securities revient sur les trois dossiers qui font l'actualité : Inventiva, Transgene et Ose Immunotherapeutics.L'entretien est consacré à Thomas Kuhn. Poxel a annoncé aujourd'hui un accord avec la société d'investissement américaine OrbiMed pour monétiser une partie des redevances issues des ventes de son antidiabétique Twymeeg réalisées par Sumitomo Pharma au Japon à hauteur de 50 millions de dollars. Le directeur général de Poxel revient sur le rationnel de ce deal et explique comment il va permettre à Poxel de redéployer sa stratégie.

Dans ce numéro du Journal des biotechs, Laura Roba, analyste biotechs-medtechs chez Degroof Petercam fait le point sur l'actualité de trois sociétés : Transgene, Aelis Farma et Onward Medical. Elle revient aussi sur le secteur de la radiopharma avec une société belge prometteuse...L'entretien est consacré à Laurence Rodriguez, nommée directrice générale de Gensight depuis décembre dernier. Elle fait le point sur la situation de la biotech spécialiste de la thérapie génique pour les maladies neurodégénératives de la rétine et du système nerveux central et dresse ses priorités stratégiques à court et moyen terme.

O ano de 2023 foi marcado pelo fim da pandemia de Covid-19. O SARS-CoV-2 não desapareceu e ainda provoca picos de contaminações, mas a vida voltou ao normal após três anos de restrições e graças ao desenvolvimento de vacinas que evitam formas graves e mortes pela Covid-19. A tecnologia do RNA mensageiro, usada nos imunizantes da Pfizer e da Moderna, que permitiram o controle da doença, recebeu o prêmio Nobel de Medicina em 2023. A cientista húngara Katalin Karikó, de 68 anos dividiu a recompensa com o pesquisador americano Drew Weissman.Karikó descobriu, em 2005, como impedir o sistema imunológico de desencadear uma reação inflamatória contra o RNA mensageiro fabricado em laboratório. As pesquisas da bioquímica foram a base do desenvolvimento das vacinas contra a Covid-19, que permitiram o controle epidêmico.Trabalho remoto só traz vantagens?Em 2023, algumas transfomações sociais geradas pelas medidas adotadas durante a circulação mais ativa do vírus, entre 2020 e 2022, foram incorporadas definitivamente ao cotidiano de milhões de pessoas em todo o mundo. Uma delas é o trabalho remoto, que em alguns países tornou-se comum para algumas categorias da população.Trabalhar em casa, entretanto, não traz apenas vantagens. Para muitas mulheres, que sofrem de carga doméstica e mental no dia a dia, ele pode ser uma armadilha, alerta a psicóloga francesa Aline Nativel Id Hammou, autora do livro “Burn Out Parental”.“Em casa, todas as tarefas da vida cotidiana ficam 'gravitando' em torno do computador, enquanto trabalhamos. Podemos, às vezes, nos sobrecarregar. Na hora do almoço, por exemplo, como não estamos na empresa, há a tentação de se ‘obrigar' a fazer as tarefas domésticas, ou do cotidiano, pelo fato de estar em casa”, alerta.Ao longo de 2023, o trabalho remoto vem sendo mantido em muitas áreas, mas muitas empresas também estão exigindo o retorno dos seus funcionários para o escritório.Uso do Ozempic preocupa autoridadesOutro assunto que virou notícia em 2023 é o Ozempic, um medicamento contra o diabetes lançado em 2019, que controla a glicose e ajuda na perda de peso. Por ser eficaz contra o emagrecimento, ele passou a ser usado de maneira deturpada – uma prática que se popularizou e viralizou em vídeos no TikTok. Por conta disso, muitas pessoas têm usado o remédio sem indicação médica, explica Rodrigo Lamounier, endocrinologista professor da UFMG (Universidade Federal de Minas Gerais).“Ele melhora a eficiência da ação da insulina nas pessoas que têm diabetes e é muito eficaz em melhorar o controle da glicose”, diz. Além disso, o remédio tem o efeito de gerar saciedade. “Ele causa um retardamento do esvaziamento gastrointestinal, provocando saciedade. E age também no hipotálamo, no centro da fome, provocando inibição da fome, perda de apetite e diminuindo, assim, a ingesta alimentar”, diz, ressaltando que o remédio deve ser usado em casos específicos.Cresce incidência do câncer do intestinoO aumento da incidência do câncer do intestino, o segundo que mais mata em todo o mundo, também foi destaque durante ano de 2023. Se descoberto no início, o câncer colorretal tem 100% de chances de cura, explicou o gastroenterologista francês Michel Ducreux, do instituto francês Gustave Roussy, um dos maiores centros de combate ao câncer no mundo, situado em Villejuif, nos arredores de Paris.“O teste imunológico permite a detecção de 80% dos cânceres e dos tumores benignos, que estão se 'modificando', crescendo e que vão provavelmente se transformar em cânceres. Neste caso, podemos, durante a colonoscopia, retirar os pólipos e evitar o câncer. É uma política que pode trazer resultados, mas se houver adesão”, ressalta.Clones de cânceres podem ajudar pacientes com tumores gravesEm busca de soluções contra cânceres e tumores graves, cientistas do mundo todo trabalham nos laboratórios em estudos que buscam, cada vez mais, individualizar os tratamentos.No Instituto Gustave Roussy, um grupo de pesquisadores, liderado pela especialista em gastroenterologia, genética e biologia molecular, Fanny Jaulin, fabrica em laboratório cópias biológicas de cânceres a partir das células dos pacientes. O objetivo é lutar contra tumores em fase terminal, propondo tratamentos individualizados.“Nosso desafio é recriar os tumores dos pacientes com câncer, com foco em novos tratamentos. Nós nos especializamos na criação desses organóides, cultivados em laboratório a partir de uma pequena biópsia, feita com uma simples agulha”.Brasil abandona uso da AstraZenecaA RFI também divulgou em primeira mão, neste ano, a notícia de que desde o final de 2022 o Ministério da Saúde recomenda que as vacinas de vetor viral, como a AstraZeneca e a Janssen, não sejam mais aplicadas como reforço contra a Covid-19. A recomendação vale a partir da terceira dose, na população com menos de 40 anos. O motivo da decisão é o risco aumentado de trombose, principalmente em mulheres.Até janeiro de 2002, a vacina já tinha sido usada em cerca de 115,6 milhões de pessoas no país. A notícia foi confirmada pelo infectologista Julio Croda, especialista da Fiocruz, professor da Universidade Federal do Mato Grosso do Sul e da Faculdade de Saúde Pública de Yale, nos Estados Unidos.“O Brasil tem, dentro do seu programa nacional de imunização, um sistema de farmacovigilância que é justamente feito para avaliar os eventos adversos associados às diversas vacinas. Através desse monitoramento, foi identificado um aumento de risco, eventualmente, para trombose, principalmente em pessoas jovens, abaixo de 40 anos e mulheres”, explicou o infectologista. “Isso é bastante similar ao que foi identificado em outros países, como no Reino Unido, no caso da vacina da AstraZeneca, e nos Estados Unidos, no caso da vacina da Janssen.”Os segredos do microbiotaA Ciência está apenas começando a compreender como o microbiota, os micróbios (incluindo bactérias, vírus e fungos) que moram no nosso corpo, principalmente no intestino, atuam nas funções orgânicas. Estudos mostram que eles podem estar envolvidos até mesmo em processos cerebrais e no desenvolvimento da depressão.A oncologista brasileira Carolina Alves Costa Silva, integra há cinco anos uma equipe do instituto francês Gustave Roussy e estuda o microbiota humano. Em um dos seus projetos, a pesquisadora busca entender a influência sua na resposta aos tratamentos contra o câncer, e, a longo prazo, como pode se tornar um aliado na prevenção da doença. “Há evidências de que essas bactérias e outros micro-organismos podem atuar na diminuição da resposta imune e impedir que alguns tipos de tratamento contra o câncer funcionem bem”, disse Carolina em entrevista à RFI.Vacina freia cânceres da cabeça e do pescoçoNeste ano, nosso programa deu destaque para vacina terapêutica TG4050, da biotech francesa Transgene. O produto é uma nova arma, inédita, na luta contra a recaída de cânceres precoces, e geralmente graves, da cabeça e do pescoço e tem dado bons resultados, como explicou o CEO da empresa, Alessandro Riva, à RFI.“Fizemos um estudo randomizado de fase 1 e comparamos os pacientes que tinham recebido a nossa vacina individualizada e personalizada com outros que não receberam. Por hora não temos recaídas, e esse follow-up, ou acompanhamento, começa a ser considerável. Os pacientes tratados na fase 1 têm uma resposta imunitária contra as proteínas e mutações que selecionamos, e na qual estão baseadas as vacinas", diz. "É uma reviravolta para a empresa, mas também em relação a tudo que envolve vacinas individualizadas e personalizadas.”O cérebro fabrica falsas memóriasOutro destaque em 2023 é o avanço dos estudos sobre como cérebro é capaz de criar falsas memórias. Ao longo das últimas décadas, diversas pesquisas científicas comprovaram que nossa mente pode fabricar vivências, incluindo detalhes que nunca existiram. Este foi um dos temas dos nossos programas em 2023. O neurobiologista Pascal Roullet, da Universidade Paul Sabatier, em Toulouse, é um dos maiores especialistas franceses no assunto. Em entrevista à RFI, ele explicou como nosso cérebro arquiva e transforma uma memória antes dela ser definitivamente arquivada. "A informação é tratada em termos neurobiológicos. Nos animais, sabemos que esse processo vai demorar entre seis e dez horas, o tempo necessário para que essa memória possa ser armazenada na memória de longo prazo.”Vírus da Covid-19 contamina o sistema nervoso centralNeste ano de 2023, diversas pesquisas sobre o vírus da Covid-19 tentaram entender seu funcionamento. Uma delas foi feita por uma equipe do Instituto Pasteur e publicada na revista Nature Communications. O médico veterinário brasileiro Guilherme Dias de Melo integra o projeto desde 2020. O objetivo era verificar se o SARS-CoV-2 era capaz de infectar os neurônios e provocar algum problema no cérebro, o que acabou sendo confirmado pela equipe.“A mensagem principal é: o SARS-CoV-2 é capaz de infectar os neurônios e utilizá-los como uma rota de acesso ao sistema nervoso central. E a manifestação clínica na fase aguda não necessariamente vai influenciar uma manifestação clínica na fase longa.”

Con una trayectoria notable en la psicología clínica, el Dr. Miguel Vázquez se destaca como un referente en la comprensión y tratamiento de la diversidad de género y el abuso de sustancias. Reconocido como Psicólogo del Año en 2015, su experiencia se ha cimentado en investigaciones presentadas en múltiples rincones del mundo, desde México hasta Sudáfrica y España. Además, es co-fundador y Director Ejecutivo de True Self Foundation, así como co-fundador de PsychConnection PR, una empresa pionera en la integración de tecnología en servicios psicológicos.Una faceta crucial de su labor ha sido su papel como editor en textos que abordan temas esenciales para la comunidad transgénero y no binaria. Su conocimiento y compromiso han contribuido significativamente a la comprensión de la diversidad de género, un término que engloba la multiplicidad de identidades de género que existen más allá de la binariedad tradicional.La diversidad de género abarca una amplia gama de identidades que van más allá de lo masculino y femenino, incluyendo personas intersexuales. Representando alrededor del 1.7% de la población, estas identidades desafían las nociones convencionales y merecen ser reconocidas y respetadas.En cuanto a temas cruciales, como la anorexia frente al cambio de género, surge una pregunta fundamental: ¿por qué se considera un trastorno uno y no el otro? Esta disparidad plantea debates sobre la madurez de niños y niñas para tomar decisiones relacionadas con su identidad de género, así como la importancia de comprender los pronombres y respetar la autodeterminación de cada individuo.Desde la perspectiva del Dr. Vázquez, el proceso correcto implica un enfoque compasivo y respetuoso que permita a cada persona explorar su identidad de género sin juicios ni presiones externas. También aborda la noción de perspectiva de género, cuestionando la idea de que todos los niños son automáticamente asignados al género masculino hasta que se demuestre lo contrario.Además, el Dr. Vázquez reflexiona sobre la posibilidad de que algunas personas puedan experimentar confusiones en su identidad sexual como resultado de traumas pasados. Asimismo, analiza la resistencia y oposición que enfrenta el movimiento transgénero, ejemplificando con casos controversiales como Leah Thomas frente a figuras como Shaquille O'Neal y Mike Tyson.El impacto del racismo y la discriminación hacia la comunidad LGBT+ se analiza desde la perspectiva del Dr. Vázquez, explorando cuál de estos problemas afecta más a la sociedad actual. También se discute la libertad de expresión en relación con el arte y el humor, donde se cuestiona el derecho de los artistas trans a expresarse versus el debate en torno a comediantes como Dave Chappelle.El Dr. Miguel Vázquez, con su experiencia y dedicación, continúa abriendo caminos hacia una comprensión más amplia y respetuosa de la diversidad de género, contribuyendo a un mundo más inclusivo y empático.Episodio traído a ustedes por @drawisco. Si tienes niños con mocos, ella puede atenderlos desde la comodidad de tu hogar.https://linktr.ee/drawiscoAsí optimizo mi salud, enfoque y longevidadhttps://fbuy.io/persona/8zzg3ywmSOLO queda 1 espacio de Coaching Personal con Carlos Figueroa, más detalles aquí https://linktr.ee/CarlosFigueroaAñadRedes Carloshttp://www.tiktok.com/carlosefigueroaprhttp://www.instagram.com/carlosefigueroaRedes Gana Tu Díahttp://www.instagram.com/ganatudia http://www.tiktok.com/ganatudiahttp://www.ganatudia.cominfo@ganatudia.com

Zapping Dirigeants octobre 2023 Retrouvez des extraits des interviews dans différents secteurs de l'économie avec les dirigeants d'entreprises cotées en Bourse. Actia, Bonduelle, Arcure, Transgene, Witbe Et si la Bourse vous intéresse, alors un petit oeil ici avec des milliers de vidéos de dirigeants : Vidéos Dirigeants

Dados mostram que a vacina criada pela biotech francesa Transgene, testada em parceria com hospitais públicos da França e outros países, previne recaídas de cânceres da cabeça e do pescoço. Taíssa Stivanin, enviada especial a Illkirch GraffenstadenNa pacata cidade de Illkirch Graffenstaden, nos arredores de Estrasburgo, na Alsácia, 160 profissionais da biotech francesa Transgene trabalham na produção da vacina terapêutica TG4050.O produto é uma nova arma, inédita, na luta contra a recaída de cânceres precoces, e geralmente graves, da cabeça e do pescoço. Cerca de 70% deles são detectados em um estágio avançado e 60% dos pacientes têm uma taxa de sobrevida de cinco anos.A vacina começou a ser testada em humanos em 2019, graças a parcerias com hospitais franceses, como o Instituto Curie, em Paris, e centros de tratamento nos EUA e no Reino Unido.Após o fim dos testes clínicos da fase 1 com 32 pacientes, os dados mostram que, até agora, nenhum deles teve recaídas.O próximo passo agora é avaliar a perenidade da terapia e iniciar a seleção para a fase 2, que pode começar ainda neste ano.A TG4050 é feita sob medida para cada paciente e ativa o sistema imunológico, utilizando um vetor viral, “remodelado” em laboratório e cultivado em ovos de galinha, que integrará o material genético derivado do tumor do paciente e ensinará nosso sistema imunológico a reconhecê-las e atacá-las.Uma das características das células cancerígenas é que muitas vezes elas não são detectadas pelo nosso sistema de defesa. Um dos objetivos da vacina da biotech francesa é justamente torná-las visíveis, para que o corpo possa atacá-las.O diretor científico da Transgene, Éric Quemeneur, acompanhou todos os passos do surgimento da vacina, desde o início do projeto, em 2017. Ele conta que a equipe se apoiou em uma base científica de dados fornecidos por vários estudos, o que facilitou a concepção do produto, que no meio farmacêutico, é chamado de medicamento candidato.De acordo com o engenheiro químico, a vacina é produzida em várias etapas, dentro e fora do laboratório. Primeiramente, é necessário separar um pedaço do tumor do paciente durante a cirurgia para sua retirada, no hospital.“A vacina TG 40.50.01 é uma vacina personalizada que vai recuperar elementos a partir do sequenciamento do tumor do paciente. Após a operação e esse sequenciamento, é possível identificar o conjunto de mutações presentes, que evoluíram ao longo do tempo”, explica.Esse sequenciamento é feito em centros europeus especializados, explica. Em seguida, as mutações presentes no mapa genético do paciente são analisadas por uma ferramenta de IA de fabricação japonesa.Utilizando algoritmos específicos, ela vai antecipar, entre as milhares de mutações, quais delas têm maior potencial para induzir uma resposta imunológica protetora e evitar as recaídas dos cânceres.As informações coletadas pela ferramenta serão então enviadas ao laboratório francês e integradas a um produto fabricado sob medida para o paciente. “A sequência do DNA do paciente fornecida pela inteligência artificial será organizada para transportar os chamados peptídeos antigênicos, substâncias que induzem a resposta do sistema imunológico", explica."Esse transporte é feito por um vetor viral, construído a partir das informações genéticas do paciente. A vacina é construída em um laboratório de pesquisa biológica, utilizando métodos de síntese de DNA, clonagem molecular e expansão de um clone viral. Essa será a base do produto farmacêutico.”Produção é demoradaA produção da vacina pode levar várias semanas. Ela depende dos prazos que envolvem a análise do tumor no hospital e a concepção do vetor viral no laboratório, essencial para transportar as informações necessárias ao organismo que vão desencadear a reação imunológica contra o câncer.Quando o produto chega ao laboratório francês, são necessárias de 12 a 15 semanas para finalizá-lo, seguindo as normas farmacêuticas. Acelerar esse processo é uma das prioridades da biotech francesa. “Estamos trabalhando nisso. Vamos usar a experiência que adquirimos nas primeiras fases de desenvolvimento para identificar tudo que pode ser acelerado no processo", diz o diretor científico."Já trabalhamos em um procedimento que tornará possível fabricar a vacina em dois ou três meses, contando o tempo que leva a decisão de retirar o tumor, analisá-lo, e o tempo disponível para administrá-la ao paciente. O sistema preditivo da vacina foi validado. Nos testes, pelo menos uma das três mutações introduzidas no vetor viral gerou uma resposta imunológica detectável no organismo. Todos os pacientes reagiram”, reitera.Os resultados do teste clínico da vacina foram destaque no Encontro Anual da Sociedade Americana de Oncologia Clínica (ASCO), o principal congresso mundial sobre câncer, que aconteceu em junho em Chicago.Novo CEO quer acelerar produçãoO CEO do laboratório francês, Alessandro Riva, chegou ao cargo há três meses. A biotech francesa, criada em 1979 e que já passou por dificuldades financeiras no passado, está em um bom momento, aposta o executivo. Riva está otimista com os resultados da fase 1 dos testes clínicos e se empolga com a ausência de recaídas nos pacientes que receberam o produto - alguns deles há vários anos.“Fizemos um estudo randomizado de fase 1 e comparamos os pacientes que tinham recebido a nossa vacina individualizada e personalizada com outros que não receberam.Por hora não temos recaídas, e esse follow-up, ou acompanhamento, começa a ser considerável. Os pacientes tratados na fase 1 têm uma resposta imunitária contra as proteínas e mutações que selecionamos, e na qual estão baseadas as vacinas", diz. "É uma reviravolta para a empresa, mas também em relação a tudo que envolve vacinas individualizadas e personalizadas.”A vacina TG4050 não deve estar disponível antes de 2027. Como todo produto farmacêutico, ela deve respeitar uma série de etapas antes de ser submetida à avaliação das agências de regulação, como a EMA ( Agência Europeia de Medicamentos) ou a FDA (Food and Drugs Administration), a agência americana de medicamentos.O CEO reitera que acelerar o processo de produção continua sendo uma das prioridades para que, uma vez aprovada, a vacina possa beneficiar rapidamente os pacientes.“Estamos investindo em um plano ambicioso de produção, que será compartilhado com as autoridades de saúde, e estamos otimistas. Acreditamos que ele será colocado em prática em um curto espaço de tempo”, sublinha. “Há esperança, é possível e tem vários exemplos que nos mostraram isso. Estamos pensando em uma solução com a ajuda de empresas estrangeiras, que têm know-how no setor.”

Dans ce numéro du Journal des biotechs, Jamila El Bougrini évoque les entreprises qui ont récemment fait l'actualité : Transgene, Medesis, Biocorp et Nanobiotix.L'entretien est consacré à Nawal Ouzren. La directrice générale de Sensrion revient sur derniers développements de son actif le plus avancé SENS 401 et fait le point sur les actifs de la biotech en thérapie génique.

In this episode Róisin McGuigan (Editor, BioInsights) speaks to Paul Byrne (Senior Director, Genomics, ProtaGene) about the evolution of the gene therapy field, with a specific focus on the complexities posed by biodistribution, vector shedding, and transgene expression in gene therapy development.

1:18  Labiotech news3:37  BioInventBioInvent International AB, a Swedish biotech company focused on the discovery and development of novel and first-in-class immune-modulatory antibodies for cancer immunotherapy, and Transgene, a biotech company that designs and develops virus-based immunotherapeutics against cancer, recently announced positive phase 1a data on the oncolytic virus BT-001 for the treatment of solid tumors.BioInvent currently has four drug candidates in five ongoing clinical programs in Phase 1/2 trials for the treatment of hematological cancer and solid tumors, respectively. The company's validated, proprietary F.I.R.S.T technology platform identifies both targets and the antibodies that bind to them, generating many promising new drug candidates to fuel the company's own clinical development pipeline and providing licensing and partnering opportunities.BioInvent generates revenues from research collaborations and license agreements with multiple top-tier pharmaceutical companies, as well as from producing antibodies for third parties in the company's fully integrated manufacturing unit.We spoke with CEO Martin Welschof and Cecilia Hofvander, senior director investor relations.

Dans ce numéro du journal des Biotechs, Jamila El Bougrini, analyste chez Invest Securities, passe en revue les dossiers chauds du moment : Abivax, avec l'arrivée de Marc de Garidel à la tête de la société en intérim, Lysogene, Transgene et les résultats présentés au congrès de l'AACR et enfin Nicox et l'autorisation de mise sur le marché obtenue en Chine par son partenaire local.L'entretien est consacré à Pascal Prigent. Outre les résultats 2022 récemment dévoilés, le directeur général de Genfit détaille les programmes en cours et surtout les rendez-vous importants qui attendent la biotech, à commencer par le premier d'entre eux : la publication des premiers résultats d'Elative, la phase 3 d'elafibranor dans la PBC, prévus d'ici la fin de ce 2e trimestre.

Aujourd'hui sur Investisseur.TV, Hedi Ben-Brahim CEO de TransgeneHébergé par Ausha. Visitez ausha.co/politique-de-confidentialite pour plus d'informations.

Hedi Ben Brahim, directeur général de Transgene, était l'invité de François Sorel dans Tech & Co, ce lundi 20 mars. Il s'est penché sur la biotech BFM Business. Retrouvez l'émission du lundi au jeudi et réécoutez la en podcast.

Lundi 20 mars, François Sorel a reçu Frédéric Bianchi, journaliste BFM Business, Aurélien Vigano, directeur des infrastructures internationales d'Orange, Alessandro Cardoso, directeur de l'ingénierie commerciale OneWeb, Matthieu Soulé, directeur du BNP Paribas C. Lab Americas, Hedi Ben Brahim, directeur général de Transgene, et Sabrina Quagliozzi, correspondante à New York pour BFM Business, Perle Bagot, directrice Associée du HUB Institute, Christophe Aulnette, senior advisor chez Apax Partners et ancien Président de Microsoft Asie du Sud et de Microsoft France, André Loesekrug-Pietri, président de la Joint European Disruptive Initiative (JEDI), Laetitia Portal, présidente et fondatrice d'Hello Art Up, et Tanel Petelot, président d'Emobot, dans l'émission Tech & Co sur BFM Business. Retrouvez l'émission du lundi au jeudi et réécoutez la en podcast.

2:33 Labiotech.eu news5:03 Humacyte23:01 Transgene37:21 Center for Global Development54:32 JLLThis week, we have three interviews. One is from Bio-Europe, a chat with Transgene chief business officer, Steven Bloom, and we also have conversations with Humacyte CEO Laura Niklason, and with Anthony McDonnell, Senior Policy Analyst at the Center for Global Development, on the subject of antimicrobial resistance.We also have our weekly commentary from Travis McCready at JLL.HumacyteThe ongoing war in Ukraine continues to present significant challenges for frontline hospitals in treating the injured. As part of the humanitarian aid effort, U.S. biotech, Humacyte, has worked with the FDA and the Ukrainian Ministry of Health to send 30 investigational bioengineered blood vessels to help repair tissue injuries from bomb and gunshot wounds. Humacyte's human acellular vessels, or HAVs, are off-the-shelf replacement vessels that help the body heal itself. They are currently being evaluated in multiple advanced-stage clinical trials in vascular trauma  repair, arteriovenous access for hemodialysis and peripheral arterial disease and so far, have been implanted in more than 500 patients to date.   The HAV is made by seeding vascular cells from a qualified cell bank onto a biocompatible, biodegradable polymer mesh in a bioreactor bag. Over weeks, the cells grow and create new tissue, forming a tube-shaped vessel structure while the polymer mesh degrades. The resulting bioengineered vessel is then decellularized to create the HAV: an extracellular matrix that retains the biomechanical properties of the vessel but is cleansed of cellular components that could induce an immune response. The HAV in the bioreactor bag can then be shipped, stored, and is immediately available when needed.  Reaction to European Union action on antimicrobial resistanceFourteen Member States wrote to the European Commission recently outlining why they think the EU's proposed policies around antimicrobial resistance (AMR) are costly, inefficient, and will disrupt the market for generic drugs.Anthony McDonnell, senior policy analyst at the Center for Global Development, looked in detail at the EU's proposals, why member states are revolting against it, and which policies the EU should actually implement to successfully combat AMR.He said that, for months it has been speculated that the EU may move toward transferable exclusivity vouchers (TEVs). The14 countries have made three counter proposals for how new antimicrobials can be encouraged. TransgeneTransgene is a biotechnology company focused on designing and developing targeted immunotherapies for the treatment of cancer. Its programs utilize viral vector technology with the goal of indirectly or directly killing cancer cells.The company's clinical-stage programs consist of two therapeutic vaccines (TG4001 for the treatment of HPV-positive cancers, and TG4050, the first individualized therapeutic vaccine based on the myvac platform) as well as two oncolytic viruses (TG6002 for the treatment of solid tumors, and BT-001, the first oncolytic virus based on the Invir.IO platform).With Transgene's myvac platform, therapeutic vaccination enters the field of precision medicine with a novel immunotherapy that is fully tailored to each individual. myvac  allows the generation of a virus-based immunotherapy that encodes patient-specific mutations identified and selected by AI capabilities provided by its partner NEC.With its proprietary platform Invir.IO, Transgene is designing a new generation of multifunctional oncolytic viruses. It has an ongoing collaboration with AstraZeneca.Subscribe to our newsletter

Today on the pharmaphorum podcast, Editor in Chief Jonah Comstock welcomes Hedi Ben Brahim and Eric Quéméneur, CEO and chief science officer respectively of Transgene, to discuss cancer vaccines in general and Transgene's recent work in the space in particular. 

Mardi 26 avril 2022, SMART TECH reçoit Catherine De Vulpillières (Cofondatrice, Evidence B) , Guillaume Pereira (Responsable éducation, JAMF France) , Katarzyna Butty (Fondatrice de Spell Languages, Responsable de l'implémentation du Robot EMYS en francophonie) , Nicolas Salles (vice-président, Cercle de la Donnée) , Hedi Ben Brahim (PDG, Transgene) et Bernard Benhamou (Secrétaire Général, Institut de la Souveraineté Numérique)

Mardi 26 avril 2022, SMART TECH reçoit Catherine De Vulpillières (Cofondatrice, Evidence B) , Guillaume Pereira (Responsable éducation, JAMF France) , Katarzyna Butty (Fondatrice de Spell Languages, Responsable de l'implémentation du Robot EMYS en francophonie) , Nicolas Salles (vice-président, Cercle de la Donnée) , Hedi Ben Brahim (PDG, Transgene) et Bernard Benhamou (Secrétaire Général, Institut de la Souveraineté Numérique)

Hedi Ben Brahim nous parle de Transgene dont il est président. Transgene développe de nouveaux médicaments contre le cancer. Ils utilisent des virus dans l'élaboration de vaccins et la fabrication de nouveaux médicaments. Transgene est une Biotech cotée en bourse.  

Dans ce numéro du Journal des biotechs, Jamila El Bougrini, analyste chez Invest Securities  revient sur le newsflow soutenu des derniers jours, notamment sur Sensorion, Lysogène et Gensight. Elle évoque également les dossiers à surveiller dans les mois à venir à l'image de Transgene, Noxxon et Geneuro

L'entretien est justement consacré au PDG de Transgene, Hedi Ben Brahim. Arrivé depuis un peu plus d'an à la tête de la société, il détaille notamment les résultats encourageants enregistrés par TG4050 issu de la plateforme Myvac, dans le traitement du cancer de l'ovaire, et dans le traitement précoce du cancer de la tête et du cou et explique les priorités stratégiques de Transgene pour 2022.

Dans ce numéro du Journal des biotechs, Jamila El Bougrini, analyste chez Invest Securities  revient sur le newsflow soutenu des derniers jours, notamment sur Sensorion, Lysogène et Gensight. Elle évoque également les dossiers à surveiller dans les mois à venir à l'image de Transgene, Noxxon et Geneuro L'entretien est justement consacré au PDG de Transgene, Hedi Ben Brahim. Arrivé depuis un peu plus d'an à la tête de la société, il détaille notamment les résultats encourageants enregistrés par TG4050 issu de la plateforme Myvac, dans le traitement du cancer de l'ovaire, et dans le traitement précoce du cancer de la tête et du cou et explique les priorités stratégiques de Transgene pour 2022.

Hedi Ben Brahim, PDG de Transgene, était l'invité de Sandra Gandoin dans Good Morning Business, ce mercredi 24 novembre. Ils sont revenus sur les étapes à suivre pour la biotech française pour déployer son vaccin contre la récidive de certains cancers sur BFM Business. Retrouvez l'émission dulundi au vendredi et réécoutez la en podcast.

Hedi Ben Brahim, PDG de Transgene, était l'invité de Sandra Gandoin dans Good Morning Business, ce mercredi 24 novembre. Ils sont revenus sur les étapes à suivre pour la biotech française pour déployer son vaccin contre la récidive de certains cancers sur BFM Business. Retrouvez l'émission dulundi au vendredi et réécoutez la en podcast.

Ce mercredi 24 novembre, Sandra Gandoin et Christophe Jakubyszyn ont reçu Hedi Ben Brahim, PDG de Transgene, Nicolas de Villiers, Président du Puy du Fou, Marc Menasé, Directeur général de DEE Tech, et Anne-Charlotte Fredenucci, Présidente du groupe Ametra, dans l'émission Good Morning Business sur BFM Business. Retrouvez l'émission du lundi au vendredi et réécoutez la en podcast.

Hoy tratamos un tema que era polémico hace un par de décadas, sigue siendo polémico hoy, y es posible que lo siga todavía siendo dentro de otras dos décadas. Se trata de los alimentos transgénicos. En febrero de 2001 escribía un artículo sobre el primer animal transgénico que podría tal vez ser aprobado por las agencias internacionales para el consumo humano. Se trataba de un salmón que crecía a gran velocidad. Además de contar cómo se logró desarrollar dicho salmón transgénico, una información de la que no se disponía en aquellos momentos, ahora, dos décadas más tarde, nos preguntamos: ¿Qué ha sido de él? ¿Ha llegado ya a nuestras cocinas? Aunque en algunos países, como Canadá, se ha aprobado su consumo, en muchos otros, su comercialización aún no se ha producido.

Hoy tratamos un tema que era polémico hace un par de décadas, sigue siendo polémico hoy, y es posible que lo siga todavía siendo dentro de otras dos décadas. Se trata de los alimentos transgénicos. En febrero de 2001 escribía un artículo sobre el primer animal transgénico que podría tal vez ser aprobado por las agencias internacionales para el consumo humano. Se trataba de un salmón que crecía a gran velocidad. Además de contar cómo se logró desarrollar dicho salmón transgénico, una información de la que no se disponía en aquellos momentos, ahora, dos décadas más tarde, nos preguntamos: ¿Qué ha sido de él? ¿Ha llegado ya a nuestras cocinas? Aunque en algunos países, como Canadá, se ha aprobado su consumo, en muchos otros, su comercialización aún no se ha producido.

La société de biotechnologies Transgene a récemment publié des informations concernant les premières données de Phase I de TG6002, soulignant “le potentiel de ses virus oncolytiques en administration intraveineuse”. Selon l’entreprise, “ces données constituent la preuve de concept clinique de l’administration par voie intraveineuse de la souche virale VVcopTK-RR- brevetée de Transgene : après être administré par voie intraveineuse, TG6002 atteint la tumeur, se réplique sélectivement au sein des cellules tumorales et y induit l’expression localisée de son transgène fonctionnel (le gène FCU1)“. Retour sur les derniers mois pour la société de biotechnologie, l’évolution dans les différents projets, avec le nouveau Pdg de l’entreprise, Hedi Ben Brahim, qui donne à la Web TV www.labourseetlavie.com, sa première interview.   Vous vous intéressez à la société Transgene, retrouvez toutes les interview des dirigeants déjà diffusée sur laWeb Tv via ce lien : Vidéos Transgene   À propos de Transgene Transgene (Euronext : TNG) est une société de biotechnologie qui conçoit et développe des produits d’immunothérapie contre les cancers. Ces produits utilisent des vecteurs viraux pour détruire directement ou indirectement les cellules cancéreuses. Le portefeuille de Transgene se compose de quatre immunothérapies en développement clinique : deux vaccins thérapeutiques (TG4001, développé dans les cancers HPV-positifs, et TG4050, le premier traitement individualisé issu de la plateforme myvac®) et de deux virus oncolytiques (TG6002, un virus oncolytique évalué dans les tumeurs solides et BT-001, le premier oncolytique issu de la plateforme Invir.IO). Avec myvac®, la vaccination thérapeutique entre dans la médecine de précision avec une immunothérapie innovante spécifique à chaque patient. Cette immunothérapie permet d’intégrer, dans un vecteur viral, des mutations tumorales identifiées et sélectionnées grâce à une intelligence artificielle apportée par son partenaire NEC. Invir.IO, une plateforme issue de l’expertise de Transgene en ingénierie des vecteurs viraux permet de concevoir une nouvelle génération de virus oncolytiques multifonctionnels. Transgene a signé un accord de collaboration avec AstraZeneca portant sur cette plateforme. L’article Hedi Ben Brahim Pdg Transgene : “Les vaccins thérapeutiques individualisés deviennent une réalité” : Transgene est une société de biotechnologie qui conçoit et développe des produits d’immunothérapie contre les cancers est apparu en premier sur La Bourse et la Vie TV L'information éco à valeur ajoutée.

Rama Rao is the CEO of Bloqcube, a startup he started in 2017 that uses blockchain technology to improve clinical trials operations and research data management. Rama is an industry veteran with over 20 years of experience in life sciences having spent most of his career as a finance executive at Eli Lilly and Novartis. Company Website: https://bloqcube.com/ Disclaimer: The Health Unchained podcast is for informational and entertainment purposes only and we are not providing any sort of legal, financial, or medical advice. Please do your own research and due diligence before making any important decisions related to these matters. Show Notes •Introduction to Rama's background •Why did you get into healthcare? •How does your experience in pharma shape your understanding of clinical research innovation? •Eroom's law is the observation that drug discovery is becoming slower and more expensive over time, despite improvements in technology, a trend first observed in the 1980s. The cost of developing a new drug roughly doubles every nine years. •Origins of Bloqcube - value proposition •How is the company structured? How big is the team? •Why blockchain in healthcare? •COVID-19 Clinical Trials/Studies •How do you think the government has handled the COVID19 response so far? •Remote Monitoring and Telemedicine •What is your opinion on the decision to send COVID-19 data to HHS instead of CDC? •Describe the actual User Experience - Patients, Providers, researchers, others •General technical specifications (architecture) of Bloqcube oData privacy & Encryption security oIdentity verification oETMF – Electronic Trial Master Form oStripe payment processing oOpen Source software oProtocol layers – Hyperledger fabric oAre you issuing tokens? •Bloqcube was reviewed by HITLAB •Smart Contracts for clinical trials •Describe C2TA™ (Continuous Clinical Trial Accounting) and why it's important - "this minimizes reconciliations and integrates into existing financial systems and closes the loop with a financial planning record indicating the budget and actuals." •Will this improve patient adherence monitoring during clinical research? •Regulatory audits and blockchain auditability •How do you make money? •Technical and social adoption challenges •Industry Partners and concept traction - existing partners and pilot projects (NTT DATA partnership, results of India diabetes observational study pilot) •Can you describe the competitive landscape and any direct competitors to your business? •Who is your favorite scientist of all time? Norman Ernest Borlaug, Sir Chandrasekhara Venkata Raman, Albert Einstein Mentioned guests – Jim Nasr: https://soundcloud.com/healthunchained/ep-59-tracking-covid19-on-hashgraph-jim-nasr-ceo-acoer Dr. Alex Cahana: https://soundcloud.com/healthunchained/insights-from-the-crypto-sherpa-dr-alex-cahana-venture-partner-cryptooracle News Corner https://www.transgene.fr/wp-content/uploads/20200709-PR-Hypertrust-Transgene-final-EN.pdf The life sciences industry continues to develop new immunotherapies that can specifically treat a patient based on their personal genes and diagnosis. A recent partnership was announced on July 9th 2020, between Transgene, a French biopharma company, and Hypertrust Patient Data Care, a blockchain-based supply and data chain company. Emerging personalized treatments have a massive need for trustworthy and decentralized solutions, due to the strong cross-company collaborative nature of the production process. Developing new clinical protocols for personalized medicine is one of the toughest supply and data chain problems facing the industry and it’s great to see that blockchain technologies are beginning to be tested at the enterprise level. Health Unchained Links Website: https://healthunchained.org Telegram: t.me/healthunchained Twitter: twitter.com/Healthunchaind Bert’s Blockchain and Healthcare Weekly Newsletter: https://bert.substack.com/

暗号資産（仮想通貨）・ブロックチェーンに特化した幻冬舎のメディア「あたらしい経済 https://www.neweconomy.jp/ 」がおくる、ラジオ番組です。毎日最新ニュース解説とコラムをお届けします。 ・G20がデジタル通貨を事実上容認し10月には規制論議が本格化か ・イーサリアム（Ethereum）2.0のローンチが2021年に持ち越しか ・Coinbase（コインベースが）がU.S.Secret Service（米国シークレットサービス）へブロックチェーン分析ソフトを4年契約18万3750ドルで提供 ・フランスの製薬会社Transgene（トランスジーン）が臨床試験にブロックチェーンを活用 ニュースの詳細や、アーカイブやその他の記事はこちらから https://www.neweconomy.jp/

Mexico is the center of origin for maize, and there is a substantial interest in protecting the genetic integrity of this limited resource.  At the same time Mexico’s population is growing, and farmers potentially find [...]

This week’s podcast is an important discussion, a cautionary tale of what can happen when genetically-engineered crops are introduced to the environment.  Circumstances may lead to release of the transgene into sexually compatible wild plants, [...]

Die akute myeloische Leukämie (AML) ist aus genetischer Sicht eine sehr heterogene Erkrankung. Rezeptortyrosinkinasen (RTKs) wie FLT3 sind in der Leukämogenese von zentraler Bedeutung. Durch Mutationen aktivierte RTKs sind allerdings alleine nicht in der Lage eine AML zu induzieren. Die Kooperation mit anderen Mutationen ist hierfür notwendig. Zu den am häufigsten gemeinsam auftretenden Mutationen in der AML gehören NPM1- und FLT3-ITD- (internal tandem duplication) Mutationen. Klinische Daten zeigen, dass eine FLT3-ITD die gute Prognose von NPM1-mutierten (NPM1c+) Patienten in Abhängigkeit des FLT3-ITD-mRNA-Levels in negativer Weise beeinflusst. Dies lässt auf ein pathogenes Zusammenwirken beider Genmutationen in der AML schließen, welches im Rahmen dieser Arbeit untersucht wurde. Dazu wurde basierend auf der humanen AML-Zelllinie OCI-AML3 mittels stabiler, lentiviraler Transduktion das erste zelluläre Modellsystem etabliert, das die relevanten Genotypen (NPM1c+/FLT3-ITD; NPM1c+/FLT3-WT) sowie unterschiedliche Verhältnisse von FLT3-ITD zu FLT3-WT (ITD/WT) im NPM1-mutierten Hintergrund modelliert. Zunächst wurde die NPM1-Mutation sowie die Funktionalität des FLT3-WT- und FLT3-ITD-Rezeptors in den nativen und transgenen Zellen bestätigt. Mit Hilfe des Zellmodells konnte gezeigt werden, dass Zellen, die beide Mutationen tragen, in vitro wie auch in vivo einen Wachstumsvorteil besitzen. Dieser vergrößerte sich zudem mit zunehmendem ITD/WT-Verhältnis. Ab einem bestimmten ITD/WT-Verhältnis konnte dieser Wachstumsvorteil in vitro mit einem FLT3-Inhibitor über eine gewisse Dauer gehemmt werden. Diese Ergebnisse könnten auf ein Zusammenwirken der beiden Mutationen bei der Leukämogenese hinweisen und eine Ursache für die schlechteren Überlebenskurven von Patienten mit beiden Mutationen und zunehmender FLT3-ITD-Last darstellen. Der insgesamt jedoch nur schwach ausgeprägte Phänotyp des etablierten Zellmodells erfordert zum eindeutigen Nachweis der funktionellen Interaktion von NPM1- und FLT3-ITD Mutationen ein alternatives Modellsystem. In diesem Zellmodell zeigten Zellen, die den FLT3-WT-Rezeptor überexprimierten, ebenfalls einen schwachen Wachstumsvorteil gegenüber nativen Zellen mit endogener FLT3-WT-Expression. Neben aktivierenden FLT3-Mutationen wie einer ITD, führen auch hohe FLT3-WT-Expressionslevel zur konstitutiven Aktivierung der FLT3-Kinase und verschlechtern die Prognose der Patienten. Deshalb wurde in dieser Arbeit mit der Untersuchung der transkriptionellen Regulation von FLT3, als mögliche Ursache hoher FLT3-WT-Expressionslevel, begonnen. In silico wurden im proximalen FLT3-Promotor Bindestellen für die hämatopoetischen Transkriptionsfaktoren (TF) PAX5 und MYB identifiziert. Mit Hilfe des Dual-Luciferase® Reporter Assay Systems wurden PAX5 als schwacher Repressor und MYB als Aktivator des Flt3-Promotors bestätigt. Auch der Transkriptionsfaktor CEBPA verhielt sich auf gleiche Weise als Aktivator der Flt3-Promotoraktivität. Eine Punktmutation im CEBPA-Gen, die aus zwei AML-Fällen bekannt ist, führte zu einer erhöhten Flt3-Promotoraktivität. Die Identifizierung weiterer mutierter, FLT3-regulierender TF und ihre Korrelation mit der FLT3-Expression sollen zukünftig tiefere Einblicke in die transkriptionelle Regulierung von FLT3 als Ursache der FLT3-Überexpression in AML-Patienten gewähren. Für eine Reihe von in AML-Patienten gefundenen Mutationen ist deren Rolle in der Pathogenese der AML noch unbekannt. Dazu gehören Mutationen in den Rezeptortyrosinkinasen DDR1 und DDR2. In der vorliegenden Arbeit wurden DDR1- und DDR2-Mutationen stabil in Ba/F3 Zellen und transient in HEK-293T Zellen exprimiert, um ihr transformierendes Potential zu untersuchen und diese funktionell zu charakterisieren. Transgene, DDR1- und DDR2-exprimierende Ba/F3 Zellen zeigten keinen transformierenden Phänotyp. Weitere Untersuchungen zeigten eine konstitutive Phosphorylierung der extrazellulären DDR2-Mutanten (G222R, M291I) in HEK-293T Zellen und eine Adhäsion von Ba/F3 Zellen mit wildtypischem sowie mutiertem DDR1-Rezeptor in Anwesenheit des DDR-Liganden Kollagen. DDR1- und DDR2-Rezeptoren sind bisher vor allem in soliden Tumoren untersucht. Weitere funktionelle Analysen sind notwendig, um ihren Stellenwert bei der Entstehung von AML zu erfassen. Diese Arbeit zeigt, dass Rezeptortyrosinkinasen in der Leukämogenese auf unterschiedliche Weise eine wesentliche Rolle spielen können. Da Rezeptortyrosinkinasen zudem wichtige Zielmoleküle für therapeutische Ansätze darstellen, sind sie von besonderer Bedeutung.

Immer noch versterben etwa 50 % der Erwachsenen und mehr als 10 % der Kinder mit akuter lymphatischer Leukämie (ALL) an ihrer Tumorerkrankung, weshalb eine Verbesserung der Therapie der ALL dringend notwendig ist. Ruhende Zellen stellen eine therapierelevante Subfraktion von Tumorzellen dar, weil sie Krankheitspersistenz und -rückfall induzieren können. Studien an ruhenden ALL-Zellen waren bisher unmöglich, weil rundende Zellen nicht isoliert werden konnten. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, eine Methode zur Isolierung von ruhenden ALL-Zellen zu entwickeln und damit zu beginnen die isolierten Zellen zu charakterisieren, um langfristig Therapien gegen diese zu entwickeln. Auf Grund unphysiologischer Wachstumseigenschaften eignen sich weder Zelllinien noch primäre Patientenzellen für die Isolierung ruhender ALL-Zellen, deswegen wurde das individualisierte ALL-Xenograftmodell in Kombination mit gentechnischer Manipulation der ALL-Zellen eingesetzt. Dazu wurden die primären Tumorzellen von drei Kindern mit ALL in immunsupprimierten Mäusen vermehrt und lentiviral transduziert, wodurch diese eine Luciferase, ein fluoreszierendes Protein und NGFR exprimierten. In zwei aufeinander folgenden Anreicherungsschritten wurden mit Hilfe der Transgene geringste Mengen der menschlichen Leukämiezellen aus dem Knochenmark der Mäuse isoliert. Unter Verwendung des Proliferationsmarkers CFSE wurde erstmals nachgewiesen, dass sich eine sehr kleine Subfraktion der ALL-Zellen über lange Zeit in vivo nicht teilt. Im Gegensatz zur Mehrheit der sich teilenden Zellen zeigten ruhende ALL-Zellen eine komplette Resistenz gegenüber systemischer Chemotherapie in der Maus. Retransplantationsversuche wiesen darauf hin, dass sowohl das fehlende Wachstum als auch die Chemoresistenz durch Faktoren der Knochenmarksnische bedingt wurden und keine zellautonomen Charakteristika darstellten. Die vorliegende Arbeit zeigt, dass in der ALL eine Subfraktion von sich wenig teilenden Zellen existiert, die hochresistent gegen Chemotherapie in vivo ist. Die hier entwickelten Modelle können nun eingesetzt werden, um neue Therapien gegen ruhende ALL-Zellen zu entwickeln.

Perikles Simon, Sports Medicine, Rehabilitation and Disease Prevention, Johannes Gutenberg-University Mainz, GERMANY speaks on " Pitfalls and Potential of Transgene-Based Approaches for the Detection of Gene Doping". This seminar has been recorded by ICGEB Trieste

Integrating non-viral vectors based on transposable elements are widely used for genetically engineering mammalian cells in functional genomics and therapeutic gene transfer. For the Sleeping Beauty (SB) transposase system it was demonstrated that convergent transcription driven by the SB transposase inverted repeats (IRs) in eukaryotic cells occurs after somatic integration. This could lead to formation of double-stranded RNAs potentially presenting targets for the RNA interference (RNAi) machinery and subsequently resulting into silencing of the transgene. Therefore, we aimed at investigating transgene expression upon transposition under RNA interference knockdown conditions. To establish RNAi knockdown cell lines we took advantage of the P19 protein, which is derived from the tomato bushy stunt virus. P19 binds and inhibits 21 nucleotides long, small-interfering RNAs and was shown to sufficiently suppress RNAi. We found that transgene expression upon SB mediated transposition was enhanced, resulting into a 3.2-fold increased amount of colony forming units (CFU) after transposition. In contrast, if the transgene cassette is insulated from the influence of chromosomal position effects by the chicken-derived cHS4 insulating sequences or when applying the Forg Prince transposon system, that displays only negligible transcriptional activity, similar numbers of CFUs were obtained. In summary, we provide evidence for the first time that after somatic integration transposon derived transgene expression is regulated by the endogenous RNAi machinery. In the future this finding will help to further improve the molecular design of the SB transposase vector system.

Plasmid based gene therapy approaches often lack long term transgene expression in vivo due to silencing or loss of the vector. One way to overcome these limitations is to combine non-silenced promoters with strong viral enhancers. Here we combine cytomegalovirus (CMV) derived enhancer elements with the strong, human elongation factor 1 alpha (EF1a) promoter in a plasmid backbone devoid of potentially immunostimulating CpG sequences. The transgene expression of plasmids containing either the murine or human immediate early enhancer were monitored in vivo. The human CMV enhancer led to an enhanced and prolonged transgene signal compared to the murine enhancer. The elevated expression in the case of the human enhancer correlated with a higher plasmid copy number found in the liver two months after gene delivery. The transgene expression could be even further increased by using a new synthetic promoter, SCEP (shuffled CMV EF1 promoter) instead of the EF1 promoter, in combination with the human CMV enhancer. Secondly, to reach a tissue specific and high expression in liver carcinoma a plasmid with the AFP promoter was combined with the human CMV enhancer.

Thu, 7 Oct 2010 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/12166/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/12166/1/Stahl_Katharina.pdf Stahl, Katharina

Hintergrund Humane mesenchymale Stammzellen sind ein viel versprechendes Ziel für die ex vivo Gentherapie, und Lentiviren sind exzellente Vehikel für den Gentransfer in hMSCs, da sie hohe Transduktionsfrequenzen mit langfristiger Genexpression erreichen. Dennoch könnte die Seneszenz von hMSCs die therapeutische Anwendung, infolge von zeitaufwendiger Zellselektion und Virus Titration, limitieren. Diese Arbeit beschreibt optimierte Protokolle für hoch effizienten ex vivo lentiviralen Gentransfer in hMSCs und eine schnelle und verlässliche Methode, um den funktionellen lentiviralen Titer mittels quantitativer Polymerase-Kettenreaktion (qPCR) zu bestimmen. Methoden EGFP wurde als Markergen/-protein verwendet, um verschiedene lentivirale Expressionsvektoren herzustellen. Die Produktion von Lentiviren wurde mit verschiedenen Verpackungssystemen getestet. Der Prozentsatz transduzierter Zellen wurde durch Polybrene und Blasticidinselektion erhöht. hMSCs von verschiedenen Spendern wurden mittels PCR und Western Blot analysiert. Regulierte Genexpression wurde durch Herstellung eines Tet-On selbstregulierten Expressionsvektors erreicht. Mit einem p24 ELISA-Test wurden übrig gebliebene virale Partikel im Zellkulturüberstand detektiert. Die Effizienz des lentiviralen Gentransfers wurde mittels Fluoreszenz-Mikroskopie beobachtet und mittels qRT-PCR und FACS-Analyse quantifiziert. Die lentiviralen Titer wurden mit qRT-PCR der exprimierten Transgene bestimmt. Die hMSC Differenzierung wurde histologisch untersucht. Ergebnisse Selbstinaktivierende lentivirale Vektoren der dritten Generation zeigten hoch effizienten Gentransfer in hMSCs bei der Verwendung von Polybrene. Die Blasticidinselektion hat den Prozentsatz der transgenen Zellen weiter erhöht unter Selektion von Zellen die mehrere Transgenkopien tragen. Die positiven Effekte von Polybrene und der Blasticidinselektion sind nicht von hMSCs eines speziellen Spenders abhängig. Präzise Regulation der Genexpression wurde durch Herstellung eines selbstregulierten Tet-On-Expressionssystems erreicht. Keine viralen Antigene wurden im Zellkulturüberstand nach aufeinander folgenden Medienwechseln detektiert, was auf die Abwesenheit von infektiösen Partikeln nach einigen Tagen hindeutet. In dieser Arbeit wurde ein starker linearer Zusammenhang zwischen der Virusverdünnung und der Stärke der Transgenexpression mittels qPCR Analysen beobachtet, wodurch die Virustitration durch Quantifizierung der Transgenexpression ermöglicht wird. Abschließend wurde durch Differenzierung in die adipogene, osteogene und chondrogene Richtung gezeigt, dass transduzierte hMSCs ihren Stammzellcharakter beibehalten haben und dass die Transgenexpression durch die Differenzierung nicht beeinflusst wurde. Schlussfolgerungen Die Quantifizierung der Transgen-Kopienanzahl durch qRT-PCR ist eine schnelle und verlässliche Methode, um den funktionellen lentiviralen Titer nach dem ex vivo Gentransfer in hMSCs zu bestimmen. Die in dieser Arbeit optimierte und charakterisierte Methode für die effiziente lentivirale Transduktion von humanen mesenchymalen Stammzellen, in Verbindung mit regulierbarer Transgenexpression, ist ein sicheres, verlässliches und leistungsstarkes Verfahren und bildet eine aussichtsreiche Grundlage für zukünftige Gentherapie und Tissue Engineering Anwendungen in hMSCs.

Die ersten transgenen Tiere wurden durch viralen Gentransfer erzeugt. Für die initialen Versuche wurden prototypische Retroviren, wie der murine Leukämievirus (MuLV), verwendet. Es stellte sich jedoch heraus, daß die proviralen Gene in diesen Mäusen stark methyliert waren und nicht oder nur in geringen Mengen exprimiert wurden ("gene silencing"). Ein Durchbruch für die virale Transgenese kam erst mit der Verwendung lentiviraler Vektoren. Lentiviren sind in der Lage eine Vielzahl verschiedener Zelllinien (auch terminal differenzierte Zellen) effizient zu transduzieren und ihre virale DNA stabil in das Wirts-Chromosom zu integrieren. Obwohl bereits transgene Nagetiere durch lentivirale Vektoren erzeugt werden konnten, waren initiale Versuche in höheren Säugetieren (Affen) nicht erfolgreich. Dies warf die Frage auf, ob lentiviraler Gentransfer in höheren Säugetieren anwendbar ist. Transgene Schweine und Rinder wären von großer biomedizinischer Bedeutung. Ihre potentiellen Anwendungsmöglichkeiten reichen von der Produktion pharmazeutisch relevanter Proteine über klinische Modelle zur Untersuchung humaner Erkrankungen bis hin zur Xenotransplantation. Obwohl mit der klassischen DNA-Mikroinjektion transgene Schweine und Rinder erzeugt werden können, ist das Verfahren in diesen Spezies jedoch sehr ineffizient und dementsprechend kostenintensiv. Da hohe Produktionskosten den möglichen Anwendungen entgegenstehen, wurde versucht ein effizientes Verfahren, daß auf lentiviralem Gentransfer beruht, zu entwickeln. Für die Entwicklung der lentiviralen Transgenese in Schweinen wurden Zygoten mit Lentiviren infiziert und in Empfänger transferiert. Die verwendeten Vektoren trugen einen eGFP-Reporter, um die Effizienz der Transduktion schnell und einfach beurteilen zu können. Von den 46 geborenen Ferkeln waren 32 transgen und 30 zeigten Transgen-Expression (65%). Die hohe Transgenese-Rate, die mit dem lentiviralen Gentransfer erreicht werden konnte, stellt eine 27fache Steigerung der Effizienz im Vergleich zur klassischen DNA-Mikroinjektion dar. Die Untersuchung der transgenen Ferkel zeigte Transgen-Expression in allen Organe und keinen sichtbaren Mosaicismus der F0-Tiere. Des weiteren konnte eine nahezu lineare Korrelation zwischen der Anzahl der integrierten Proviren und der Höhe der Transgen-Expression gezeigt werden. Die Expression der lentiviralen Transgene war stabil und wurde nicht nach der Geburt der Tiere abgeschaltet. Durch die Wahl geeigneter Promotoren war es möglich sowohl ubiquitäre, als auch Gewebe-spezifische Expression (in der Haut) zu erreichen. Die integrierten Proviren wurden über die Keimbahn an die nächste Generation weitergegeben und in der F1-Generation unverändert stark exprimiert. Die Weitergabe der integrierten Proviren an die nächste Generation ist die Basis für Erzeugung transgener Linien. Zur Erzeugung transgener Rinder wurden initial ebenfalls Zygoten infiziert. Diese wurden in vitro bis zum Blastozysten-Stadium (Tag 7) kultiviert. Überraschenderweise zeigten die Blastozysten nur sehr geringe Transgen-Expression. Nachdem durch Transfer solcher Blastozysten keine transgenen Nachkommen erzeugt werden konnten, wurde zur Infektion von Oozyten (vor der Befruchtung) gewechselt. In den aus Oozyten-Infektion stammenden Blastozysten war die Gentransfer-Rate wesentlich höher (insgesamt 83% eGFP+ Blastozysten) und die eGFP-Fluoreszenz um ein Vielfaches intensiver. Acht eGFP-positive Blastozysten wurden in vier Empfänger transferiert, was zur Geburt von vier transgenen Rindern führte. Alle erzeugten transgenen Rinder zeigten stabile Expression des Transgens in allen untersuchten Organen. Als eine weitere Methode zur Erzeugung lentiviral transgener Rinder wurde der Kerntransfer (NT) untersucht. Hierzu wurden Haut-Fibroblasten vom Rind lentiviral transduziert und als Donor-Zellen verwendet. Dieser Ansatz war zwar wesentlich ineffizienter als die direkte Infektion von Oozyten, trotzdem konnte ein transgenes Rind erzeugt werden, das starke Transgen-Expression zeigte. Da die Expression lentiviraler Integranten offenbar durch das klassische Klonen nicht abgeschaltet wird, eröffnet diese Methode viele Möglichkeiten für die Produktion transgener Tiere. Im letzten Teil dieser Arbeit wurde die epigenetische Regulation lentiviraler Vektoren untersucht. Dazu wurden transgene Founder-Schweine verpaart, um Tiere mit einzelnen lentiviralen Integranten (F1-Generation) zu erzeugen. Die Expressions-Analyse dieser Schweine zeigte, daß etwa 1/3 der Proviren nur schwach bzw. gar nicht exprimierten. Durch Southern Blot Analysen mit Methylierungs-sensitiven Restriktions-Enzymen wurde der Grad der proviralen Methylierung bestimmt. Dieser korrelierte negativ mit der Transgen-Expression. Zur genaueren Analyse der Methylierungs-Dichte wurden die verschiedenen Proviren mittels Bisulfit-Sequenzierung untersucht. Es stellte sich heraus, daß in den schwach bzw. nicht-exprimierenden Integranten nahezu alle CpG-Dinukleotide innerhalb der untersuchten Sequenzen methyliert waren. Um den Einfluß der Methylierung auf die Expression zu untersuchen, wurde von einem nicht-exprimierenden Schwein Haut-Fibroblasten isoliert und mit dem Methylase-Inhibitor 5-AzaC inkubiert. Dadurch konnte die abgeschaltete eGFP-Expression wieder reaktiviert werden. Dagegen hatte der Histon-Deacetylase Inhibitor TSA keinen starken Einfluß auf die Transgen-Expression. Chromatin-Modifikationen durch TSA-abhängige HDACs scheinen also bei der epigenetischen Regulation lentiviraler Vektoren in Schweinen keine entscheidende Rolle zu spielen. Abschließend konnte durch einen Methylierungs-sensitiven Southern Blot gezeigt werden, daß der Grad der DNA-Methylierung durch Hemmung zellulärer Methylasen (mit 5-AzaC) signifikant reduziert wurde. Lentiviraler Gentransfer stellte sich als eine sehr effiziente Methode zur Erzeugung transgener Schweine und Rinder heraus. Das Verfahren zeichnet sich insbesondere durch hohe Transgenese-Raten und hohe Transgen-Expression aus. Außerdem werden die lentiviralen Integranten über die Keimbahn an die nächste Generation weitergegeben. Obwohl die Transkription einiger Proviren epigenetisch reguliert wurde, ist die Häufigkeit des aufgetretenen Silencings deutlich geringer als bei prototypischen Retroviren.

Background: Gastric carcinoma is one of the most frequent cancers worldwide. Patients with gastric cancer at an advanced disease stage have a poor prognosis, due to the limited efficacy of available therapies. Therefore, the development of new therapies, like immunotherapy for the treatment of gastric cancer is of utmost importance. Since the usability of existing preclinical models for the evaluation of immunotherapies for gastric adenocarcinomas is limited, the goal of the present study was to establish murine in vivo models which allow the stepwise improvement of immunotherapies for gastric cancer. Methods: Since no murine gastric adenocarcinoma cell lines are available we established four cell lines (424GC, mGC3, mGC5, mGC8) from spontaneously developing tumors of CEA424/SV40 T antigen (CEA424/Tag) mice and three cell lines derived from double-transgenic offsprings of CEA424/Tag mice mated with human carcinoembryonic antigen (CEA)-transgenic (CEA424/TagCEA) mice (mGC2(CEA), mGC4(CEA), mGC11(CEA)). CEA424/Tag is a transgenic C57BL/6 mouse strain harboring the Tag under the control of a -424/-8 bp CEA gene promoter which leads to the development of invasive adenocarcinoma in the glandular stomach. Tumor cell lines established from CEA424/Tag- CEA mice express the well defined tumor antigen CEA under the control of its natural regulatory elements. Results: The epithelial origin of the tumor cells was proven by morphological criteria including the presence of mucin within the cells and the expression of the cell adhesion molecules EpCAM and CEACAM1. All cell lines consistently express the transgenes CEA and/or Tag and MHC class I molecules leading to their susceptibility to lysis by Tag-specific CTL in vitro. Despite the presentation of CTL-epitopes derived from the transgene products the tumor cell lines were tumorigenic when grafted into C57BL/6, CEA424/Tag or CEA424/Tag- CEA-transgenic hosts and no significant differences in tumor take and tumor growth were observed in the different hosts. Although no spontaneous tumor rejection was observed, vaccination of C57BL/6 mice with lysates from gastric carcinoma cell lines protected C57BL/6 mice from tumor challenge, demonstrating the tumorigenicity of the tumor cell lines in nontransgenic mice of the H-2(b) haplotype. Conclusion: These tumor cell lines grafted in different syngeneic hosts should prove to be very useful to optimize immunotherapy regimens to be finally tested in transgenic animals developing primary gastric carcinomas.

Fri, 23 Jul 2004 12:00:00 +0100 https://edoc.ub.uni-muenchen.de/6340/ https://edoc.ub.uni-muenchen.de/6340/1/Unger_Nina.pdf Unger, Nina

Die vorliegende Arbeit wurde in zwei Bereiche gegliedert. Der erste Themenbereich beschäftigte sich mit der Transformation von pflanzlichen Mitochondrien bzw. mit den Voraussetzungen, die erfüllt sein müssen, um Mitochondrien höherer Pflanzen zu transformieren. Im zweiten Themenbereich wurde die Regulation der Lysinbiosynthese erstmals mit Hilfe der Plastidentransformation modifiziert sowie ein universeller plastidärer Selektionsmarker entwickelt und etabliert. Mitochondrientransformation- In dieser Arbeit wurden zwei Strategien zur Transformation von Mitochondrien höherer Pflanzen entwickelt. Zum einen wurde ein mitochondrienspezifischer Ansatz gewählt, d.h. es wurden Selektionsmarker verwendet, die eine hemmende Wirkung auf die Atmungskette der Mitochondrien besitzen. Zum anderen wurden in Anlehnung an seit die seit 1990 erfolgreich durchführbare Plastidentransformation generelle Inhibitoren der Proteinbiosynthese verwendet, welche durch die Produkte der entsprechenden in die Mitochondrien eingebrachten Resistenzgene detoxifiziert werden sollten. Markergenstrategie- Geeignete Selektionsbedingungen zur Identifizierung von mitochondrialen Transformanten wurden bei Tabakblättern und Tabakprotoplasten mit den Antibiotika Blasticidin, Chloramphenicol und Hygromycin als Hemmstoffe ermittelt. Aus Transformationen mit den mitochondrialen Transformationskassetten pBMhph II, pBMhph III und pBMhph IV konnten über 200 Hygromycin-resistente Linien selektiert und charakterisiert werden. PCR- und Southern-Analysen lassen bei mindestens 7 Linien eine zielgerichtete mitochondriale Integration des Transgens vermuten. Möglicherweise sind aber nur wenige Kopien des Transgens in das Mitochondriengenom inseriert bzw. repliziert worden, was eine eindeutige Charakterisierung erschwert. Bei einer großen Anzahl resistenter Linien handelt es sich wahrscheinlich um funktionelle zielortfremde Integrationen der Transformationskassetten in die Plastiden-, Kern- oder Mitochondriengenome. Mitochondrienspezifischer Transformationsansatz- Die in dieser Arbeit entwickelten mitochondrienspezifischen Transformationsvektoren pUMmyx II, pUMglu II, pUMarg II und pUManti II enthalten ein Fragment des mitochondrialen cob-Gens. In dieses cob-Fragment wurden Punktmutationen eingeführt, die zu einer Veränderung der Sekundär- bzw. Tertiärstruktur des Apocytochroms b führen. Bei einer korrekten homologen Integration dieses modifizierten cob-Fragmentes in das Mitochondriengenom sind die Inhibitoren Antimycin A, Myxothiazol und Moa-Stilben nicht mehr in der Lage, an den Komplex III der mitochondrialen Atmungskette zu binden. Zur Bestimmung optimaler Selektionsbedingungen von mitochondrialen Transformanten mit den Hemmstoffen Antimycin A, Myxothiazol und Moa-Stilben wurden Testreihen mit Tabakblättern, Tabakprotoplasten sowie Tabak- und Arabidopsis-Suspensionskulturen durchgeführt. Bei „particle-gun“-Transformationen von Tabakblättern mit der Transformationskassette pUMarg II wurden 23 Moa-Stilben-resistente Linien selektiert. Bei 18 Linien konnte eine Integration des mutierten cob-Fragmentes eindeutig per PCR und Sequenzierung nachgewiesen werden. Ob es sich dabei um eine mitochondriale Integration handelt, konnte nicht eindeutig belegt werden. In diesem Fall wäre jedoch zu klären, auf welchem Mechanismus der offensichtliche selektive Vorteil der mit dem Transformations-vektor transformierten Pflanzen beruht, da die Integration des cob-Gen-Fragmentes nur innerhalb des mitochondrialen Zielortes funktionell sein dürfte. Plastidentransformation- Bei dem plastidären Transformationsansatz dieser Arbeit wurden zwei Ziele verfolgt. Zum einen wurde der „feedback“-Regulationsmechanismus der DHDPS innerhalb des Aspartat-Stoffwechsels durch die Integration eines insensitiven dhdps-Gens in die Plastiden von Tabak und Kartoffel beeinträchtigt. Der Gehalt der essentiellen Aminosäure Lysin wird somit gesteigert. Zum anderen wurde das insensitive dhdps-Gen als Markergen genutzt, um eine Selektion von plastidären Transformanten auf dem Lysinanalogon AEC zu ermöglichen. Erhöhung des Lysingehaltes- Es konnten 34 Spectinomycin-resistente Tabakklone selektiert werden, die mit der Transformationskassette pHoDh2b transformiert wurden. Die molekularbiologische Charakterisierung der Transformanten konnte bei 8 Linien eindeutig eine korrekte plastidäre Integration der Transgene belegen. Biochemische Analysen zeigen eine bis zu 32-fache Erhöhung an freiem Lysin im Blattgewebe von plastidären Transformanten. Es war damit erstmals mit der Plastidentransformation möglich, regulatorisch die Lysinbiosynthese zu verändern. AEC als plastidärer Selektionsmarker- AEC (S-Aminoethyl-L-Cystein) konkurriert als Lysinanalogon mit Lysin um den Einbau in Polypeptide. Wird die AEC-Konzentration im pflanzlichen Gewebe im Vergleich mit Lysin zu hoch, kommt es zum Erliegen des Stoffwechsels und damit zum Absterben der Zelle. Durch die Überproduktion von Lysin in den Transformanten verschiebt sich das Verhältnis von AEC → Lysin. Es wird somit kompetitiv mehr Lysin in die Polypeptide eingebaut. Dies lässt sich als Selektionsvorteil nutzen. Mit dem „Markergen“ dhdps-r1 und AEC als selektivem Hemmstoff wurden insgesamt 49 Tabaklinien selektiert. Bei 3 selektierten Linien konnte eindeutig die korrekte plastidäre Intergration der Transformationskassette nachgewiesen werden. Es ist damit erstmals gelungen, einen antibiotikumfreien universell einsetzbaren plastidären Selektionsmarker zu etablieren. In weiteren Transformationsexperimenten konnten mit dem gleichen „Markergen“ plastidäre Tomatentransformanten identifiziert und charakterisiert werden (Diplomarbeit L. Schaeffer). Damit ist es bereits bei 2 Spezies gelungen, AEC als selektiven Hemmstoff einzusetzen. Bei weiterer Optimierung der Selektionsbedingungen dürfte es möglich sein, auch bei weiteren Pflanzenspezies diesen universellen Selektionsmarker zu etablieren.

In gene therapy, a clinically relevant therapeutic effect requires long-term expression of the desired gene at a level sufficient to correct or at least alleviate the underlying gene defect. One approach to achieve persistent as well as high-level transgene expression in a significant percentage of target cells would be to select cells expressing both the desired transgene and a linked selectable gene such as the human multi-drug resistance (MDR1) gene-in a bicistronic vector. Because of its accessibility, the skin is a very attractive target tissue to select genetically modified cells, allowing topical application of a selecting agent, thus minimizing potential toxic side effects. Among the potential selecting drugs, agents that block cell division, such as colchicine, are of particular interest because the use of anti-mitotic drugs takes advantage of the rapid keratinocyte ( KC) turnover in the epidermis and the need for continued proliferation to substitute the KC lost due to selection. Before assessing the therapeutic benefit of such an approach, several key questions need to be answered in preclinical models: ( 1) Does topical colchicine application achieve the desired in vivo effect by blocking KC mitosis without eliciting unwanted toxic side effects? ( 2) Are MDR-transduced (MDR+) human KC still able to proliferate and differentiate when treated with colchicine? ( 3) Can MDR+ KC be enriched by topical selection? ( 4) Does topical selection result in persistent transgene expression by selecting KC stem cells expressing MDR? To answer these questions and to test the feasibility of such an approach both an in vitro skin equivalent and an in vivo human skin graft model were developed in which MDR+ KC were treated with different dosages of colchicine. Quantitative and qualitative analyses of MDR expression in human KC showed that topical colchicine treatment selects high-level transgene expression in a high percentage of KC. Moreover, determination of transgene copy numbers demonstrated that MDR+ KC progenitor cells were enriched by topical selection resulting in long-term expression of the transgene in the skin. Thus, in summary, these models demonstrate that topical selection of MDR+ KC is a safe approach to efficiently enhance long-term gene expression in the skin and holds future promise for clinical gene therapy applications. Copyright (C) 2004 S. Karger AG, Basel.

Insulin-like growth factors (IGF-I and IGF-II) are expressed in many cell types and tissues and act in endocrine, autocrine or paracrine manner to regulate cellular proliferation, survival and differentiation. IGF actions are initiated upon binding to the type I IGF receptor (IGF-IR) and are modulated through interactions with a family of six secreted IGF-binding proteins (IGFBP-1 to -6). Although the six conserved IGFBPs are structurally related, each of them has specific characteristics and may have specific functions. Most knowledge about the IGFBPs has been gained from the numerous in vitro studies, their specific roles in vivo are largely unknown. Transgenic mice overexpressing a particular IGFBP allow us to investigate the specific functions of the corresponding IGFBP in vivo. To this end, IGFBP-4- and IGFBP-6-overexpressing models were established and analyzed in the present study. First, an expression vector containing the murine H-2Kb promoter and a human beta-globin splicing cassette was used to construct the transgenes, to obtain ubiquitous expression of the mouse Igfbp4 and Igfbp6 cDNA. Two lines of H-2Kb-mcIGFBP-4 and ten lines of H-2Kb-mcIGFBP-6 transgenic mice were generated. The transgene was ubiquitously expressed at RNA level in both transgenic models, however, at protein level, transgene expression was only detected in the spleen, thymus, lung and kidney of both H-2Kb-mcIGFBP-4 transgenic lines, but in no organ of H-2Kb-mcIGFBP-6 transgenic mice. Phenotypic analyses of the H-2Kb-mcIGFBP-4 transgenic model revealed that overexpression of IGFBP-4 had no significant effect on the postnatal body and organ growth, except that the weight and volume of thymus in 8- and 12-week-old transgenic mice were significantly reduced (p < 0.05) compared to the controls. Histomorphometric analysis demonstrated that the volume of the thymic cortex was significantly decreased in transgenic mice (p < 0.05), whereas that of the thymic medulla was not changed. The fractions of various cell types in the bone marrow, thymus, spleen, lymph node and peripheral blood were determined by flow cytometry. No significant difference was found between transgenic and control groups, suggesting that IGFBP-4 excess in the lymphoid organs did not affect the development of the lymphatic cells. The proliferative capacity of the splenocytes of transgenic animals was significantly reduced after Con A and LPS stimulation (p < 0.05), but not altered after the stimulation by anti-CD3 and anti-IgM/IL2. This is probably due to transgenic IGFBP-4 expression restricted in the non-lymphatic cells. However, detailed expression of the transgene warrants further investigation. In order to realize IGFBP-6-overexpressing mice, a second construct was designed, namely CMV-mgIGFBP-6, in which the mouse Igfbp6 genomic sequence was cloned under the control of the cytomegalovirus (CMV) promoter. Four independent lines of transgenic mice were generated. Transgene expression was high in the exocrine pancreas and relatively low in the lung and liver. The activities of serum IGFBPs were not different between transgenic mice and controls. In transgenic mice, high levels of active IGFBP-6 were detected in the luminal content of the duodenum, but neither in the luminal contents of other segments of the gastrointestinal tract (GIT), nor in tissue extracts of all GIT segments. Glucose homeostasis was not altered by IGFBP-6 expression. Postnatal body and organ growth was not affected in transgenic mice, except for the absolute and relative weight and length of duodenum which were significantly reduced in 4-month-old transgenic mice as compared to controls (p < 0.05). This reduction was mainly due to a significantly smaller volume and surface area of the tunica mucosa as determined by histomorphometric analsis. Our analysis of the first IGFBP-6 transgenic mouse model provides direct evidence for inhibition of intestinal growth by luminal IGFBP-6 excess. This finding is important in the context of neonatal intestinal growth of mammals, considering the fact that milk contains large amount of IGFBPs which may at least in part arrive intact in the intestine.

Insulin-like growth factor-II (IGF-II) is an important regulator of embryonic growth and differentiation, but its function in postnatal life is unclear. To address this point, we generated transgenic mice harboring fusion genes in which a human IGF-II complementary DNA is placed under the transcriptional control of the rat phosphoenolpyruvate carboxykinase promoter. Transgene-specific messenger RNA was detected in liver, kidney, and several parts of the gut. Serum IGF-II levels in transgenic mice were 2-3 times higher than those in controls and increased after starvation. Circulating IGF-I correlated negatively and IGF-binding protein-2 (IGFBP-2) positively with IGF-II levels, suggesting that IGF-I is displaced from IGFBPs by IGF-II and that IGFII is a major regulator of IGFBP-2. Serum levels of IGFBP-3 and IGFBP-4 tended to be higher in phosphoenolpyruvate carboxykinase- IGF-II transgenic mice than in controls, as evaluated by ligand blot analysis. Starvation reduced serum IGF-I, but increased IGFBP-2 in transgenic mice more markedly than in controls. Fasting insulin levels were significantly reduced in transgenic mice, whereas glucose levels were not influenced by elevated IGF-II. The body growth of 4- and 12- week-old mice was not significantly influenced by elevated IGF-II, but transgenic mice displayed increased kidney and testis weight at the age of 4 weeks, and increased adrenal weight at the age of 12 weeks. Our results demonstrate that elevated IGF-II in postnatal life has multiple endocrine consequences and subtle time-specific effects on organ growth.